新的f%T>MIC计算方法在抗生素PK/PD折点确定中的应用

目的研究并提出一种针对时间依赖性抗生素f%T>MIC计算的新方法,克服原常规算法的局限性,可用于解决口服抗生素无法计算PK/PD折点的问题。方法通过研究常规PK/PD折点计算的原理及步骤,建立了一种新的f%T>MIC计算方法,并以两种算法对Beagle犬静脉注射头孢他美的PK/PD折点进行计算和比较。结果新算法在关键步骤上基于曲线拟合,不依赖药动学房室模型,不受房室模型和给药途径限制,与常规算法比较f%T>MIC和PTA值相关性良好,相关系数分别为0.999和0.969。结论新的f%T>MIC计算方法,有望为各种给药途径及给药方案下时间依赖性抗生素PK/PD折点的确定提供一种新的思路。

Box-Behnken响应面法优化去氧氟尿苷缓释片处方及其体外释放机制研究

目的响应面法优化去氧氟尿苷骨架片处方,并进行体外释放机制研究。方法以羟丙甲纤维素(HPMC K4M)为骨架材料,结合其他辅料混合均匀,以直接压片法制备去氧氟尿苷骨架缓释片。通过Box-Behnken响应面法(Box-Behnken designresponse surface methodology,BBD-RSM)对处方进行优化,研究优化处方的体外释药规律,并进行数学模型拟合。结果优化处方的去氧氟尿苷骨架缓释片体外释放性能良好,可持续释药24h,药物释放符合Ritger-peppas模型。结论通过BBD-RSM建立的模型可用于去氧氟尿苷骨架缓释片的处方优化,优化处方达到去氧氟尿苷缓释骨架片设计要求。

四季青中原儿茶酸在beagle犬体内的药动学研究

目的建立LC-MS/MS法测定血浆中原儿茶酸的浓度,并对beagle犬灌胃四季青水煎液后原儿茶酸的药动学进行研究。方法 Beagle犬血浆样品以酮洛芬为内标,用乙腈沉淀蛋白,采用LC-MS/MS法进行分离和测定。色谱柱为C18(4.6mm×100mm,2.7μm);流动相为80%乙腈-20%水(含0.1%甲酸),流速为0.2mL/min,柱温为30℃。质谱条件:电喷雾离子源(ESI),负离子模式,多反应离子监测(MRM),检测离子为原儿茶酸m/z 153.0→109.0,内标酮洛芬m/z 253.1→209.1。6只beagle犬单次灌胃四季青水煎液50mL(0.2g/mL)后,于给药前及给药后0.083、0.167、0.333、0.5、0.667、0.833、1、1.5、2、3、4和6h采血,以LC-MS/MS法测定原儿茶酸在beagle犬体内的血浆浓度,并用非房室模型计算药动学参数。结果原儿茶酸浓度在0.05～2.00μg/mL范围内线性关系良好,定量下限为0.05μg/mL,批内和批间精密度RSD均小于8.6%,准确度为92.3%～102.0%。Beagle犬分别单次灌胃1g/kg(生药量)四季青水煎液后,其主要药动学参数Cmax为(1.53±0.33)μg/mL,Tmax为(0.42±0.09)h,t1/2为(0.80±0.16)h,MRT0～t为(1.04±0.14)h,MRT0～∞为(1.32±0.26)h,AUC0～t为(1.90±0.35)(μg/mL)·h,AUC0-∞为(2.02±0.33)(μg/mL)·h。结论本实验中建立的LC-MS/MS法专属性强、快速灵敏,可以用于犬血浆中原儿茶酸的测定。Beagle犬单次灌胃四季青水煎液后,血浆中原儿茶酸能快速吸收,达峰速度较快,在体内能滞留一定时间,有利于四季青药效作用的发挥。

药用辅料聚乙烯醇质量标准对比研究

目的对比研究药用辅料级聚乙烯醇国内外质量标准,为其国内质量标准的提高提供参考,对进一步规范国内厂家药用级聚乙烯醇的生产、认证、检查提出意见及建议。方法参考《中国药典》(2010版)、《美国药典》(36版)和《欧洲药典》(7.0版)及其他质量标准的要求,从溶液颜色及澄清度、砷盐、水不溶物、皂化值、水解度、残留溶剂等方面进行了研究。结果《中国药典》(2010版)在对药用聚乙烯醇标准规定上不如国外标准,本文研究内容对国内部分标准进行了修订和补充。结论药用辅料聚乙烯醇国内质量标准有待进一步的完善和提高。

