以学生为中心的翻转课堂教学模式在病理学实验教学中的应用

病理学是研究人体疾病发生发展规律、探讨疾病本质的科学,也是医学教学中连接基础医学和临床医学的桥梁学科[1]。同时,病理学亦属于形态学的范畴,实验教学在病理学教学中具有重要作用,学时数约占总学时数的1/3。传统的病理学实验教学模式中学生在学习的过程中比较被动,学生普遍反映知识抽象,学习过程枯燥乏味。因此,寻找一种新的教学模式,最大限度地提高学生学习的积极性,使学生真正成为学习的主体,显得尤为重要。

病理学“多元互动”教学模式的探索与实践

病理学是一门研究疾病的病因学、发病学、病理改变和转归的医学基础学科，同时又是一门实践性很强的具有临床性质的学科，是沟通基础医学和临床医学的桥梁。为让学生主动探究并系统掌握病理学这门课程，为将来的临床工作和科学研究提供必要的理论基础，我们进行了“多元互动”

累及胃肠道的间变性大细胞淋巴瘤的临床病理学特点

间变性大细胞淋巴瘤是一种新型的T细胞淋巴瘤,属于侵袭性非霍奇金淋巴瘤,主要分布于淋巴结内外的皮肤或者皮下组织,分布在胃肠道的间变性大细胞淋巴瘤比较少见[1,2].本文拟进一步了解累及胃肠道间变性大细胞淋巴瘤的临床病理表现特点,并有效分析其预后.

β-catenin不同表达定位与胃癌临床病理特征的关系

目的探讨β-catenin不同表达定位在胃癌组织中的意义及与胃癌临床病理特征的关系。方法应用免疫组化SP法检测120例胃癌组织及50例正常胃黏膜中β-catenin的表达情况。结果β-catenin在正常胃黏膜中的表达定位于细胞膜,阳性率为100. 00%。但其在胃癌组织中细胞膜表达缺失,出现细胞质、细胞核或质/核异位表达,异位表达率高达81. 67%(98/120),其异位表达与胃癌分化程度、淋巴结转移及TNM分期有关(P <0. 05)。120例胃癌组织中,β-catenin细胞核异位表达率为36. 67%(44/120),并且其细胞核表达与胃癌TNM分期有关(P <0. 05),β-catenin细胞核阳性患者5年总体生存率明显低于细胞核阴性者(P <0. 05)。结论在胃癌的发生过程中β-catenin起重要作用,其不同表达定位与胃癌的进展有关,β-catenin有望成为胃癌诊断及治疗的潜在靶点。

脑信号蛋白6D(SEMA6D)与Snail蛋白在胃癌组织高表达且与恶性临床病理指标呈正相关

目的研究脑信号蛋白6D(SEMA6D)和果蝇蜗牛同源物蛋白(Snail)在胃癌组织中表达及其临床病理学意义.方法选取54例胃癌患者的肿瘤组织和26例癌旁胃黏膜组织,Western blot法检测其蛋白水平,免疫组织化学染色法结合激光扫描共聚焦显微镜技术检测SEMA6D与Snail的表达和共定位现象,并分析两者的相关性及两者与患者临床病理学特征的关系.结果与癌旁胃黏膜组织比较,胃癌组织中SEMA6D与Snail的蛋白表达水平明显增高;且在胃癌组织中SEMA6D与Snail存在明显共定位现象;在分化程度越差、浸润深度越深、有淋巴结转移及TNM分期高的胃癌组织中,SEMA6D与Snail的蛋白表达量越高.结论SEMA6D与Snail在胃癌组织高表达且与胃癌的恶性临床病理指标相关.

