幽门螺旋菌的分子生物学研究现状

幽门螺旋菌的分子生物学研究现状王正祥（扬州大学医学院微生物学教研室，江苏扬州２２５００１）自从Ｗａｒｒｅｎ和Ｍａｒｓｈａｌｌ［１］于１９８２年成功分离出幽门螺旋菌（ＨｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒＰｙｌｏｒｉ）以来，国内外大量的研究结果［２，４］已确定Ｈ．ｐ...

野艾组分对幽门螺杆菌的体外抑菌作用

目的:分析中药野艾可能的抑制幽门螺杆菌(H pylori)组分．方法:采用琼脂稀释法测定野艾的各种提取物的最小抑菌浓度．结果:四种野艾提取物最低抑菌浓度分别为: 正己烷提取物为10．24 g／L、乙酸乙酯提取物为2．56 g／L、正丁醇提取物为5．12 g／L,野艾乙醇提取物的MIC>10．24 g／L．结论:野艾的乙酸乙酯提取物具有较强的抑制H pylori生长的作用．为进一步开发野艾的药用价值提供了资料．

抗HCMV不同多肽McAb的鉴定

目的为了将单克隆抗体 (Mc Ab)用于诊断技术 ,我们首先建立了 13株抗人巨细胞病毒 (HCMV)的 Mc Ab,选取 6株 Mc Ab作进一步鉴定。方法这 6株 Mc Ab的鉴定主要采用间接免疫荧光试验、免疫印迹试验等方法。结果间接免疫荧光试验表明 :Mc Ab8B8相应的多肽为早期抗原 ;而 Mc Ab7B4、7D7、7E7、7E11、8D6的相应病毒多肽为晚期抗原。免疫印迹试验的结果表明 :Mc Ab7B4、7D7、7E7、7E11、8B8、8D6相应的病毒多肽分子量分别为 46、15 0、38、5 1、72、6 5 kd。结论 Mc Ab8B8可不用于 HCMV的快速诊断。

TORCH-IgM捕获法ELISA试剂盒的研制和应用

目的 为了发展TORCH近期感染的IgM酶免疫诊断技术。方法 以抗人IgMMcAb包板 ,加待检血清、TORCH抗原 ,接着加酶标记的抗TORCH McAb ,最后加 3,3’ ,5 ,5’ 四甲基联苯胺 (TMB)显色。用这种自制的捕获法ELISA(C ELISA)试剂盒和HOPE公司的间接法ELISA(I ELISA)试剂盒平行检测 1196份孕妇血清TORCH IgM。结果 C ELISA试剂盒检出阳性血清 6 7份 ,并经其他试验证实为阳性。其中 4份用I ELISA试剂盒检测为阴性。由乳胶凝集试验诊断为类风湿因子(RF)阳性的 2份血清 ,经I ELISA试剂盒检测为阳性 ,但经C ELISA试剂盒检测为阴性。结论 在检测孕妇TORCH IgM方面 ,C ELISA比I ELISA有更强的敏感性和更高的特异性。C

急性白血病患者血浆肿瘤坏死因子及抑制物

利用ＴＮＦ细胞毒生物学活性检测法和ＴＮＦ抑制物（ＴＮＦＩＮＨ）生物活性检测法，检测２２例初治急性白血病患者体内ＴＮＦ和ＴＮＦＩＮＨ水平。急性白血病患者血浆ＴＮＦ水平明显增高。达１１．４２±６．０２ｕ／ｍｌ。抗人ＴＮＦ－α单抗能完全中和Ｍ＿４、Ｍ＿５、Ｍ＿６型急性非淋巴细胞白血病患者血浆ＴＮＦ活性。部分患者血浆中同时存在ＴＮＰ和ＴＮＦＩＮＨ。ＴＮＦ阴性的患者血浆中亦单独存在ＴＮＦＩＮＨ活性，和正常人相比明显增高。其对ｒｈＴＮＦα活性的抑制作用具有剂量依赖关系。测定急性白血病患者体内ＴＮＦ及ＴＮＦＩＮＨ可能为急性白血病的分型和治疗提供新线索。

