帕金森病大鼠模型的行为学及神经元形态学评价(英文)

背景:由于黑质致密部体积狭小,应用6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine,6-OHDA)损毁黑质多巴胺神经元(Nigraldopaminergicneuron,NDN)制作帕金森病大鼠模型的成功率较低,一般仅为30%～40%左右。目的:探讨帕金森病大鼠模型建立后的行为学及神经元形态学改变。设计:完全随机的实验研究。地点和材料:安徽省药物研究所,SD大鼠,6-OHDA,阿朴吗啡,兔抗TH血清,SR-6N大鼠脑立体定向仪等。干预:将6-OHDA立体定向注射于90只SD大鼠的左侧黑质区及黑质纹状体通路,观察大鼠行为及多巴胺神经元形态学变化。主要观察指标:旋转行为,震颤及其他异常行为,免疫组织化学观察,电镜观察。结果:经阿朴吗啡诱导共筛选出64只成功大鼠模型(占71%);免疫组化观察发现注射侧黑质区NDN较对侧明显减少,电镜观察发现其普遍存在凋亡及坏死样改变。结论:本方法是建立帕金森病大鼠模型的有效方法,在行为学和神经元形态学等方面同帕金森病人有许多相似之处。

还原型谷胱甘肽对黑质多巴胺能细胞保护作用的实验研究

目的 观察还原型谷胱甘肽 (GSH)对帕金森病 (PD)大鼠模型的保护性治疗作用 ,并探讨其作用机制。方法 应用 6 羟基多巴制作PD大鼠模型 ,随机分为 4组 :模型组 ,GSH组 ,左旋多巴 (L dopa)组 ,GSH并L dopa组 ,并设正常组 ,给药结束后行电镜观察 ,并测定各组其余大鼠黑质区谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、丙二醛 (MDA)、活性氧 (ROS)及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平 ,测定尾状核头部多巴胺 (DA)、高香草酸 (HVA)及单胺氧化酶 B(MAO B)水平。结果 ①GSH组旋转行为无明显变化 ,但GSH并L dopa组可使大鼠旋转行为明显改善 ;②GSH能减轻黑质区氧化应激损伤 ;③GSH能增强黑质呼吸链酶复合体Ⅰ活性 ;④GSH组对MAO B活性及DA、HVA含量和DA/HVA比值均无明显影响 ;⑤电镜下发现模型组存在大量中、晚期凋亡细胞 ,而GSH组以早、中期凋亡为主。结论 ①GSH能减轻PD模型大鼠黑质区氧化应激损伤 ,并对线粒体呼吸链具有一定保护作用 ;②GSH与L dopa合用 ,既可有效改善症状 ,又对残存DA能神经元具有保护性治疗作用。

还原型谷胱甘肽保护性治疗帕金森病的机制研究

目的观察还原型谷胱甘肽(GSH)对帕金森病(PD)大鼠模型的异常行为、黑质抗氧化系统、线粒体呼吸链功能及细胞形态学的影响。方法应用6-羟基多巴胺立体定向注射制作PD大鼠模型。将24只大鼠随机分为3组(每组8只):模型组、GSH组、假手术组,分别给予相应处理,共45d,给药前后均进行行为学测试,给药后测定各组大鼠黑质区谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)及线粒体呼吸链酶复合体水平,并行免疫组化检测。结果(1)GSH对大鼠旋转行为无明显影响(P>0.05)。(2)GSH能减轻黑质区氧化应激损伤。(3)GSH能增强黑质呼吸链酶复合体I活性。(4)免疫组化发现GSH组TH-IR神经元数量较模型组明显增多。结论GSH能减轻PD模型大鼠黑质区氧化应激损伤,并对线粒体呼吸链及细胞形态具有一定保护作用。

左旋多巴对帕金森病大鼠毒性作用的实验研究

目的 研究左旋多巴 (L dopa)对帕金森病 (PD)模型大鼠异常行为、黑质抗氧化系统、线粒体呼吸链功能和神经递质代谢的影响及其机制。方法 应用 6 羟基多巴胺 (6 OHDA)立体定向注射制作PD大鼠模型 ,给PD大鼠L dopa 2 5mg/ (kg·d)灌胃 ,共 4 5d。给药前后分别进行行为学测试 ,给药后测定黑质区谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、丙二醛 (MDA)、活性氧 (ROS)及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平 ,测定尾状核头部多巴胺 (DA)、高香草酸 (HVA)、单胺氧化酶 B(MAO B)的水平。结果 (1)L dopa组大鼠旋转速度给药前为(13.1± 1.5 )r/min ,给药后为 (7.2± 1.6 )r/min,给药前后比较差异有显著性 (P <0 .0 1) ;(2 )L dopa组GSH Px活性、呼吸链酶复合体Ⅰ水平降低 ,MDA含量、ROS活性升高 ,与对照组比较差异均有显著性 (均P <0 .0 1) ;(3)L dopa组MAO B活性、DA、HVA含量及DA/HVA比值与对照组比较均显著升高 (P <0 .0 5～ 0 .0 1)。结论L dopa能有效改善PD大鼠的旋转行为 ,但可加重黑质区氧化应激损伤 ,抑制线粒体呼吸链酶活性。

