改良Feeney自由落体法建立大鼠创伤性脑损伤模型

背景:目前关于Feeney自由落体创伤性脑损伤模型,探讨减轻开颅过程中持续磨骨损伤因素的文献较少。目的:通过改变开颅骨窗方式改良创伤性脑损伤大鼠模型。方法:将36只SD大鼠随机平均分成假手术组、模型组和改良模型组。改良模型组造模过程中改良了开骨窗的方式,用小钻头磨骨钻低速2 m/s,在打击的损伤区域边缘打6-8个小孔,每圆孔直径为0.3-0.5 mm,感到空腔而不触及脑实质后立即抽出。改良模型组和假手术组采用改良后的方法开骨窗,模型组按常规开骨窗方法,实施的打击参数相同改良模型组;假手术组不实施打击。造模后第1天对大鼠进行mNSS评分;造模后第1,7天扫描T2WI磁共振成像,测量T2值;造模后第7天,苏木精-伊红染色病理切片观察脑组织形态学,并检测血液黏度和炎症因子白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平。结果与结论:①造模后第1天,模型组、改良模型组大鼠mNSS评分均高于假手术组(P<0.0001),改良模型组评分低于模型组(P<0.0001);②造模后第1,7天,模型组、改良模型组T2值均高于假手术组(P<0.05),改良模型组T2值低于模型组(P<0.05);③造模后第7天,模型组和改良模型组的血液黏度值、白细胞介素6、白细胞介素1β、肿瘤坏死因子α水平均高于假手术组(P<0.05),改良模型组白细胞介素6水平低于模型组(P<0.05);④基于Feeney自由落体法的创伤性脑损伤大鼠改良模型较好地控制了创伤性脑损伤大鼠造模中开颅骨的损伤因素。

副神经和迷走神经、颈神经根交通支的形态学观察及临床意义

目的观测副神经与迷走神经、颈神经根交通支的形态特点及副神经在颈静脉孔处的毗邻。方法解剖剥离头颈标本,观测颈静脉孔内的结构毗邻、颈静脉孔下方处副神经与迷走神经间的交通支及副神经脊髓根与颈神经根的交通支。结果在颈静脉孔处,左侧迷走道的面积为(6.99±0.74)mm2,右侧的面积为(5.02±0.37)mm2,差异具有统计学意义(P<0.05);在颈静脉孔下方处,迷走神经和副神经有交通支者29侧(76.3%),交通支有4种分型,左侧交通支的长度为(5.82±1.18)mm,右侧长度为(6.60±1.17)mm,左右侧相比,差异无统计学意义;在22侧标本上观测到副神经脊髓根和C1、C2颈神经后根存在交通支者17侧(77.27%,17/22)。结论副神经和迷走神经在颈静脉孔下方存在交通支,这种解剖结构特点,为临床上避免损伤副神经提供解剖学依据;副神经和颈神经后根存在交通支,说明副神经含有感觉纤维,来源于颈神经后根,其功能可能与维持头部姿势有关。

大鼠脊髓损伤致痉挛后五羟色胺1D受体的表达

目的研究大鼠脊髓损伤(SCI)致痉挛后,脊髓损伤段以下五羟色胺1D受体(5-HT1DR)的表达变化。方法Wistar大鼠36只随机分为假手术(Sham)组、脊髓损伤模型(SCI)组各18只。Sham组只打开脊髓骶2(S2)节段对应椎板暴露脊髓,不予脊髓任何损伤;SCI组使用负压吸引器将脊髓S2节段完全离断1~3 mm,制作脊髓S2全横断损伤模型。术后60 d采用鼠尾痉挛评分法,评估大鼠尾部痉挛程度。免疫荧光染色法观察两组脊髓S2节段以下5-HT1DR的表达和分布,Western印迹和实时荧光定量PCR检测两组脊髓S2节段以下5-HT1DR的蛋白和mRNA表达情况。结果术后60 d,SCI组大鼠尾部痉挛评分均达到4~5分。Sham组和SCI组脊髓中5-HT1DR均主要在脊髓灰质的背角(DH)、中间带(IMZ)和腹角(VH)3个区域表达;3个区域中,SCI组脊髓中5-HT1DR光密度值较Sham组均显著降低(P<0.05)。Western印迹和实时荧光定量PCR检测结果显示:与Sham组相比,SCI组脊髓内5-HT1DR的蛋白和mRNA表达水平均显著降低(P<0.05)。结论术后60 d,SCI组大鼠尾部痉挛充分发展,痉挛症状典型;且脊髓中5-HT1DR表达显著下降,两者变化可能相关。