胃癌组织中Caspase 3、Caspase 9的表达及其临床意义

目的探讨胃癌组织中Caspase 3和Caspase 9蛋白的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测50例胃癌组织和40例癌旁正常胃黏膜组织中Caspase 3、Caspase9蛋白表达水平,并分析两者表达与胃癌临床病理特征和预后的关系及两者之间的相关性。结果胃癌组织中Caspase3、Caspase 9蛋白表达均低于癌旁正常胃黏膜组织,差异有统计学意义(P<0.05);Caspase 3和Caspase 9蛋白表达水平与胃癌组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05),而与浸润深度无相关性(P>0.05)。两者在胃癌组织中的表达呈正相关(rs=0.636,P<0.05)。结论 Caspase3、Caspase 9的异常表达参与胃癌的发生、发展,两者起正协同作用。Caspase 3、Caspase 9与胃癌临床病理特征密切相关,可作为判断胃癌患者病情进展及预后的生物学标志物,有望成为胃癌未来治疗的新靶点。

2000μW/cm^2电磁辐射对大鼠海马NR2A蛋白及其mRNA表达的影响

目的:探讨2000μW/cm2电磁辐射对大鼠海马N-甲基-D-门冬氨酸受体亚单位2A(NR2A)蛋白及其mRNA水平表达的影响,揭示电磁辐射对大鼠学习记忆功能的损伤机制。方法:实验分为空白对照组,假辐射组,1h/d、2h/d、3h/d辐射组。将辐射组大鼠固定体位,头部接受功率密度为2000μW/cm2的近场辐射,连续辐射30d。通过Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力,采用免疫组化法和Western blot法检测大鼠海马组织NR2A蛋白表达的变化,RT-PCR法检测大鼠海马组织NR2A mRNA表达的变化。结果:假辐射组大鼠各项指标与空白对照组相比均无统计学差异(P>0.05);而各辐射组大鼠寻找安全平台的逃避潜伏期较空白对照组明显延长(P<0.05);各辐射组大鼠海马神经元排列紊乱,NR2A阳性细胞比率显著下降,海马组织NR2A蛋白及其mRNA表达水平明显降低(P<0.05)。结论:2000μW/cm2电磁辐射可导致大鼠学习记忆功能下降,其机制可能与大鼠海马组织NR2A蛋白及其mRNA的表达降低有关。

补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织水通道蛋白4表达及血-脑脊液屏障通透性的影响研究

目的探讨补阳还五汤对脑出血大鼠脑组织水通道蛋白4(AQP4)表达及血-脑脊液屏障通透性的影响。方法 2014年3月—2015年11月,采用随机数字表法将成年雄性SPF级SD大鼠分为假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组,各24只。其中模型组、补阳还五汤各剂量组制备脑出血模型。造模后第2天起,补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组灌胃补阳还五汤,药量分别为13.2、26.5、53.0 g·kg^(-1)·d^(-1),连续给药14 d,假手术组及模型组给予等体积的0.9%氯化钠溶液。免疫组织化学法检测磷酸化肌醇磷脂3激酶(PI3K)、蛋白激酶B(AKT)表达水平,免疫荧光标记法检测AQP4表达水平,干湿重法检测脑组织含水量,甲酰胺法检测血-脑脊液屏障通透性〔以依文思蓝(EB)含量表示〕。结果假手术组、模型组、补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组PI3K、AKT表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组PI3K表达水平高于模型组;补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组AKT表达水平高于模型组(P<0.05)。5组AQP4表达水平比较,差异有统计学意义(F=95.79,P<0.001);其中补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组AQP4表达水平高于模型组(P<0.05)。5组脑组织含水量比较,差异有统计学意义(F=16.21,P<0.001);其中补阳还五汤高剂量组脑组织含水量低于模型组(P<0.05)。5组脑组织EB含量比较,差异有统计学意义(F=60.05,P<0.001);其中补阳还五汤低剂量组、补阳还五汤中剂量组、补阳还五汤高剂量组脑组织EB含量低于模型组(P<0.05)。结论补阳还五汤能够减轻脑出血诱发的脑水肿,其机制可能与其激活PI3K/AKT信号转导通路,调控AQP4极性表达,降低血-脑脊液屏障通透性有关。

