用乘法法则易化生理学难点内容的教学

在生理学难点内容的教学中引入数学乘法法则,用乘法法则阐明细胞膜电位变化的规律,判定眼震颤运动方向、肾小管对水及Na+的通透性和主动脉瓣及房室瓣的开闭时期,推导交感神经和副交感神经、凝血与纤溶等对立系统拮抗剂和激动剂的生理作用等,可以使学生透过现象抓本质,加强对难点内容的理解,收事半功倍之效.

以雨课堂为载体 促进生理学教学

雨课堂是一种基于PowerPoint软件和微信手段，在教学过程中营造良好互动、连接师生、促进教学相长的混合式教学工具。生理学是研究机体生命活动现象及其功能活动规律的科学，需要教师不断改进教学方法，提高教学效果，促进学生的理解、学习和应用。在生理学的教学中合理使用雨课堂，有利于教师与学生的教学互动，提升了学生的学习热情，便于授课教师适时调整内容和进度，及时督促学生，有利于教学效率的提高。

针刺切断脊神经前后根大鼠“内关”对急性心肌缺血心电图的影响

目的旨在观察“内关”—心脏短反射联系。方法用静注垂体后叶素造成大鼠实验性急性心肌缺血。以针刺“内关”缓解心肌缺血性心电图为指标，分别观察切断及保留两组大鼠的Ｃ６～Ｔ２脊神经前后根的影响。结果两组大鼠心电图改变和恢复的时间无显著差异（Ｐ＞０．０５）。结论切断Ｃ６～Ｔ２脊神经前后根之后，“内关”与心脏之间仍存在着不依赖于中枢神经系统的短反射通路，该通路可能是经穴—脏腑相关的结构基础之一。

Rh抗原Fab抗体库的构建与筛选

目的:构建抗体库并筛选Rh抗原的Fab抗体。方法:收集5份血清中抗Rh抗体效价在1∶256～512的人淋巴细胞,提取RNA,用多对引物PCR扩增VH、Vκ、Vλ基因,并分别从pComb3xTT和pComb3xλ噬粒中扩增CH1、Cκ、Cλ,通过重叠PCR,构建重链Fd基因及完整的kappa、Lamda轻链,并进一步重叠PCR,获得Fab抗体片段。Fab经酶切、连接并电转化到噬菌体抗体表达载体pComb3xSS中,构建获得抗Rh的Fab抗体库,经4轮Rh(-)/Rh(+)红细胞阴/阳淘筛,获得的阳性克隆分别进行血凝试验、Western blot分析及测序鉴定。结果:构建获得总库容为7.4×106的Fab抗体库,并从中筛选得到1株能特异结合Rh抗原的Fab抗体。结论:应用基因工程抗体技术,成功获得了1株能与Rh(+)红细胞特异凝集的Fab抗体,为制备能用于临床的特异性强、效价高,并具有自主知识产权的Rh抗体打下基础。

克罗卡林对不同年龄大鼠血管平滑肌张力作用的影响

目的研究钾通道开放剂克罗卡林（ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ）对不同年龄大鼠血管平滑肌张力作用的影响。方法大鼠离体血管平滑肌张力记录法。结果ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ可抑制由苯肾上腺素（Ｐｈｅ）介导弓；起的血管收缩，其作用在老年大鼠明显减弱；血管内皮的去除或分别应用ＮＯ合酶抑制剂Ｌ．ＮＡＭＥ、环氧酶抑制剂亚甲蓝，均可明显降低ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ的舒血管反应，但内皮去除或ＮＯ作用被抑制却消除了ｃｒｏ－ｍａｋａｌｉｍ作用与年龄变化的关系。此外研究还表明：内源性和外源性ＮＯ供体Ａｃｈ及ＳＮＰ的舒血管反应在老年大鼠明显弱于幼年大鼠。结论ＮＯ释放量的减少或血管对ＮＯ反应性的降低可能是引起ｃｒｏｍａｋａｌｉｍ舒血管作用在老年大鼠明显减弱的重要原因。