胱抑素C对缺血再灌注损伤大鼠脑水肿和微血管的影响

目的观察胱抑素C(Cys C)干预对脑缺血再灌注损伤大鼠脑皮质AQP4、MMP-2和血脑屏障的形态学变化并探讨其影响机制。方法雄性SD大鼠随机分为假手术组、缺血再灌注组和Cys C低、中、高浓度组。采用改良线拴法制备大鼠大脑中动脉栓塞模型,缺血2 h再灌注24 h后采用干湿重法测定脑组织含水量、检测脑组织EB含量,评价血脑屏障通透性改变程度。在电镜下观察各组大鼠脑皮质微血管的形态结构;Western blot法检测水AQP4表达,免疫组化法进行MMP-2光密度值检测。结果与缺血再灌注组比较,Cys C低、中浓度组血脑屏障损伤程度明显减轻,毛细血管张开数量增多;AQP4蛋白表达降低,MMP-2表达的OD值也显著减少。而Cys C高浓度组血脑屏障损伤严重;AQP4蛋白表达明显升高,MMP-2蛋白表达OD值也明显增大。结论Cys C在一定浓度下干预能减轻缺血再灌注对血脑屏障的损伤,其机制可能与AQP4蛋白表达降低及MMP-2表达OD值减少有一定的关系。

半胱氨酸蛋白酶抑制剂C对局灶性脑缺血再灌注大鼠大脑皮质caspase-9、脑红蛋白表达和过氧化损伤的影响

目的:探讨不同浓度半胱氨酸蛋白酶抑制剂C(CysC)对大鼠损伤大脑皮质组织caspase-9和脑红蛋白(NGB)的表达、氧化损伤和脑组织形态学的影响。方法:大鼠按照随机数字表分为假手术组(Sham组)、缺血再灌注组(I/R组)、CysC低、中、高浓度组。线栓法制备右侧局灶性脑缺血再灌注大鼠模型,缺血2h再灌注24 h后行H-E染色,观察脑组织形态学变化;免疫组织化学法检测caspase-9的阳性细胞数;免疫组织荧光法检测皮质神经元NGB阳性细胞数;免疫印迹检测脑皮质组织中caspase-9蛋白的表达。羟胺法检测超氧化物歧化酶(SOD)活力,化学比色法检测谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)活力,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量。结果:与I/R组相比,CysC低、CysC中浓度组caspase-9表达较I/R组明显减少;而CysC高浓度组caspase-9的表达明显升高,与I/R无明显差别。CysC低、CysC中浓度组caspase-9阳性细胞数较I/R组明显减少,NGB阳性细胞数较I/R组显著增多,SOD和GSH-PX活力升高,MDA含量下降;而CysC高浓度组caspase-9阳性细胞数增多,NGB阳性细胞数减少,SOD和GSH-PX活力降低,MDA含量升高;CysC高浓度组与I/R组相比,差异无统计学意义。结论:CysC低、中浓度可能通过上调NGB的表达,下调caspase-9的表达,减轻脑缺血再灌注后的自由基损伤。而浓度过高则作用相反。