MMP-9的表达与胃癌浸润转移的相关性研究

目的探讨MMP-9的表达与胃癌浸润转移的关系。方法采用原位杂交法和免疫组化法,检测80例胃癌组织与60例癌旁正常胃粘膜组织中MMP-9mRNA及其蛋白的表达,根据组织学类型、浸润深度和有无淋巴结转移分类分析其与MMP-9表达水平的相关性。结果胃癌组织中MMP-9mRNA的阳性表达率为75%,MMP-9蛋白的阳性表达率为71.25%,而癌旁正常胃粘膜组织中MMP-9mRNA的阳性表达率为43.33%,MMP-9蛋白的阳性表达率为41.67%。胃癌组织中MMP-9mRNA及蛋白的阳性表达率均明显高于癌旁正常胃黏膜组织(P<0.05)。未侵及浆膜层的胃癌组织中MMP-9的mRNA和蛋白的阳性表达率分别为63.2%和57.9%;而侵及浆膜层的胃癌组织中MMP-9的mRNA和蛋白的阳性表达率分别为85.7%和83.3%,分别明显高于未侵及浆膜层的胃癌组织(P<0.05)。无淋巴结转移的胃癌组织中MMP-9的mRNA和蛋白的阳性表达率分别为64.4%和60.0%;而有淋巴结转移的胃癌组织中MMP-9的mRNA和蛋白的阳性表达率分别为88.6%和85.7%,分别明显高于无淋巴结转移的胃癌组织(P<0.05)。结论胃癌组织中MMP-9的mRNA和蛋白表达明显高于癌旁正常胃粘膜,MMP-9的阳性表达与胃癌的浸润和淋巴结转移均存在明显的相关性,可作为胃癌的诊断和预后评估的备选指标。

节律因子BMAL1通过SHH信号转导通路影响胃癌MGC-803细胞的增殖

背景与目的:节律因子BMAL1除了在维持正常生物节律中发挥核心作用外,也参与多种肿瘤的演进过程,但其具体作用机制还未完全阐明。探讨节律因子BMAL1对胃癌细胞增殖的影响及下游信号转导通路。方法:应用靶向BMAL1的小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)进行细胞转染(si-BMAL1组),并设置乱序阴性对照(negative control,NC)组,通过蛋白质印迹法(Western blot)验证细胞转染效率。分别采用MTT法和平板集落形成实验检测细胞的活力和增殖情况,采用Western blot测定细胞中增殖相关功能蛋白cyclin D1的表达水平以及SHH信号转导通路蛋白SHH、SMO、GLI1的表达变化。采用SHH信号通路抑制剂环巴胺处理BMAL1下调后的MGC-803细胞,采用Western blot检测SHH、SMO、GLI1及cyclin D1的蛋白水平,采用平板集落形成实验检测细胞增殖能力的变化。结果:与NC组相比,si-BMAL1组细胞活力增强,细胞中cyclin D1的表达上调,SHH、SMO、GLI1的表达明显上调(P<0.05)。SHH抑制剂环巴胺处理干扰BMAL1的MGC-803细胞后,与si-BMAL1组相比,si-BMAL1+环巴胺组SHH、SMO、GLI1的蛋白水平下调,cyclin D1并未发生明显变化,si-BMAL1促进胃癌细胞增殖的作用可被环巴胺所逆转。结论:BMAL1可能通过SHH信号转导通路抑制胃癌MGC-803细胞的增殖。

子宫肌瘤雌激素受体亚型mRNA的表达

目的 探讨雌激素受体亚型的表达与子宫平滑肌瘤发生、发展的关系。方法 将60例子宫肌瘤患者分为AB两组, A组32例<48岁,B组28例>48岁,应用原位杂交技术测定平滑肌瘤组织中雌激素两种受体亚型mRNA的表达,取肿瘤周 围正常的平滑肌作对照。结果 子宫肌瘤组织中ERαmRNA的表达明显高于正常的平滑肌组织,而ERβmRNA的表达降 低;B组ERαmRNA在子宫平滑肌瘤组织中的表达较A组呈下降趋势,而ERβmRNA的表达呈上升趋势。结论 子宫肌瘤的 发生发展与ERαmRNA的高表达有关,亦与ERβmRNA表达减少有关。肌瘤的萎缩可能与ERβmRNA表达的升高趋势及 ERαmRNA表达的下降趋势均相关。

