犬冠状病毒JS1706株M基因的分子特性与真核表达

为了解犬冠状病毒(CCV)江苏分离毒株(JS1706)M基因的分子特性,对其全序列进行了扩增和序列分析。结果表明,该基因ORF全长为792 bp,编码263个氨基酸。与CCV参考毒株(I型和II型)进行核苷酸和氨基酸同源性比较,其同源性分别为86.3%~98.7%,88.2%~99.2%。进化树分析表明,JS1706株与CCVⅡ型国内流行株NJ17、NTU 366共属一个分支。生物信息学分析表明,M蛋白有一个17个氨基酸构成的信号肽区域,3个跨膜区和3个N-糖基化位点。根据基因序列推测M蛋白的分子量为29 823。将扩增得到的M基因全序列片段经纯化后与载体pCDNA3.1连接,构建了pCDNA3.1CCV-M真核表达质粒,在293T细胞上能成功表达。本研究结果不仅有助于了解国内CCV的M基因分子特性,也为CCV分子快速诊断和疫苗研究奠定了基础。