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题名神经菌毛素1 b结构域的克隆及表达
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作者
孔苗苗
戴长松
葛凡
张海霞
沈颖
戴华
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机构
扬州大学江苏省非编码rna基础与临床转化重点实验室江苏省中西医结合老年病防治重点实验室医学院
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出处
《生物技术通讯》
CAS
2017年第4期447-450,518,共5页
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基金
国家自然科学基金(81472815)
江苏省大学生创新创业实践训练计划(201511117064Y)
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文摘
目的:制备重组人神经菌毛素1(NRP1)b结构域蛋白。方法:采用PCR技术,从p GEM-NRP1克隆载体中扩增人NRP1 b结构域(HuNRP1~b)cDNA,并将其克隆入pCold TF,构建重组原核表达质粒pCold-HuNRP1~b并转化大肠杆菌BL21(DE3)感受态,制备重组大肠杆菌BL21(DE3)(pCold-HuNRP1~b),低温条件下用IPTG诱导重组菌的表达,制备重组蛋白TF-HuNRP1~b。结果:酶切、测序结果表明pCold-HuNRP1~b构建成功,经SDS-PAGE分析,重组质粒转化表达菌后重组蛋白TF-HuNRP1b获得表达,融合蛋白相对分子质量约90×10~3。结论:获得原核表达的重组HuNRP1~b蛋白,为该蛋白的规模化生产及其单克隆抗体的制备提供了有效的生物材料。
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关键词
神经菌毛素1
CDNA
克隆
重组蛋白
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Keywords
neuropilin 1
cDNA
cloning
recombinant protein
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分类号
Q78
[生物学—分子生物学]
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