TRAIL真核表达质粒的构建及抑制肝癌生长的实验研究

目的 构建TNF相关凋亡诱导配体(TRAIL)基因的真核表达质粒,观察其对BALB/c裸鼠肝癌细胞皮下移植瘤模型的抑瘤作用。方法 提取U937 细胞总RNA,用RT PCR方法扩增出胞外区(114-281aa),连入溶菌酶信号肽序列,构建分泌型TRAIL重组质粒; 建立裸鼠7402肝癌细胞皮下移植瘤模型,纯化后的质粒DNA与脂质体聚乙烯胺混合后经肌肉注射进行基因转染,体内验证重组蛋白的抑瘤活性,采用TUNEL法进行肿瘤组织细胞凋亡检测。结果 肿瘤体积测定结果显示,TRAIL对肝癌细胞生长有抑制作用; 凋亡检测光镜下可见有棕褐色凋亡细胞,细胞凋亡指数增高。结论 重组TRAIL质粒能引起肿瘤细胞的凋亡,抑制7402肝癌细胞的生长。