rhuPAa-melittin的生物活性检测

目的利用高纯度的rhuPAa-melittin进行人成纤维细胞和卵巢癌细胞进行活性检测,探讨rhuPAa-melittin对卵巢癌治疗作用及对正常细胞毒性作用。方法利用高纯度的rhuPAa-melittin蛋白分别作用于人成纤维细胞和人卵巢癌细胞SKOV3 48 h,在490 nm波长处测定其吸光度,以反映活细胞的数量并间接反映rhuPAa-melittin对培养中细胞的生长抑制作用。结果人卵巢癌细胞SKOV3组,在4μg/mL时对细胞抑制率已经达到了66.59%,在16μg/mL时,细胞已经全部死亡,差异有统计学意义(P<0.05)。而人成纤维细胞组,在4μg/mL时其对细胞的抑制率仅为达到7.3%,8μg/mL时抑制率为12.3%,16μg/mL时抑制率为22.0%。结论 rhuPAa-melittin对人卵巢癌细胞SKOV3细胞有着明显的抑制杀伤作用,而对于人成纤维细胞的抑制作用不明显。

MiR-17-5_(p)/BTG3调节胶质瘤的作用机制

目的研究miR-17-5p/BTG3介导AKT信号通路调节胶质瘤细胞的作用机制。方法利用生物信息学技术预测miR-17-5p靶基因,荧光素酶报告实验、qRT-PCR、Western Blot验证miR-17-5p对候选靶基因BTG3的直接调控作用,MTT法、Transwell侵袭实验检测靶基因BTG3对细胞增殖迁移的影响。结果 miR-17-5p的靶基因为BTG3,胶质瘤细胞中转染载体质粒(pmirGLO)及突变靶基因质粒(pmirGLO/BTG3-mUTR),过表达miR-17-5p以及封闭miR-17-5p,荧光值均没有变化。转染靶基因质粒(pmirGLO/BTG3-UTR),过表达miR-17-5p后,荧光值降低;miR-17-5p被封闭后,荧光值上升。过表达miR-17-5p后,BTG3的mRNA表达水平及蛋白含量降低,miR-17-5p的表达水平升高。miR-17-5p被封闭后,BTG3的mRNA表达水平及蛋白含量升高,miR-17-5p的表达水平降低。BTG3沉默的细胞增殖转移加快,而过表达BTG3的细胞增殖转移减慢。结论靶基因BTG3介导了miR-17-5p对胶质瘤细胞增殖和侵袭的调控作用。