不同代际居住模式老年人社交活跃度现状及影响因素——基于Charls数据的随机森林分析

目的探讨不同代际居住模式老年人社交活跃度的现状及影响因素,为科学提升老年人社交活跃度提供依据。方法对2018年的中国健康与养老追踪调查数据建立随机森林预测模型,甄别共居和独居老人社交活跃度的影响因素,并预测各影响因素的重要性。结果所有老人的高社交活跃度比例为26.88%;独居老人的高社交活跃度(18.8%)所占比重高于共居老人(8.1%)。年龄、身体功能障碍、养老金等变量对共居和独居老人的社交活跃度均具有预测作用,疼痛困扰和生命期望仅对独居老人的社交活跃度有预测作用,其预测模型效果良好(共居:AUC=0.86;独居:AUC=0.82)。结论老年人高社交活跃度比例较低。随机森林的预测模型结果验证了老年人社交活动的影响交互理论框架的适用性。

基于UPLC-Q-TOF-MS和网络药理学辨识白芍治疗原发性痛经的质量标志物

目的借助UPLC-Q-TOF-MS技术和网络药理学探究白芍治疗原发性痛经的机制,辨识其质量标志物。方法利用UPLC-Q-TOF-MS技术对白芍进行成分分析,借助网络药理学方法收集白芍活性成分和原发性痛经靶点,归纳两者交集靶点,借助DAVID平台对靶点进行GO与KEGG通路富集分析;并将核心成分与核心靶点进行分子对接,依据五原则结合文献预测白芍治疗原发性痛经的质量标志物。结果白芍提取物中鉴定出63个化合物,经筛选得到4个关键活性成分,包括芍药内酯苷、牡丹皮苷I、柚皮素和芍药内酯C,作用于6个核心靶点BCL2L1、HSP90AA1、MMP9、PPARG、VEGFA、STAT3,涉及IL-17、TNF、PI3K/Akt等信号通路。分子对接显示发现这6个核心靶点与4个活性成分有良好的亲和力,基于五原则预测出白芍治疗原发性痛经的候选质量标志物为2个。结论预测出芍药内酯苷和芍药内酯C可作为白芍治疗原发性痛经的候选质量标志物,为进一步提升白芍质量控制奠定依据。

居家失能老人的抑郁症状及其影响因素——基于2018年CHARLS的数据分析

目的:了解居家失能老人抑郁症状及其影响因素,为提高失能老人心理健康水平和生活质量提供有益参考。方法:利用2018年中国健康与养老追踪调查(CHARLS)的数据,通过日常生活能力量表(ADL)判定居家老年人的失能状态,分析其抑郁症状及其影响因素。结果:中国2018年居家老年人的失能率为9.10%,其中,573名失能老年人中有抑郁症状者371例。独立样本t检验得出居家非失能老人的受教育程度、身体残疾状况、视力问题、听力问题、疼痛烦恼、MMSE总分、生活满意度、健康满意度均显著高于居家失能老人,居家失能老人的抑郁总分显著高于居家非失能老人。层次回归分析结果显示,受教育程度、视力问题、身体残疾、疼痛烦扰、健康满意度、生活满意度、婚姻满意度是失能老年人抑郁的危险因素。结论:中国2018年居家失能老年人的抑郁风险相较于居家非失能老人更高,其中,居家失能老年人的受教育程度、视力问题、身体残疾、疼痛烦扰、健康满意度、生活满意度、婚姻满意度是中国2018年居家失能老年人抑郁的主要影响因素。

股骨颈滋养孔的形态特点及临床意义

目的观测股骨颈滋养孔的分布、形态特点,探讨与骨质疏松性股骨颈骨折的相关性。方法干燥股骨标本73例,其中骨质疏松标本12例,正常组61例。观测股骨颈滋养孔的位置、数目、孔径,计算各区域滋养孔面积及不同孔径的百分比。结果无论是正常组还是骨质疏松组,股骨颈上方区域滋养孔的数目、面积所占百分比均最多;骨质疏松组与正常组相比,股骨颈后方和上方滋养孔孔径、面积所占百分比明显变小,差异有显著性。结论股骨颈上方区域滋养孔数目多、面积大,使此部位结构薄弱,可能是造成股骨颈骨折的解剖因素之一。骨质疏松组股骨颈上方区域滋养孔的面积百分比明显变小、孔径也较小,提示骨质疏松性股骨颈骨折可能与其血供较差有关。