雨课堂作为形成性评价方法的应用实践

形成性评价注重对学习过程的评价,通过及时反馈能够起到促进学习的目的。积极开发和利用科学的形成性评价方法可极大提高医学教育效果。扬州大学医学院尝试利用雨课堂软件,对学生进行形成性评价,并覆盖教学活动全过程,收到了初步成效。问卷调查结果表明,雨课堂这种教学方式作为形成性评价方法,能够激发学生的学习兴趣,可以使教师动态掌握学生的学习情况,并帮助教师和学生及时调整教学和学习进程,是一种简便、高效的形成性评价方法,可为信息化时代高校培养医学人才和改革教学方法提供借鉴。

乙肝Ⅰ号方对实验性肝损伤小鼠血栓素、前列环素代谢的作用

检测实验性肝损伤小鼠肝组织丙二醛（ＭＤＡ）、超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）含量及血浆血栓素Ａ２（ＴＸＡ２）和前列环素（ＰＧＩ２）代谢产物的浓度，以探讨氧自由基（ＯＦＲ）及ＴＸＡ２－ＰＧＩ２在小鼠实验性肝损伤中的作用。结果表明，与对照组比较，肝损伤小鼠肝组织ＭＤＡ明显升高，且与血浆ＴＸＢ２变化呈正相关（ｒ＝０．９０８３，Ｐ＜０．０１）。ＳＯＤ明显降低；血浆ＴＸＡ２明显升高，ＰＧＩ２明显下降。以上结果提示ＯＦＲ与ＴＸＡ２／ＰＧＩ２平衡失调相互作用，共同引起实验性肝损伤。而乙肝Ⅰ号方可逆转ＭＤＡ、ＳＯＤ。

养心Ⅰ号抗心理应激作用的实验研究

观察了镇静安神类中药对心理应激大鼠心血管和内分泌活动的影响。研究发现，此类中药可拮抗大鼠在应激状态下的血压升高，降低心肌缺血基础上的心律失常发生率，缩短心律失常的持续时间，并使血清中的皮质醇和催乳素水平趋于正常。说明镇静安神类中药具有抗心理应激的作用，且与下丘脑—垂体—肾上腺皮质轴的调节作用有关。

抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B单克隆抗体的制备及其特性鉴定

目的： 制备抗血型M、N及抗血型糖蛋白A/B（GPA/GPB）的单克隆抗体（mAb）, 并进行特性鉴定.方法： 用人“O”型血红细胞作为免疫源, 免疫BALB/c小鼠.采用淋巴细胞杂交瘤技术制备mAb, 用谱红细胞筛选阳性克隆; 采用直接、间接血凝试验检测杂交瘤细胞培养上清及腹水中mAb的效价.分别用快速定性试纸和酶处理红细胞检测mAb的Ig亚类及抗原表位.用Western blot鉴定抗GPA/GPB mAb的特异性.结果： 获得4株分泌抗M、1株抗N及3株抗GPA/GPB mAb的杂交瘤细胞株.杂交瘤细胞培养上清mAb的效价介于1×2^-4 ～1×2^-8之间, 腹水mAb的效价在1×2^-7 ～1×2^-12之间.除1株mAb 1C1C9C4为IgM外, 其他7株mAb均为IgG.通过杂交瘤细胞培养上清与谱红细胞的反应格局, 结合mAb抗原表位的检测, 确定4株和1株mAb可分别特异性结合于GPA的M、N抗原表位; 另3株mAb 6D7C9、7C9H4和7C9G11 与“O”型血红细胞膜的Western blot结果显示, 均可结合GPA、GPB蛋白.结论： 成功地建立了4株分泌抗M、1株分泌抗N及3株分泌抗GPA/GPB mAb的杂交瘤细胞株, 可用于MNSs血型系统的研究及鉴定, 并为制备双功能抗体用于病毒、肿瘤疾病的诊断和治疗打下了坚实的基础.

