奶牛源葡萄球菌tetK基因碱基及氨基酸序列差异的功能分析

为探究奶牛源葡萄球菌中部分四环素耐药基因tetK不产生耐药性的原因,采用平行试验对四环素抗性菌株(MP00159)与四环素敏感菌株(MP00109)所携带的tetK基因和tetK′基因的碱基及氨基酸序列差异进行分析;随后将两者分别克隆至表达载体pET-32a(+)后导入大肠埃希菌感受态细胞BL21(DE3)内,比较转化前后对四环素的耐药性。结果表明:四环素敏感菌株携带的tetK′基因与抗性菌株的tetK基因存在5个碱基位点差异,对应的氨基酸出现4个差异;转入敏感菌株tetK′基因的BL21仍表现对四环素敏感,转入抗性菌株tetK基因的BL21表现了四环素抗性。由此推测发生突变的碱基位点是决定tetK耐药表型的关键位点。