细叶益母草化学成分及其抗血小板聚集活性的研究

目的对细叶益母草Leonurus sibiricus的化学成分和血小板聚集活性进行研究。方法细叶益母草提取液采用大孔树脂、MCI、反相C18、硅胶、Sephadex LH-20柱色谱及重结晶等方法进行分离纯化,所得化合物的结构通过波谱分析和TLC来鉴定,然后对其进行抗血小板聚集活性筛选。结果从中分离鉴定出9个化合物,分别为益母草碱（1）、丁香脂素（2）、梣皮树脂醇（3）、蒙花苷（4）、芹菜素-7-O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）、丁香酸乙酯（6）、对羟基苯甲酸乙酯（7）、对羟基苄乙醚（8）、β-胡萝卜苷（9）。结论化合物2~4、6、8均为首次从该植物中分离得到,其中3和6为首次从益母草属植物中分离得到。而且,化合物1、4和5对ADP诱导的血小板聚集均有明显的抑制作用。

多糖含量测定方法的比较

目的比较几种多糖的含量测定方法及其用不同标准品为对照的差异。方法对同一植物多糖,采用苯酚-硫酸法、蒽酮-硫酸法、DNS法以及葡萄糖、半乳糖、木糖三种标准品为对照进行含量测定,并用PMP衍生化后HPLC-DAD测定该多糖的单糖组成。结果苯酚-硫酸法用葡萄糖、半乳糖、木糖为对照的测定结果分别为60.60%、99.02%、55.86%;蒽酮-硫酸法的测定结果依次为59.16%、98.83%、127.69%;DNS法的测定结果依次为70.66%、69.45%、60.21%。结论多糖的含量测定应选取合适的单糖作为对照;苯酚-硫酸法以灵敏、受蛋白质干扰小而优;蒽酮-硫酸法需有合适的对照品为前提;DNS法以不同标准品为对照差异小而优。

辣蓼中芦丁的薄层及紫外光谱鉴别

目的：确定辣蓼中有效成分芦丁的定性鉴别和总黄酮含量的测定方法。方法：采用薄层层析(TLC)、紫外分光光度法(UV)对辣蓼分别进行理化鉴别和含量测定。结果：芦丁确系辣蓼中主要有效成分；同时建立UV检测中浓度在0．00808-0．04848mg／ml范围内与吸收度间的具有良好线性关系,其回归方程为A=11．4716C-0．0003(r=0．9928,n=6),平均回收率为97．95％(RSD=1．88％)；辣蓼样品中总黄酮的平均含量为1．939％。结论：本方法简便、快速、准确；为辣蓼开发新药及其相关质量标准的研究提供了依据。

RP-HPLC测定参仁强体胶囊中橙皮苷的含量

目的 测定参仁强体胶囊中橙皮苷的含量。方法 采用RP—HPLC法，用AichromBond—AQC18柱（250mm×4．6mm，5μm，），以甲醇-醋酸-水（35：4：61）为流动相，流速1．0ml·min^-1，检测波长283nm。结果 在0．074～1．107μg范围内与峰面积呈很好的线性关系，回归方程为：Y=1．000×10^6X＋2．155×10^4（r=0．9994），平均回收率为99．4％（RSD=0．27％，n=5）。3批样品中橙皮苷的平均含量分别为每粒1．35、1．38、1．41mg（n=2）。结论 所建方法简便、准确、重复性好，可用于参仁强体胶囊中橙皮苷的含量测定。

甘露聚糖肽的结构鉴定

采用离子交换柱层析和凝胶柱层析从甘露聚糖肽原料中分离纯化得到4种均一糖肽MT1-A,MT1-B,MT2-A和MT2-B;通过单糖组成分析、甲基化分析、氢核磁共振谱(~1H NMR)、红外光谱(IR)和氨基酸组成分析等手段对均一糖肽MT1-A,MT1-B和MT2-B的结构进行了鉴定.结果表明,3种均一糖肽的单糖组成、糖残基的连接方式与MT2-A相同,但是分子量以及氨基酸总量有所不同.测定了不同批次甘露聚糖肽原料的~1H NMR谱,以MT2-A的~1H NMR谱图为标准谱,以异头氢区域为鉴定区域,通过计算不同批次甘露聚糖肽原料以及其它3种均一糖肽与MT2-A的~1H NMR谱的相关系数,定量评价了不同批次甘露聚糖肽原料与4种均一糖肽的相似程度.结果表明,甘露聚糖肽是由糖链结构一致、分子量和氨基酸含量不同的几种均一糖肽构成的混合物.