缩酚酸肽类化合物的研究进展

缩酚酸肽(depsipeptide)是一类天然产物活性物质,包含酯键的一类多肽,具有抗菌、抗肿瘤、抗病毒、抗疟和抗血栓等生物活性。本文综述了缩酚酸肽类化合物的来源、生物活性、作用机制以及临床研究等信息,并展望缩酚酸肽类药物研究开发的前景。

以FK506结合蛋白52为靶点的高通量药物筛选模型的建立及应用

目的发现新的FKBP52抑制剂类药物,建立以人FKBP52为靶点的高通量药物筛选模型。方法通过大肠埃希菌表达系统重组表达FKBP52蛋白,并进行纯化。基于FKBP52的肽基-脯氨酰顺反异构酶(peptidyl-prolyl cis-trans isomerase,PPIase)的活性特性,建立FKBP52高通量药物筛选体系。对本公司化合物库中的31558个放线菌及真菌次级代谢产物粗提物进行筛选。结果成功构建重组表达菌株BL21(rosetta)/pET-30a/FKBP52。纯化后的重组表达人FKBP52蛋白纯度大于90%,并具有很好的PPIase活性。阳性药FK506能剂量依赖地抑制FKBP52活性,IC50为12.035ng/m L。筛选得到121个抑制率大于80%的样品,其中11株放线菌的次级代谢产物中含FK506,6株放线菌的次级代谢产物中含FK520,7株放线菌的次级代谢产物中含雷帕霉素。对随机抽取的100块96孔板筛选数据进行统计,模型的信号/本底比平均值为2.35±0.26,Z'因子平均值为0.78±0.1。结论本研究成功建立了人FKBP52抑制剂高通量药物筛选模型,该方法具有快捷、灵敏度高、稳定性好的特点,不仅可以快速进行新FKBP52抑制剂的筛选,还可以实现对FKBP52已知抑制剂如FK506、FK520和雷帕霉素等产生菌的定向筛选。

响应面法制备格列美脲环糊精包合物

目的制备格列美脲-羟丙基-β-环糊精包合物并对其处方进行优化。方法通过Box-Behnken响应面法,在单因素实验的基础上以稀释剂比例、黏合剂浓度和崩解剂比例为考察因素,以环糊精包合物片的释放度为评价指标对处方进行优化;用红外光谱法表征制备的包合物,并对制得的格列美脲片进行质量评价,拟合体外释放曲线。结果响应面法优化得到最佳处方为:稀释剂-乳糖和MCC的比例为7.37:1,黏合剂-PVP的浓度为6%,崩解剂-CMS-NA的比例为6.45%;按此条件进行3组平行实验,所得验证值为88.13%,回归方程所得理论预测值为88.69%,两者相对误差为0.64%。红外光谱显示形成了格列美脲包合物;其溶解度为68.53μg/mL,较格列美脲原料药提高了50.39倍。结论体外释放实验表明HP-β-CD格列美脲片相比普通格列美脲片的释放度有显著提高,响应面法优化格列美脲包合物处方可行,为格列美脲片进一步开发奠定了良好的理论基础。

抗金黄色葡萄球菌的新策略

金黄色葡萄球菌通过分泌丰富的毒力分子用来阻断人体免疫反应,从而造成严重感染。目前金黄色葡萄球菌对于抗生素的耐药问题也日益严重。本文综述了金黄色葡萄球菌的致病机制和毒性分子(杀白细胞素)的分子结构,介绍了一种能够阻断其毒性分子的小分子蛋白(centyrins),这种小分子蛋白已成为对抗金黄色葡萄球菌最新治疗策略。

玫瑰产色链霉菌P450酶体外催化合成16α-羟基泼尼松龙

以泼尼松龙为原料,利用玫瑰产色链霉菌(Streptomyces roseochromogenes)SIIA-1902的胞内细胞色素P450s,通过电子转移配偶体(玫瑰氧还蛋白和玫瑰红素氧还蛋白)将泼尼松龙转化为16α-羟基泼尼松龙。结果表明,P450s可以利用过氧化物以"过氧化物分流"途径完成该转化过程,从而取代天然氧还原途径。经硫酸铵沉淀法浓缩后的P450s酶液在1.0mmol/LNaIO4的支持下发生过氧化物分流反应,16α-羟基泼尼松龙的产量为23.3 mg/L,泼尼松龙转化率为12.9%;在1.0 mmol/L H2O2的支持下,产量升高到45.3 mg/L,泼尼松龙转化率提高到25.1%。对过氧化物分流反应条件进行了进一步优化。当泼尼松龙浓度为0.5mmol/L,羟丙基环糊精的质量浓度为0.2 g/L,n(泼尼松龙)∶n(过氧化氢)=1∶3时,在pH 7.2、30℃下反应24 h,16α-羟基泼尼松龙的产量为64.3 mg/L,泼尼松龙转化率为35.7%。