还原型谷胱甘肽对帕金森病大鼠氧化应激水平的影响

目的观察还原型谷胱甘肽 (GSH )对帕金森病 (PD)大鼠模型黑质抗氧化水平和线粒体呼吸链功能的影响。方法应用 6 羟基多巴胺 ( 6 OHDA)立体定向注射制作PD大鼠模型。将 2 4只大鼠随机分为 3组 (每组 8只 ) :模型组 ,治疗组 ,假手术组 ,分别给予相应处理 45d ,给药后测定各组大鼠黑质区谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、丙二醛 (MDA)、活性氧 (ROS)及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平。结果 ( 1)GSH能使模型大鼠黑质区GSH Px活性增强 ,MDA和活性氧水平降低 ( 11.3 0± 0 .49,1.2 6± 0 .15 ,42 .2 5± 2 .88)。 ( 2 )GSH能增强黑质呼吸链酶复合体I活性 ( 2 90 5 .2 8± 5 2 .15 )。结论GSH能减轻PD模型大鼠黑质区氧化应激损伤 ,并对线粒体呼吸链具有一定保护作用。

应用6-羟基多巴胺建立帕金森病大鼠模型的稳定性评价(英文)

背景:应用6-羟基多巴胺(6-Hydroxydopamine,6-OHDA)损毁黑质多巴胺神经元(nigraldopaminergicneuron,NDN)制作的大鼠模型,在目前帕金森病的研究中应用最广,但由于黑质致密部体积狭小,技术难度大,故模型制备成功率一般仅为30%～40%左右。目的:探讨提高6-羟基多巴胺帕金森病大鼠模型成功率的方法,并对模型进行评价。设计:完全随机的实验研究。地点和材料:实验在安徽中医学院第一附属医院中心实验室完成,实验材料包括SD大鼠,6-OHDA,阿朴吗啡,兔抗TH血清,ABC试剂盒,SR-6N大鼠脑立体定向仪,JEM-100CX电镜。干预:取SD大鼠90只,将6-OHDA立体定向微量注射于左侧黑质区及黑质纹状体通路,观察大鼠行为及黑质细胞形态学变化。主要观察指标:旋转行为,免疫组织化学观察多巴胺能神经元数量,电镜观察多巴胺能神经元形态改变。结果:90只大鼠中经阿朴吗啡诱导后有64只(占71%)恒定转向右侧且结果稳定,旋转圈数30min>210r,被视为成功大鼠模型;免疫组化观察发现注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧明显减少,电镜观察发现其普遍存在凋亡及坏死样改变。结论:应用本方法可较快建立稳定的成功率较高的大鼠模型,但在病理和行为学等方面同自然患者仍有较多差异。

还原型谷胱甘肽合抗震止痉胶囊对帕金森病细胞保护作用的实验研究

目的 :观察还原型谷胱甘肽 (GSH)合抗震止痉胶囊对帕金森病 (PD )大鼠模型的异常行为、黑质抗氧化系统、线粒体呼吸链功能的影响 ,并探讨其作用机制。方法 :应用 6-羟基多巴胺立体定向注射制作PD大鼠模型。将 2 4只大鼠随机分为 3组 :模型组、GSH合抗震止痉胶囊组、假手术组 ,每组 8只 ,分别给予相应处理 ,共45d ,给药前后均进行行为学测试 ,并测定各组大鼠黑质区GSH -Px、MDA、活性氧及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平。结果 :①GSH合抗震止痉胶囊可明显改善大鼠旋转行为(P <0 .0 5 ) ;②GSH合抗震止痉胶囊能减轻黑质区氧化应激损伤 ;③GSH合抗震止痉胶囊能增强黑质呼吸链酶复合体Ⅰ活性。结论 :GSH合抗震止痉胶囊能部分改善大鼠旋转行为 ,减轻PD模型大鼠黑质区氧化应激损伤 ,并对线粒体呼吸链具有一定保护作用。