当归调经胶囊的薄层鉴别与阿魏酸、芍药苷的测定

目的建立当归调经胶囊的质量控制方法。方法采用薄层色谱法鉴别当归、川芎、白芍,采用高效液相色谱法测定阿魏酸、芍药苷。阿魏酸色谱条件:流动相为甲醇-乙腈-1%冰乙酸溶液(5∶1∶10),柱温为室温,检测波长为323 nm;芍药苷色谱条件:流动相为乙腈-水(18∶82),柱温为室温,检测波长为280 nm。结果薄层鉴别斑点清晰,阴性无干扰。方法学研究表明,阿魏酸质量浓度在0.015 4～0.245 8 mg/mL范围内,溶液的峰面积与质量浓度线性关系良好,阿魏酸的平均回收率为98.1%,相对标准偏差(RSD)为1.37%;芍药苷质量浓度在0.020 05～0.320 8 mg/mL范围内,溶液的峰面积与质量浓度线性关系良好,平均加样回收率为99.05%,RSD为1.02%。结论该方法简便、准确、重复性好,可用于当归调经胶囊的质量控制。

甲基苯丙胺的神经毒性及对GFAP表达的研究

目的 探讨甲基苯丙胺 (MA)的神经毒性及胶质纤维酸性蛋白 (GFAP)的表达。方法 设立对照组和实验组 ,实验组予MA ,对照组予等体积生理盐水。采用HPLC测定不同脑区DA和 5 -HT的含量 ,用免疫组织化学方法检测GFAP的表达。结果 给予MA后 ,大鼠额叶皮层和纹状体的 5 -HT和DA均有下降 ;但对海马DA的影响不明显 ,对GFAP蛋白的表达明显上调。结论 MA对中枢 5 -HT、DA系统具有明显的神经毒性 ,并导致GFAP表达的上调。

SiRNA沉默JAB1表达抑制肝癌细胞增殖

目的观察沉默JAB1基因表达对人肝癌细胞HepG-2增殖的影响。方法利用RNA干扰技术构建pAVU6-JAB1 siRNA干扰质粒,将其转染HepG-2细胞,采用real-time PCR、Western blot等方法对JAB1表达进行检测,WST-8、流式细胞分析对细胞增殖的影响。结果成功构建pAVU6-JAB1 siRNA干扰质粒,转染HepG-2细胞后JAB1蛋白表达量较对照组明显降低,P27kip1蛋白表达量明显升高(P<0.01)。转染96 h后能显著抑制细胞增殖活性,由空载体转染组的99.6%±1.4%降至70.8%±1.6%。结论构建靶向JAB1基因的干扰质粒能下调JAB1基因的表达,上调P27kip1蛋白水平,并抑制HepG-2细胞在体外的增殖活性。

福康片治疗阿片类戒断症状的疗效及安全性评价

目的 系统评价中药福康片 (Fukangpian)治疗阿片类戒断症状的疗效和安全性。 方法 计算机检索Medline(196 6～ 2 0 0 4年 )、EMBase(1974～ 2 0 0 4年 )、CochraneLibrary 2 0 0 4年的CochraneControlledTrialsRegister、CurrentControlledTrials和TheNationalResearchRegister数据库。同时检索中国生物医学文献数据库、中文科技期刊全文数据库、中文学术期刊全文数据库和中国生物医学期刊文献数据库 (1980～2 0 0 4年 ) ,并辅以手工检索。对纳入研究的质量进行评价 ,用RevMan 4 2 7软件进行Meta分析。结果 共收集到有关福康片的文献 31篇 ,其中符合纳入标准的仅 2篇 ,4 0 3例。 2个研究比较了福康片组、可乐定组治疗期间的戒断症状总分 ,随着治疗的进展 ,总分逐渐下降 ,前 3天下降最为明显 ,福康片组较可乐定组下降更为明显 ,其差异有统计学意义 ,第 1、2、3、4天的 95 %CI分别为 (3 4 8,13 14 )、(4 79,15 10 )、(3 0 1,10 5 9)和 (5 4 7,12 5 2 ) ;治疗前各组HAMA量表评分较高 ,治疗后各组HAMA量表评分快速下降。 2 2个研究比较了福康片组、安慰剂组治疗期间的戒断症状总分 ,随着治疗的进展 ,总分逐渐下降 ,前 3天下降最为明显 ,福康片组较安慰剂组下降更为明显 ,其差异有统计学意义 ,第