胃腺癌组织中c-IAP1蛋白和mRNA的表达及临床意义

目的探讨c-IAP1蛋白和mRNA在胃腺癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法、Western blot和qRTPCR技术检测50例胃腺癌组织和40例癌旁正常胃黏膜组织中c-IAP1蛋白和mRNA的表达,分析其在胃腺癌发生、发展中的作用及与临床病理特征的关系。结果 c-IAP1蛋白和mRNA在胃腺癌组织中的表达水平明显高于癌旁正常胃黏膜组织(P均<0.05)。胃腺癌组织中c-IAP1蛋白和mRNA的表达与组织分化程度、TNM分期、淋巴结转移、浸润深度均相关(P<0.05),与患者性别、年龄无关(P<0.05)。结论 c-IAP1在胃腺癌组织中表达升高,抑制了胃腺癌细胞的凋亡,促进了胃腺癌的发生、发展,有可能为胃腺癌的临床靶向治疗提供新的理论依据。

不同分离纯化法建立人早孕滋养细胞模型的效果比较

目的对4种建立滋养细胞的方法进行比较,以期寻求一种简便高效的人早孕滋养细胞的体外培养方法,为相关研究提供基础。方法早孕绒毛通过胰酶联合胶原酶消化分离后,分别采用直接接种、差速贴壁联合差速消化法、人外周血淋巴细胞分离液分离纯化法、完整绒毛消化联合简化的percoll密度梯度分离法4种方法纯化培养,倒置显微镜观察细胞形态,应用HE染色、免疫组化和免疫细胞化学法检测细胞纯度。结果直接接种、差速贴壁联合差速消化法、人外周血淋巴细胞分离液分离纯化法得到的细胞细胞角蛋白7(CK-7)表达阳性率不足60%;简化的percoll密度梯度分离法得到的细胞CK-7表达阳性率达90%以上。结论完整绒毛消化联合简化的percoll密度梯度分离纯化可以得到大量较高纯度的滋养细胞以供后期实验。

良、恶性葡萄胎组织中P-选择素和HPA的表达及其临床意义

目的探讨P-选择素和乙酰肝素酶(heparanase,HPA)在良、恶性葡萄胎组织中的表达特点及临床意义。方法采用免疫组化SP法及RT-PCR技术检测40例良性葡萄胎、12例恶性葡萄胎组织中P-选择素和HPA的表达情况,同时对比观察40例正常胎盘绒毛。结果 P-选择素和HPA在正常胎盘绒毛、良性葡萄胎、恶性葡萄胎组织中蛋白的阳性表达率、阳性表达强度及mRNA相对表达量均呈逐渐上升趋势,组间比较差异均有统计学意义(P均<0. 05)。P-选择素和HPA在良、恶性葡萄胎中的表达均呈正相关(P均<0. 05)。结论 P-选择素和HPA过表达促进葡萄胎的发生、发展,检测两者表达对于良、恶性葡萄胎的鉴别诊断及预后评估有重要意义,有望成为葡萄胎恶性发展的生物学预测指标。

柯萨奇病毒性心肌炎小鼠的自然病程观察

目的以组织病理学观察CVB3感染鼠的自然病程及此过程中IL-2、IL-10的变化。方法对昆明种小鼠采用CVB3腹腔注射染毒后不同时间观察心、肝、脾、肾的病理改变及检测血清中IL-2和IL-10。结果心肌炎小鼠的各脏器出现不同程度的病理改变,IL-2I、L-10随病程的发展呈现出一定的变化:即接种CVB3后第4天IL-2水平明显低于正常均值,随着病程的发展IL-2水平呈升高趋势,第9-14天IL-2水平明显高于正常值,第10天IL-2水平达高峰,第18天IL-2水平接近正常;随着病程的发展IL-10水平逐渐下降,第9-14天IL-10水平明显低于正常均值,此时心肌病变程度加重。结论病毒性心肌炎是一类全身感染性疾病,心外器官病变不容忽视,IL-2和IL-10在此过程中起不同的作用。