老年痴呆患者家庭抗逆力的内涵及干预模式

痴呆症是在记忆、语言、解决问题和其他认知技能方面存在困难,影响个人日常活动能力的症候群。在应对痴呆症护理的过程中,不同的家庭呈现出了不同的应对方式。家庭抗逆力研究范式为这种现象提供了背景框架,它可以很好地阐释面对相同的逆境,为何不同的家庭适应状况参差不齐。本文从概念和理论模型、动力机制两方面介绍了老年痴呆症患者家庭抗逆力的内涵;从社会文化、照护关系、照护者的心理资源三方面阐述了其影响因素;常见的实践干预项目有教育和支持团体干预、基于正念/冥想训练的干预、悲伤干预计划、喘息(Respite)计划和诗歌写作干预。

基于非靶向尿液代谢组学技术的原发性痛经不同进展阶段的生物学基础研究

目的 通过非靶向尿液代谢组学技术研究原发性痛经形成过程中大鼠的内源性代谢特征,探讨其潜在的生物学实质。方法 将20只SD大鼠随机分成空白组和模型组。模型组大鼠采用苯甲酸雌二醇联合缩宫素方法复制原发性痛经模型,空白组正常饮食饮水。采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱联合多变量模式识别方法寻找差异性代谢物及核心代谢通路,使用MetaboAnalyst 5.0平台绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic curve, ROC)曲线来评估核心代谢物临床诊断效能。结果 共筛选出马尿酸、苯乙醛、前列腺素G2、6-羟基-5-甲氧基吲哚葡萄糖醛酸等46种差异显著的小分子代谢物,涉及苯丙氨酸代谢,戊糖和葡萄糖醛酸酯的相互转化,花生四烯酸代谢3条核心代谢通路。ROC曲线进一步分析出4种核心生物标志物曲线下面积均大于0.7。结论 原发性痛经不同进展阶段呈现不同的代谢图谱,主要涉及脂肪酸代谢、糖类代谢和氨基酸代谢的紊乱,同时提取出的特征性生物标志物对于评估原发性痛经具有较高的诊断价值。

阿尔茨海默病超微结构研究进展

阿尔茨海默病(AD)是发生在中枢神经系统的退行性疾病。虽然对AD的研究已取得了较大进展,但对其在认知功能和行为能力方面造成进行性损害的病因尚不明确,且无特效治愈药物,目前的治疗仅可进行对症治疗和延缓AD进展。关于AD的发病机制,目前存在多种假说,主要为:①胆碱能功能缺陷假说;②淀粉样假说,β-淀粉样蛋白(Aβ)的异常沉积;③Tau蛋白过度磷酸化并聚集成神经原纤维缠结(NFT)而引起的Tau蛋白病;④氧化应激和钙调节失衡等。

基于网络药理学和实验验证探讨陈皮藿香汤治疗腹泻的作用机制

目的:基于网络药理学和实验验证探讨陈皮藿香汤治疗腹泻的作用机制。方法:通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)筛选出陈皮藿香汤的活性成分及作用靶点。采用GeneCards及在线人类孟德尔遗传数据库(OMIM)检索腹泻疾病相关靶点,聚焦共同靶标,借助Cytoscape 3.7.1及STRING数据库构建成分-靶点-疾病及蛋白质-蛋白质相互作用(PPI)网络,采用Bioconductor平台和R语言对核心靶标进行基因本体(GO)富集和京都基因与基因组百科全书(KEGG)通路分析。利用AutoDockTools 1.5.6和AutoDockVina 1.1.2软件中进行分子对接。最后通过动物试验进一步验证实验结果。结果:陈皮藿香汤的主要活性成分51个、对应靶点226个,药物疾病共同靶点37个;GO富集分析得1 249个条目(P<0.05)、KEGG通路富集分析筛选出110条信号通路(P<0.05),主要涉及磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(Akt)、Janus激酶/信号转导子与转录激活因子(JAK/STAT)、缺氧诱导因子-1(HIF-1)、丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)等信号通路。分子对接结果表明橙皮苷与Akt1结合能力最强。动物实验结果显示大鼠陈皮藿香汤给药后可以显著缓解大鼠的腹泻症状,给药第1天腹泻指数降为0.92,与模型组腹泻指数(1.24)差异有明显统计学意义(P<0.05),小肠墨汁推进率70.36%,经统计学分析与模型组(58.20%)差异有显著统计学意义(P<0.01),给药后可改善大鼠的肠蠕动功能。酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测结果显示白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平表达明显降低(P<0.05),Akt1、表皮细胞生长因子(EGF)、表皮生长因子受体(EGFR)水平表达明显升高(P<0.05)。结论:陈皮藿香汤中的有效成分主要通过Akt1、IL-6、IL-1β、EGF、EGFR等核心靶点调节PI3K/Akt、MAPK等信号通路发挥对腹泻的治疗作用,为后续研究陈皮-藿香药对药理机制,两者间配伍的科学内涵提供了实验依据。