甲基苯丙胺的神经毒性及5-羟色胺转运体信使RNA的表达

目的:观察甲基苯丙胺诱导实验大鼠的神经毒性及大鼠各脑区5-羟色胺转运体信使RNA的表达,寻找有效的神经保护性药物。方法:实验于2002-08/12在四川大学实验动物中心、四川大学华西医院分子病理实验室(四川省重点实验室)完成。选择Wistar雄性大鼠20只,随机分为对照组和实验组,每组10只。实验组给予甲基苯丙胺[20mg/kg,腹腔注射,每天两次(8:00,20:00),连续4d],对照组给予等体积生理盐水。采用高效液相色谱法测定各组大鼠不同脑区的多巴胺、5-羟色胺含量的改变,原位杂交方法检测5-羟色胺转运体信使RNA的表达。结果:20只大鼠均进入结果分析。①末次给药后第7天,实验组大鼠额叶皮质、海马和纹状体的5-羟色胺均有下降(P<0.05),在3个脑区的下降率分别为58.09%,56.76%和25.51%;额叶皮质和纹状体的多巴胺含量有一定降低(P<0.05),下降率分别为16.58%和22.28%,,而海马的多巴胺含量无明显变化(P>0.05)。②末次给药后第7天,实验组大鼠额叶皮质、海马和纹状体的5-羟色胺转运体信使RNA的表达均有一定程度的降低(P<0.05),分别下降60.87%,72.59%和36.50%。结论:甲基苯丙胺对实验大鼠的中枢5-羟色胺、多巴胺系统具有明显的神经毒性,并导致5-羟色胺转运体信使RNA表达的下调。

甜叶菊中甜菊素提取工艺研究

建立了从甜叶菊中提取药用辅料甜菊素的方法。以甜菊素的收率和含量为考察指标,采用L9(34)正交实验优化了乙醇提取工艺参数,提取液进一步纯化,并对其纯化步骤进行了优化和评价。实验结果表明,最佳提取工艺条件为90%的乙醇(v/v)回流提取3次,第1次用8倍量乙醇提取2h,第2次用6倍量乙醇提取1.5h,第3次用5倍量乙醇提取1h;再经膜过滤,滤液以0.3BV/h的流速先后经过阳、阴离子交换树脂,分别用50%乙醇(v/v)溶液洗脱,最后用80%乙醇(v/v)醇沉24h,可得质量分数达95.0%以上的甜菊素。该工艺稳定可行,适合于工业化大生产。

复方茶酮缓释片与茶碱缓释片双盲双模拟随机对照治疗支气管哮喘多中心临床试验

本研究以茶碱缓释片为对照，采用随机双盲双模拟多中心临床试验设计，评价复方茶酮缓释片治疗支气管哮喘的有效性和安全性。随机对照试验的药品按双盲双模拟要求制备，两组病人均服用３片试验药，复方茶碱缓释片每片含茶碱 ２００ｍｇ，酮替芬１ｍｇ；对照药茶碱缓释片每片含茶碱 １００ｍｇ（双百双模拟片一大二小），ｑ１２ｈ，轻度病人１周，中度病人６周。试验组１０３例，对照组１００例，分别有５０例和４１例观察单剂量顿服的即刻平喘疗效。试验组和对照组１周临床有效率分别为 ９０．９％和 ７５．７％，肺功能改善率分别为 ８７．９％和 ７２．４％； ６周临床有效率分别为８２．９％和７４．６％，肺功能改善率分别为９０．８％和８２．１％。即刻平喘试验表明两组均具有缓慢释放的特点。两组药物不良反应发生率分别为７．７％和９．０％。结论为复方茶酮缓释片是一有效而且安全的平喘药物。

NSF干预5/6肾切除大鼠模型肾纤维化的实验研究

目的:研究NSF对5/6肾切除大鼠模型肾纤维化干预作用及机制。方法:取SD大鼠72只,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组、NSF组,通过对大鼠实施5/6肾切除手术建立大鼠慢性肾功衰模型;治疗组自二次术后第31 d起给药,连续30 d。检测大鼠血清生化指标Urea、Crea,残余肾组织病理情况及纤维化相关指标:残余肾组织中纤维连结蛋白(FN)、转化生长因子β1(TGF-β1),血清肿瘤坏死因子α(TNF-α)的变化。结果:NSF组与模型组比较:Urea、Crea明显降低(P<0.05),肾脏病理改变较轻,肾组织FN和TGF-β1的表达明显降低(P<0.05),血清TNF-α表达也明显降低(P<0.05)。结论:NSF可能通过下调TNF-α的表达,降低肾脏中纤维化调节因子TGF-β1含量,从而抑制FN增生,控制或延缓肾纤维化进展,发挥对慢性肾功能衰竭的治疗作用。