还原型谷胱甘肽对帕金森病合并痴呆大鼠的保护性治疗作用

目的:观察还原型谷胱甘肽(glutathione,GSH)对帕金森病合并痴呆大鼠模型的黑质抗氧化系统、线粒体呼吸链功能及学习与记忆能力的影响。方法:实验于2000-03在安徽省药物研究所实验室完成。应用6-羟基多巴立体定向注射和结扎双侧颈总动脉的方法制作帕金森病合并痴呆大鼠模型。将其中16只大鼠模型随机分为两组(每组8只):模型组,治疗组,另设假手术组8只,治疗组连续45d腹腔注射还原型GSH后进行Morros水迷宫实验,实验后再测定各组大鼠黑质区谷胱苷肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛、活性氧及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平。结果:①GSH对Morros水迷宫隐匿平台实验和探索实验的逃避潜伏期均有一定的改善作用,但无明显统计学意义(P>0.05)。②GSH能增强GSH-Px活性犤由(124.8±7.0)μkat/g升至188.4±8.2)μkat/g犦,(降低活性氧水平犤由(62.95±6.32)u/mg降至(42.25±2.88)u/mg犦,减少丙二醛含量犤由(2.26±0.18)μmol/g降至(1.26±0.15)μmol/g犦,从而减轻黑质区氧化应激损伤。③GSH能增强黑质呼吸链酶复合体I活性犤由(2516.67±42.97)mmol/(L·min·g)升高至2905.28(±52.15)mmol/(L·min·g)犦。结论:GSH短期应用对帕金森病合并痴呆大鼠模型的学习和记忆能力无明显影响,但能减轻模型大鼠黑质区氧化应激损伤,并对线粒?

BAEP转颈试验在后循环缺血诊断中的应用

目的:探讨脑干听觉诱发电位(BAEP)转颈试验对后循环缺血的诊断意义。方法:对60例后循环缺血眩晕间歇期患者分别作 BAEP常规检测和转颈试验,并与40例正常人对照。结果:后循环缺血组BAEP常规检测阳性率26．7％,转颈试验阳性率91．7％,与对照组比较均有极显著差异。结论:转颈试验可提高BAEP的阳性率,对后循环缺血诊断有重要参考意义。

重症脑血管病患者连续脑电图构型研究

目的 应用连续脑电图监测重症脑血管病患者,观察其表现模式及其与预后的关系.方法 收集神经内科重症监护病房的住院患者42例,其中男性27例,女性15例,年龄47～87岁,平均年龄69.21岁;脑梗死16例,脑出血26例,均为有意识障碍且昏迷者,格拉斯哥昏迷评分＜8分.给予连续脑电图检查,按昏迷的脑电图模式分析脑电图构型.结果 42例重症脑血管病患者的连续脑电图全部异常.表现为弥散性慢活动13例,共3例死亡;间歇性δ节律3例,无死亡病例;癫痫样活动9例,4例死亡;三相波2例,1例死亡;爆发-抑制模式1例,死亡;单节律活动3例,均死亡;6例表现为低波幅活动,全部死亡;局灶性异常5例,无死亡.结论 重症脑血管病患者的连续脑电图表现主要有:弥散性慢活动、间歇性δ节律、癫痫样活动、三相波、爆发-抑制、单节律活动(α昏迷、θ昏迷)低波幅活动及局灶性异常.弥散性慢活动、间歇性δ节律及局灶性异常预后较好,低波幅活动、单节律活动、癫痫样活动预后较差.

提高帕金森病动物模型制作成功率的方法学探讨及模型综合评价

目的探讨提高6-OHDA帕金森病(PD)大鼠模型制作成功率的方法,并对模型进行综合评价。方法取SD大鼠90只,将6-OHDA立体定向注射于左侧黑质区及中脑腹侧被盖,观察大鼠的行为、黑质抗氧化指标、线粒体呼吸链及黑质细胞形态学的变化。结果①经阿朴吗啡诱导后共筛选出成功模型64只,成功率为71%;②模型大鼠黑质区ROS、MDA水平均明显升高,而GSH-Px活性则明显降低;③模型大鼠黑质区存在线粒体呼吸链功能障碍;④免疫组化发现注射侧黑质区多巴胺能神经元较对侧明显减少(P<0.001);⑤电镜观察发现模型大鼠黑质细胞同时存在凋亡、变性和坏死样改变。结论应用本方法可较快建立稳定的成功率较高的PD大鼠模型,该方法是通过增强氧化应激、干扰线粒体呼吸链功能、诱导凋亡甚至引发坏死等不同机制损毁多巴胺能神经元的,同PD的发病机制基本一致。