中药复方体外抗幽门螺杆菌MIC的检测

应用ＴＴＣ微量稀释法对三种自制中药制剂体外抗幽门螺杆菌最小抑菌浓度（ＭＩＣ）进行了检测。结果表明，三种中药制剂对幽门螺杆菌均有不同程度的抑菌作用，其ＭＩＣ在０．８７ｍｇ／ｍｌ～４．２４ｍｇ／ｍｌ（生药）之间。

幽门螺杆菌形成空泡细胞毒素的提纯与特征分析

运用水油提、盐析及凝胶过滤色谱法对幽门螺杆菌ＹＣ－１１株所分泌的形成空泡细胞毒素进行了提取。纯化的形成空泡细胞毒素在ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳中表现为单一条带，分子量约为８７０００，在ＰＨ２．４～６．４的环境中表现高细胞毒性。

HSV－I感染人单核细胞诱生肿瘤坏死因子α

以纯化ＨＳＶ－Ｉ感染人外周血单个核细胞，发现ＨＳＶ－Ｉ可感染粘附活化的单核细胞和经ＰＨＡ活化的淋巴细胞，并诱导细胞毒因子分泌。ＬＰＳ诱导ＴＮＦ抑制剂多粘菌素Ｂ不能阻断ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞分泌细胞毒因子，但紫外线灭活的ＨＳＶ－Ｉ不能诱导单核细胞分泌细胞毒因子。用重组人ＴＮＦａ中和抗体能完全中和ＨＳＶ－Ｉ感染单核细胞培养上清中的细胞毒活性，表明其中含有的细胞毒因子为ＴＮＦａ。而重组人ＴＮＦａ中和抗体对ＨＳＶ－Ｉ感染的ＰＨＡ活化淋巴细胞上清中的细胞毒活性无明显影响，其细胞毒因子可能大多为淋巴毒素（ＴＮＦβ）。

幽门螺旋菌吸附人上皮细胞性能研究(英文)

目的研究幽门螺旋菌（Ｈｐ）对人上皮细胞的吸附性能及其影响因素．方法以ＨＥｐ２细胞和ＨｐＹＣ１１Ａ建立Ｈｐ吸附人上皮细胞的体外吸附模型，以１１株Ｈｐ临床分离株研究不同菌株的吸附性能，以及８株抗Ｈｐ优势抗原单克隆抗体和不同ｐＨ环境对Ｈｐ吸附性能的影响特征．结果ＨｐＹＣ１１Ａ株具有特异吸附于ＨＥｐ２细胞表面的性能，其吸附能力在于ＨＥｐ２细胞共孵育３ｈ后达到高峰，吸附达８１％，在大气环境中与在含５％氧气的微氧环境中Ｈｐ对ＨＥｐ２细胞的吸附无显著差异（Ｐ＞００１）．抗Ｈｐ优势抗原单克隆抗体不能有效阻断Ｈｐ对ＨＥｐ２细胞的吸附．ｐＨ显著影响Ｈｐ对ＨＥｐ２细胞的吸附，在ｐＨ３．０４．６之间吸附率最高．结论Ｈｐ特异吸附ＨＥｐ２细胞，ｐＨ对此有显著影响；血清中抗Ｈｐ优势抗原的抗体对Ｈｐ感染可能不具备保护作用．

严重腹腔感染患者体内肿瘤坏死因子及其抑制物

采用肿瘤坏死因子抑制物（Ｔｕｍｏｒ Ｎｅｃｒｏｓｉｓ Ｆａｃｔｏｒ Ｉｎｈｉｂｉｔｏｒ，ＴＮＦＩＮＨ）相对生物活 性测定法，同时检测３０例腹腔感染病人热处理前后的血清，结果显示６８．９％患者体内同时存在 ＴＮＦ（１９． ７＋１４．２Ｕ／ｍｌ）和 ＴＮＦＩＮＨ（３１．０－２７． ２％）活性。对 ４例患者手术前后ＴＮＦＩＮＨ相对活 性进行跟踪观察，发现ＴＮＦＩＮＨ水平和严重腹腔感染性疾病的发展及转归密切相关。