高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量

建立高效液相色谱法测定甜菊糖苷中甜菊醇的含量。色谱条件:色谱柱为Phenomenex C18(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相为乙腈-水(50∶50);流速1.0 mL/min;检测波长213 nm;柱温30℃;进样量10μL。线性范围为1.046μg/mL^52.3μg/mL(r=0.9997),加标平均回收率为96.60%,RSD为0.51%(n=6)。本方法准确度高、精密度高、重复性好、简捷易操作,可以作为甜菊糖苷中甜菊醇含量的测定方法。

核磁共振氢谱法定性鉴定甘露聚糖肽

建立了核磁共振氢谱法定性鉴定甘露聚糖肽的方法,选择异头氢区（δ4.89~5.90）作为＂指纹＂鉴定区,以甘露聚糖肽标准品氢谱为参照图谱,将鉴定的样品谱图与其比较,采用相关系数法计算样品谱图与标准谱图的相似度,并对该方法的特异性、重复性及精密度进行验证。经鉴定,9个不同批次的甘露聚糖肽样品的鉴定结果均与标准图谱一致,相似度均大于0.95,该方法具有很好的专属性。核磁共振氢谱法用于甘露聚糖肽的定性鉴定,具有操作简便、重复性好、专属性强等优点。

加味痛泻要方“扶正抑瘤”作用的实验研究

目的 在运用加味痛泻要方治疗溃疡性结肠炎取得良好疗效的基础上 ,进一步探讨加味痛泻要方阻断或抑制机体癌变的可能性。方法 运用动物实验手段 ,建立相应对照组 ,观察该方对实验动物艾氏腹水癌延命率和S180 肉瘤抑制作用 ,以及对荷瘤、免疫低下动物NK细胞活性、肿瘤坏死因子(TNF)等多项指标的影响。结果 加味痛泻要方 ,能提高艾氏腹水癌动物延命率 ,抑制S180 肉瘤生长 ,增强实验动物NK细胞活性及TNF含量等。结论 加味痛泻要方 ,能在一定程度上抑制肿瘤的生长 ,并对机体的免疫能力有增强和调节作用。

红尾鲶肌肉营养成分与品质评价

利用常规肌肉营养测试方法测定分析红尾鲶(Phractocephalus hemiliopterus)的肌肉营养成分。结果显示:红尾鲶肌肉(鲜样)中蛋白质含量为18.75%,脂肪为4.14%,水分为75.57%,灰分为1.48%;肌肉中含有18种氨基酸,含量为85.96%(干样),其中8种为人体必需氨基酸,总含量为35.16%,占氨基酸总量的40.90%;其必需氨基酸的构成比例基本符合食品法典委员会(FAO/WHO)的标准,红尾鲶的限制性氨基酸为色氨酸,4种鲜味氨基酸总质量分数为32.98%(干样)。

高效液相法测定人参健脾片中柚皮苷的含量

目的:采用高效液相色谱法测定人参健脾片中柚皮苷的含量.方法:采用Kromasil C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相:乙腈-1%冰醋酸水溶液(19∶81);流速:1.0mL·min-1,检测波长为:283nm.结果:柚皮苷线性范围为0.196～1.764μg,平均回收率为99.03%,RSD=1.08%(n=6),测得3批样品中柚皮苷的含量分别为0.75,0.72,0.76mg/片.结论:所建方法简便、准确、重复性好,可用于人参健脾片的质量控制.

一种具有抗脂肪肝作用的脂肪酶的实验研究

为了研究特种脂肪酶ZFM对大鼠非酒精单纯性脂肪肝NAFLD的防治作用,本次实验通过给大鼠NAFLD模型灌胃ZFM,然后进行常规观察、体重及肝脏器系数测定、血清中ALT和AST的含量动态测定、肝脏肉眼大体外观变化情况观察、肝组织内TG的含量测定、肝组织病理学分析等。结果表明,ZFM显著降低ALT活性及肝组织TG含量,同时也可减轻肝脂肪变性的程度,说明ZFM具有显著的抗大鼠NAFLD的作用。

新生化颗粒的质量标准研究

目的：提高新生化颗粒的质量标准。方法：采用薄层层析法对方中当归、川芎、益母草、甘草进行了定性鉴别，采用反相高效液相法测定了颗粒中所含阿魏酸的含量。结果：鉴别方法专属性强；含量测定阿魏酸在0．028～0．252μg范围内线性关系良好；回收率为99．1％，RSD为0．4％。结论：本质量标准可有效地控制新生化颗粒的质量。