鸭坦布苏病毒贵州株分离鉴定及其E基因生物信息学分析

从贵州三穗县某鸭场的病鸭病料中分离出1株坦布苏病毒(tembusu virus,TMUV),经鉴定将其命名为TMUV-GZ。为了解该分离株的生物学特性及其E基因的分子特点,测定TMUV-GZ株的半数胚致死量(ELD50),将病毒接种至不同宿主细胞,观察其适应性与增殖能力;对E基因克隆测序并进行序列分析,对其编码的蛋白质进行生物信息学分析。结果表明:TMUV-GZ株能导致鸡胚和鸭胚死亡,该分离株无血凝性,在鸭胚上的ELD50为10^(-2.63)·(0.2 mL)^(-1);该分离株能在Vero细胞、BHK-21细胞和DF-1细胞上增殖,对BHK-21细胞适应性最好。该分离株的E基因与泰国分离株DK/TH/CU-99核苷酸同源性最高,为98.3%;一级结构预测E蛋白的理论等电点为5.01,不稳定系数为39.5,为稳定蛋白质;二级结构预测该蛋白质以α-螺旋、β-折叠、β-转角较多,为亲水性蛋白质,可能存在10个优势抗原表位、2个跨膜区、3个结构域,无信号肽;三级结构预测该蛋白质模型结构与其他黄病毒E蛋白实验结构之间具有良好的一致性。综上,这一研究为TMUV亚单位疫苗和基因工程疫苗的研制提供了理论依据。

β-环糊精对化合物RSA的增溶研究

化合物17 α-羟基孕甾4-烯-3,20-二酮-21-醋酸酯(RSA)和β-环糊精(β-CD)经超声波处理15 min,在28℃,120 r／min振荡处理12 h,形成包结物。β—CD-RSA包结物的紫外吸收特征与化合物RSA一致。在水溶液中,β—CD与化合物RSA的包结物,化学平衡常数K,的 RSD为2．84％,较为稳定,推测在水溶液中β-CD与化合物RSA以1:1(摩尔比)形成包结物。红外光谱分析推测出在水溶液中β—CD与化合物RSA的包结方式。β—CD与化合物RSA摩尔比为1:1形成的β—CD—RSA包结物,在28℃水溶液中的溶解度为9．12 mg／L,比化合物 RSA饱和溶液的溶解度增大了5．26倍。

合成载小分子肽羊胎素碳酸钙/磷酸钙纳米材料的方法研究

碳酸钙/磷酸钙是脊椎动物骨骼和牙齿的主要无机成分,具有良好的生物相容性,在生物医学领域具有良好的应用前景。从羊胎儿中提取的小分子肽羊胎素具有很好的生物学作用,为进一步提高小分子肽羊胎素在皮肤中的渗透性和功效,利用生物矿化法合成载小分子肽羊胎素碳酸钙/磷酸钙纳米材料,利用扫描电镜、傅立叶红外光谱对纳米颗粒进行表征,检测其载小分子肽能力和pH的敏感性。结果表明:利用小分子肽羊胎素溶液实现Ca^(2+)、CO_(3)^(2-)、HPO_(4)^(2-)共沉淀获得小分子肽/碳酸钙/磷酸钙复合纳米颗粒同时高效载小分子肽(1.8%),纳米颗粒具有球形结构,直径小于50 nm,且具有较好的pH响应性和蛋白质持续释放能力。在兔和猫眼上试验表明载小分子肽纳米颗粒对动物眼睛无刺激性,有较好的生物安全性。这一研究为利用天然小分子肽合成钙纳米材料提供了依据,同时为进一步开发新一代小分子肽羊胎素纳米材料应用于化妆品奠定了基础。