人红细胞血型糖蛋白GYPC的克隆与表达

目的克隆人红细胞血型糖蛋白C(GYPC)基因,构建GYPC重组逆转录病毒载体,以获得稳定表达GYPC的L929细胞。方法RT-PCR扩增人GYPC基因,克隆入T载体后,将GYPC双酶切亚克隆入逆转录病毒载体pEGZ,用此重组载体转染L929细胞,Zeocin筛选得到阳性克隆;用RT-PCR及流式细胞术等方法对重组载体进行鉴定。结果克隆了人GYPC基因,并获得稳定表达GYPC的L929细胞系。结论应用基因工程技术,成功构建了含人GYPC基因重组逆转录病毒载体和稳定表达人GYPC的细胞株,建立了红细胞血型抗原的异源表达系统,为血清中抗GYPC特异性抗体的检测及GYPC单克隆抗体的制备和研究奠定了基础。

一种鉴定MNSs红细胞血型单克隆抗体类型的方法的建立

为鉴定MNSs血型单克隆细胞株6D7C9分泌的抗体类型,通过克隆、亚克隆、细胞转染等分子生物学技术建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,并将其作为抗原,通过ELISA、Western印迹法确定6D7C9分泌的McAb.结果显示,RT-PCR技术成功克隆获得了GPA、GPB血型糖蛋白编码基因,通过分别构建其重组逆转录病毒表达载体pEGZ/GPA及pEGZ/GPB,转染包装细胞293T,再感染L929细胞,经zeocin筛选2周后,RT-PCR及流式细胞仪分析证实,L929/GPA和L929/GPB转基因细胞中分别有GPA、GPB目的基因的转录和蛋白表达.用稳定高表达GPA、GPB的转基因细胞通过ELISA和Western印迹法证实单克隆细胞株6D7C9分泌的是抗GPA/GPBMcAb.本研究成功地建立了血型糖蛋白GPA、GPB的异源表达系统,为MNSs血型McAb的检测及GPA、GPB蛋白的功能学研究奠定了基础.

幼年大鼠大脑皮质5—HT_(1B)受体中介的突触前抑制

5－HT灌流幼年大鼠脑片，66．7％额叶后部ⅣV层神经元由刺激丘脑后腹核引起的EPSPS或EPSCs出现抑制，膜电位和膜电阻无明显改变．此抑制作用为5－HT1B受体激动剂TFMPP和CGS—12066B模拟，被5—HT1A／1B受体拮抗剂pindolol阻抑，但不受其它5－HT亚型受体拮抗剂的影响，5－HT不降低低钙高镁液中外源性谷氨酸引致的去极化反应．上述结果提示，5－HT经突触前膜1B受体抑制神经元间的突触传递。

液体复苏加1-6-FDP对严重烧伤家兔心肌功能变化的研究

采用家兔25％Ⅲ度烫伤模型,分别于伤前、伤后即刻、伤后1、3、5、7 h 测定左心室内压峰值、左心室内压最大变化速率及血浆容量(不测伤后即刻值),并观察了液体复苏加1-6-FDP 对严重烧伤休克期家兔 LVSP、LV±dp/dt max 的影响,结果表明严重烧伤后心肌的收缩性和舒张性均立即受到抑制,并呈进行性减退,单纯的液体复苏并不能明显改善心肌的收缩性和舒张性;单用1-6-FDP 治疗可在伤后一定时间内对心功能有支持作用;而在液体复苏同时给予1-6-FDP 可使心肌的收缩性和舒张性得到明显改善,其与烧伤未治疗组和液体复苏组比较差异有非常显著性意义,提示在液体复苏的同时.应用1-6-FDP,可改善心肌功能,有利于休克的复苏。