艾灸“相对穴”对脊髓损伤大鼠运动能力和其肠道菌群的影响

目的探讨艾灸“相对穴”神阙与命门、阳陵泉与阴陵泉对脊髓损伤大鼠运动能力与肠道菌群的调节作用。方法选取SPF级Wistar成年雌性大鼠38只并适应性饲养一周。按照随机数字表法将其中8只大鼠为假手术组(C),剩余大鼠采用改良Allen’s法损伤大鼠T10段胸椎对应脊髓。将造模成功的24只脊髓损伤(SCI)大鼠随机分为3组:模型组(M)、艾灸“神阙-命门”组(SM)、艾灸“阳陵泉-阴陵泉”组(MOXI),每组各8只。艾灸“相对穴”神阙与命门、阳陵泉与阴陵泉10 d后无菌操作收集各组大鼠新鲜粪便,采用16S rRNA测序分析各组菌群分布情况。结果艾灸“相对穴”提高了脊髓损伤大鼠后肢运动功能评分,其与模型组差异具有统计学意义(P<0.05)。M组肠道菌群总量和多样性先减少后增加,SM组和MOXI组均增加。各组肠道菌群在门、科、属水平结构组成发生改变。M组大鼠体内埃希菌-志贺菌属(Escherichia-Shigella)相对丰度升高,乳杆菌属(Lactobacillus)和Lachnospiraceae_NK4A136_group降低,SM组和MOXI组调节此种变化。结论艾灸“相对穴”神阙与命门、阳陵泉与阴陵泉可以改善脊髓损伤大鼠后肢运动能力以及肠道菌群构成。

薯蓣皂苷元无定形固体分散体制备及体内外评价

目的制备薯蓣皂苷元无定形固体分散体(diosgenin amorphous solid dispersion,Dio-ASD),提高Dio溶出度和生物利用度。方法应用分子模拟技术分析Dio与载体之间相互作用并通过抑晶实验验证,构建Dio与载体混溶性曲线相图,理论预测二者混溶性;以Soluplus为载体,应用共沉淀法制备Dio-ASD;通过溶出度测定、差示扫描量热分析(differential scanning calorimetry,DSC)、X-射线粉末衍射(X-ray powder diffraction,XRPD)、扫描电镜分析(scanning electron microscopy,SEM)、傅里叶红外光谱(Fourier transform infrared spectroscopy,FT-IR)对Dio-ASD进行体外评价;采用UPLC-MS/MS方法测定大鼠体内Dio血药浓度,计算药动学参数,对Dio-ASD进行体内评价。结果分子模拟结果显示Soluplus与Dio之间能形成疏水键和氢键相互作用,结合能强于其他载体,且Soluplus对Dio的抑晶作用最强。构建了混溶性曲线相图,Dio与Soluplus在25℃下的混溶性为68.57%。与原料药相比,Dio-ASD溶出度明显提高。物相表征结果显示,Dio以无定形态存在于Dio-ASD中,Dio和Soluplus之间存在相互作用。药动学结果表明大鼠ig给药后,Dio-ASD的生物利用度较Dio提高了近5倍。结论制备的Dio-ASD可以显著提高药物溶出度和大鼠体内生物利用度。