巴曲酶治疗急性脑梗死的临床分析

目的：探讨巴曲酶治疗急性脑梗死的临床疗效。方法：将64例急性脑梗死患者随机分为两组，分别给予东菱克栓酶为主治疗 和川芎嗪+胞二磷胆碱为主治疗，观察临床疗效、纤维蛋白原及凝血酶原时间的变化，所获数据采用 x^2检验和 t 检验。结果：观察组 有效率93． 4%，对照组有效率80． 2%，两组基本痊愈和显效比较有显著差异(P＜0． 05) ，观察组血浆纤维蛋白原明显降低(P＜0． 05) 。 结论：巴曲酶治疗急性脑梗死效果肯定，能明显促进神经功能缺损的恢复，减少了并发症和后遗症，疗效优于对照组。

左旋多巴对帕金森病动物模型抗氧化能力的影响

目的观察左旋多巴对帕金森病 (PD )模型大鼠的黑质抗氧化系统和线粒体呼吸链功能的影响 ,并探讨其作用机理。方法应用 6 OHDA制作PD大鼠模型。将 16只成功PD模型大鼠分为两组 (每组 8只 ) :模型组和左旋多巴 (L dopa)组 ,另设正常对照组 ( 8只 ) ,各组分别给予相应处理 ,共 45d ,给药前后分别进行行为学测试 ,给药后测定黑质区谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、丙二醛 (MDA)、活性氧 (ROS)及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平。结果 ( 1)L dopa可使大鼠旋转行为明显改善 (P <0 .0 0 1)。 ( 2 )L dopa可降低GSH Px活性 ( 6.83± 0 .3 3 ) ,升高ROS、MDA水平 ( 68.44± 2 .3 4,2 .49± 0 .2 5 ) (与模型组比较P均 <0 .0 5 )。 ( 3 )L dopa组呼吸链酶复合体I明显低于模型组 ( P <0 .0 5 )。结论L dopa能有效改善旋转行为 ,但可加重黑质区氧化应激损伤 ,抑制线粒体呼吸链酶活性 ,提示长期应用L dopa制剂有可能加重DA能神经元的进行性缺失。

还原型谷胱甘肽对左旋多巴毒性拮抗作用的实验研究

目的 :观察还原型谷胱甘肽 (GSH)对左旋多巴 (L dopa)毒性的拮抗作用。方法 :将实验动物分为 4组 (每组 8只 ) :治疗组 ,阴性对照组 ,阳性对照组 ,正常鼠组。比较给药前后的行为学变化 ,给药后测定各组大鼠黑质区GSH Px、MDA、ROS及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平。结果 :L dopa能加重黑质区氧化应激损伤 ,降低呼吸链酶复合体Ⅰ活性 ,GSH与其合用可部分拮抗上述作用。结论 :GSH能部分拮抗L dopa的毒性作用 。

还原型谷胱甘肽对帕金森病保护性治疗的实验研究

目的 观察还原型谷胱甘肽对帕金森病 (PD)大鼠模型的保护性治疗作用 ,并探讨其作用机理。方法 应用 6 羟基多巴制作PD大鼠模型。将大鼠模型随机分为 4组 (每组 8只 ) :模型组 ,谷胱甘肽 (GSH)组 ,左旋多巴 (L dopa)组 ,谷胱甘肽 +左旋多巴组 ,另设对照组 (8只 ) ,分别给予相应处理 ,共 4 5天 ,给药前后均进行行为学测试 ,给药结束后行免疫组化和电镜观察 ,并测定黑质区谷胱甘肽过氧化物酶 (GSH Px)、丙二醛 (MDA)、活性氧 (ROS)及线粒体呼吸链酶复合体Ⅰ水平。结果 (1)GSH对其旋转行为无明显影响 (P >0 .0 5 ) ;(2 )GSH能减轻黑质区氧化应激损伤 ;(3)GSH能增强黑质呼吸链酶复合体Ⅰ活性 ;(4 )免疫组化发现GSH组TH IR神经元较模型组明显增多 (P <0 .0 0 1) ;(5 )电镜下发现GSH可部分延缓凋亡进程。结论 (1)GSH能减轻黑质区氧化应激损伤 ,并对线粒体呼吸链具有一定保护作用 ;(2 )GSH与L dopa合用既可有效改善症状 ,又对残存黑质多巴胺能神经元具有保护性治疗作用。