Fas,FasL和Bcl-2在胃癌发生发展中的表达意义

目的 :探讨Fas,FasL和Bcl 2在胃癌发生发展中的表达及临床病理意义 .方法 :收集 93例不同胃粘膜标本 ,应用免疫组化技术检测不同病变阶段胃粘膜的Fas ,FasL和Bcl 2表达 .结果 :在正常粘膜 (n =2 0 )、癌前病变 (n =2 3)、高 中分化胃癌 (n =2 5 )、低分化胃癌 (n =2 5 )组织中Fas阳性表达率分别为 95 .0 % ,91.3% ,6 0 .0 %和 4 0 .0 % .FasL阳性表达率分别为 2 5 .0 % ,5 6 .5 % ,88.2 %和 84 .0 % .Bcl 2的阳性表达率分别 2 0 .0 % ,78.3% ,80 .0 %和 6 4 .0 % .结论 :Fas,FasL ,Bcl

IL-6及其受体mRNA在胃癌发生发展中的表达及意义

目的观察白细胞介素 6 (interleukin 6 ,IL 6 )及白细胞介素 6受体 (IL 6receptor,IL 6R)在胃正常粘膜、癌前病变、早期胃癌、进展期胃癌中的表达 ,探讨它们与胃癌发生发展的关系及临床意义。方法应用原位杂交技术检测 91例不同胃粘膜标本中IL 6及其受体mRNA表达情况 ,其中正常粘膜 2 0例 ,慢性萎缩性胃炎伴重度不典型增生和 (或 )肠上皮化生 2 0例 ,早期胃癌 2 5例 ,进展期胃癌 2 6例。结果IL 6mRNA在正常粘膜、癌前病变、早期胃癌、进展期胃癌中的阳性表达率分别为 10 %、5 5 %、84 %、84 .6 %。IL 6受体mRNA在胃粘膜不同病变中的阳性表达率分别为 10 %、5 0 %、80 %、88.4 %。IL 6及其受体mRNA在正常粘膜中的表达明显低于癌前病变 (P <0 .0 5 ) ;IL 6及其受体mRNA在癌前病变中的表达明显低于早期胃癌 (P <0 .0 5 ) ;而早期胃癌中的IL 6及其受体mRNA的表达与进展期胃癌无明显差异 (P >0 .0 5 )。结论IL

Hedgehog信号通路通过调控缝隙连接蛋白43表达影响胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡

探讨Hedgehog信号通路对胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡的作用及对缝隙连接蛋白43(Cx43)表达的影响,探索其在胃癌细胞增殖和凋亡作用中的可能作用机制。用不同浓度的Hedgehog信号通路抑制剂cyclopamine(5、10、20、30、40、50μmol/L)处理MGC-803细胞24、48、72 h,同时设立空白对照组(0μmol/L),MTT法检测各组细胞增殖抑制率。以0、30、40μmol/L cyclopamine处理MGC-803细胞48 h,TUNEL原位检测细胞凋亡,qRT-PCR检测Cx43 mRNA的表达,免疫印迹检测Cx43蛋白表达。与空白对照组相比,各浓度cyclopamine组MGC-803细胞增殖抑制率明显增高,且随着cyclopamine浓度增加及作用时间延长,其增殖抑制作用增强;30、40μmol/L cyclopamine处理48 h,MGC-803细胞凋亡率明显升高,qRT-PCR检测显示Cx43 mRNA表达显著升高,免疫印迹检测显示Cx43蛋白表达明显升高。Hedgehog信号通路可影响胃癌MGC-803细胞增殖和凋亡,机制可能与调控Cx43 mRNA及蛋白表达有关。

酒精中毒性肝损伤的体视学研究

目的探讨酒精性肝损伤的形态学改变和发生机理。方法实验用雌性SD大鼠 :对照组 (C组 ) ,自由饮用去离子水 ;实验组 (A组 ) ,自由饮用 2 0 %酒精水溶液。应用体视学方法计量各组大鼠肝细胞核的体密度 (Vvn)、面密度 (Svn)、比表面 (Qn)、肝细胞核质比 (Dnp)、肝贮脂细胞计数 (NIto)、贮脂细胞平均截面积 (AIto)。结果实验组大鼠肝细胞核质比 (Dnp)、肝细胞核的体密度 (Vvn)、面密度 (Svn)较对照组显著增高 ;肝贮脂细胞计数 (NIto)、贮脂细胞平均截面积 (AIto)较对照组非常显著的增高。结论酒精中毒会引起肝细胞和贮脂细胞增生 。