miR-132对新生小鼠认知功能障碍的预防作用及其机制

目的 探讨miR-132对七氟醚诱导的新生小鼠认知功能障碍的预防作用及其可能的机制。方法 SPF级健康雄性6日龄C57BL/6小鼠64只,采用数字表法随机分为四组:正常对照组(A组)、七氟醚组(B组)、七氟醚+agomir-NC组(C组)、七氟醚+miR-132模拟物(agomir-132)组(D组),每组16只。除A组外,其他三组均持续吸入4%七氟醚4 h诱导构建小鼠认知功能障碍模型,C组和D组在造模前分别给予侧脑室注射agomir-NC和agomir-132,A组和B组给予侧脑室注射等体积生理盐水。于七氟醚诱导结束24 h时,随机每组选取8只小鼠取得海马组织,qRT-PCR检测各组小鼠海马组织miR-132,Western blotting法检测各组小鼠海马组织HMGB1、Bax和Bcl-2蛋白,ELISA法检测海马组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、SOD、GSH-PX和MDA。每组余8只小鼠于性成熟期行Morris水迷宫实验测试神经认知功能。结果 与A组相比,B、C、D组脑海马组织miR-132相对表达量均降低(P均<0.05);B、C组脑海马组织miR-132相对表达量比较,P>0.05;与B、C组相比,D组脑海马组织miR-132相对表达量升高(P均<0.05)。与A组相比,B、C、D组逃避潜伏期和游泳距离均增加(P均<0.05),在原平台象限的停留时间和穿越原平台位置的次数均减少(P均<0.05);B、C组上述各指标比较,P>0.05;与B、C组相比,D组逃避潜伏期和游泳距离缩短(P均<0.05),在原平台象限的停留时间和穿越原平台位置的次数均增多(P均<0.05)。与A组相比,B、C、D组脑海马组织HMGB1蛋白、IL-1β、TNF-α、IL-6等炎性因子水平均升高(P均<0.05);B、C组上述各指标比较,P>0.05;与B、C组相比,D组脑海马组织HMGB1蛋白表达、IL-1β、TNF-α、IL-6等炎性因子水平降低(P均<0.05)。与A组相比,B、C、D组脑海马组织SOD、GSH-PX水平及Bcl-2蛋白表达水平降低(P均<0.05),而MDA水平及Bax蛋白表达水平升高(P均<0.05);B、C组上述各指标比较,P>0.05;与B、C组相比,D组脑海马组织SOD、GSH-PX水平及Bcl-2蛋白表达水平升高(P均<0.05),MDA水平及Bax蛋白表达水平降低(P均<0.05)。结论 miR-132能够预防七氟醚诱发的新生小鼠的认知功能障碍,其机制可能与miR-132通过抑制HMGB1基因的表达,从而减轻炎性因子释放、氧化应激以及细胞凋亡有关。