利奈唑胺原料药中R型异构体的手性HPLC分析

目的建立高效液相色谱法直接拆分利奈唑胺和其R型异构体的方法。采用Chiralpak AD—H手性柱（250mm×4．6mm，5μm），方法以正己烷：异丙醇：三乙胺（75：25：0．05，v／v）为流动相，流速为1．0mL／min，检测波长254nm。结果利奈唑胺与（R）一利奈唑胺的分离度达2．5，（R）-利奈唑胺的检出限为4．2μg，在0．25-4．0mg／L浓度范围内线性关系良好；加样回收率为90％～102．8％，RSD小于2．0％。结论本方法操作简便，灵敏，专属性强，可作为利奈唑胺原料药中（R）异构体杂质限量的控制方法。

阿托伐他汀关键中间体L1二胺杂质的合成及结构鉴定

本文以阿托伐他汀中间体L1为起始原料,经皂化,酸化,氯甲酸乙酯活化,缩合四步反应合成L1二胺杂质。对优化L1合成工艺具有重要意义。目标化合物经IR、1H-NMR、13C-NMR、ESI-Ms确证。

LC-MS/MS法测定大鼠脑组织中奥拉西坦的浓度

目的:建立一种简便、快速的LC-MS/MS法测定大鼠脑组织中奥拉西坦的浓度,并对SD大鼠静脉注射奥拉西坦后的脑组织分布进行研究。方法:SD大鼠脑组织样品用0.9%氯化钠溶液匀浆后,以吡拉西坦为内标,用乙腈沉淀蛋白,采用LC-MS/MS系统进行分离和测定。色谱柱为Agilent Poroshell 120 SB-C_(18)柱(100 mm×4.6 mm,2.7μm),流动相为30%甲醇-70%水(含10 mmol·L^(-1)甲酸铵,0.1%甲酸),流速为0.2 mL·min^(-1),柱温为30℃。质谱条件:电喷雾离子源(ESI),正离子模式,多反应离子监测(MRM),检测离子为奥拉西坦m/z 158.6→113.6,内标吡拉西坦m/z 142.6→125.4。SD大鼠分别单次静脉注射奥拉西坦500、1 000、2 000 mg·kg^(-1),于不同时间点分别采集脑组织,测定脑组织中奥拉西坦的浓度。结果:SD大鼠脑组织匀浆液质量浓度在1.0~100.0μg·mL^(-1)范围内线性关系良好,定量下限为1.0μg·mL^(-1),批内和批间精密度RSD均小于5.7%,准确度为96.3%~105.2%。大鼠分别单次静脉注射500、1 000、2 000 mg·kg^(-1) 3个剂量的奥拉西坦后,主要药动学参数t1/2分别为(3.56±0.27)h、(3.36±0.49)h、(3.60±0.79)h,C_(max)分别为(24.78±16.06)μg·g^(-1)、(50.79±25.92)μg·g^(-1)、(82.21±19.33)μg·g^(-1),MRT0-t分别为(2.54±0.02)h、(2.38±0.30)h、(2.57±0.08)h,AUC0-t分别为(48.59±10.92)μg·h·g^(-1)、(94.54±9.30)μg·h·g^(-1)、(201.35±18.87)μg·h·g^(-1)。结论:本测定方法可用于大鼠奥拉西坦药代动力学在脑组织中的分布研究;大鼠分别单次静脉注射3个剂量的奥拉西坦后,奥拉西坦进入脑组织的时间较快,浓度较高,持续时间较长,利于发挥活化和改善脑组织功能的作用。

适于规模放大的姜黄素脂质立方液晶制备工艺探讨

目的:制备姜黄素立方液晶,确定其适于规模放大的最佳处方配比及制备工艺条件。方法:采用Bottom-up法制备姜黄素立方液晶,制得的样品用透析法和HPLC法测定其包封率。通过单因素试验和正交试验设计确定姜黄素立方液晶的处方,然后考察搅拌时间、超声功率等工艺因素对立方液晶包封率的影响,确定适于规模放大的立方液晶制备工艺。结果:按最佳处方及制备工艺规模放大后制得的姜黄素立方液晶的包封率达(86±2)%。结论:确定的姜黄素立方液晶的制备工艺及处方合理可靠,适于规模放大。