淋病奈瑟菌孔蛋白疫苗研究进展

淋病奈瑟菌孔蛋白具有较强的免疫原性和相对缓慢的抗原变异性。近年来,淋病奈瑟菌孔蛋白结构、抗原性及其影响因素等方面的研究进展推动了该菌疫苗的研究。

幽门螺杆菌对人上皮细胞的吸附

幽门螺杆菌对人胃粘膜的吸附是实现其感染的第一步。本研究以人上皮细胞株ＨＥｐ—２为材料对幽门螺杆菌吸附上皮细胞的性能进行了探讨，结果显示，幽门螺杆菌ＹＣ—１１Ａ株具有特异吸附于ＨＥｐ—２细胞表面的性能，其吸附能力在与ＨＥｐ—２细胞共孵育３ｈ后达到高峰，吸附率达８１％，此后吸附率虽无显著提高，但单个ＨＥｐ—２细胞吸附的幽门螺杆菌数量却随孵育时间的延长而有明显增加。在大气环境中与在含５％氧气的微氧环境中幽门螺杆菌对ＨＥｐ—２的吸附无显著差异。抗幽门螺杆菌优势抗原单克隆抗体不能有效阻断幽门螺杆菌对ＨＥｐ—２的吸附。

抗幽门螺旋菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定

抗幽门螺旋菌单克隆抗体杂交瘤细胞系的建立与鉴定王正祥，申厚凤，陈红菊，童鲲（扬州大学医学院微生物学教研室，扬州２２５００１）幽门螺旋菌（Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒｎｙｌｏｒｉ）感染与慢性胃炎及消化性溃疡密切相关，并基本肯定是急性胃炎和慢性Ｂ型胃炎的致病...

溶菌酶──幽门螺旋菌生长的重要因子

对１２株幽门螺旋菌分离株生长特性研究发现，１２株幽门螺旋菌分离株的生长繁殖呈溶菌酶依赖性，这一依赖性在幽门螺旋菌最初几代传代时极为明显。同时发现，外源溶菌酶有利于幽门螺旋菌维持其独特的菌体形态。因此，溶菌酶是幽门螺旋菌生长的重要因子。

黑菇多糖对人白血病细胞系U_937的增殖及分化的实验研究

用黑菇多糖体外处理人单核细胞性白血病细胞分化模型Ｕ９３７细胞，结果表明黑菇多糖明显抑制Ｕ９３７细胞体外增殖（ＩＣ５０２８０μｇ／ｍｌ）并诱导细胞向终末方向分化。经黑菇多糖诱导后的Ｕ９３７细胞，细胞形态发生显著变化，细胞膜标志和生化特征趋向成熟。

CRISPR系统中Cas蛋白的分类及作用机制

CRISPR(clustered regularly interspaced short palindromic repeats)系统存在于40%细菌与90%古细菌中,由前导序列、回文重复序列、相关Cas蛋白三部分构成。Cas蛋白是CRISPR系统中的一类核酸酶,对CRISPR系统发挥获得性免疫功能具有重要作用。已鉴定出至少45个Cas蛋白家族,其多样性对现有分类系统提出了巨大挑战。不同类型的Cas蛋白在CRISPR系统适应、表达、干扰等作用阶段发挥的功能各异。本文主要讨论Cas蛋白的分类及作用机制的研究进展。

鲍曼不动杆菌Ⅱ型分泌系统的研究进展

鲍曼不动杆菌(Acinetobacter baumannii)是一种医院常见的革兰阴性致病菌,可引起宿主的一系列疾病,严重时可导致全身感染,危及生命。Ⅱ型分泌系统(typeⅡsecretion system, T2SS)广泛存在于革兰阴性菌中,是其重要的毒力因子,通过释放毒素和水解酶获取营养,提高细菌在宿主细胞内生存和增殖的能力。研究证实,鲍曼不动杆菌也含有T2SS,且T2SS在鲍曼不动杆菌感染致病过程中发挥着重要的作用。近些年来,与鲍曼不动杆菌相关的T2SS研究一直是医学微生物领域关注的焦点之一。现对鲍曼不动杆菌T2SS的组成、结构和致病性方面作一概述,并对T2SS抑制剂的潜在靶点进行展望。