c-fos反义寡核苷酸激活caspase 3诱导人肝癌HepG2细胞凋亡的研究

目的探讨c-fos反义探针诱导人肝癌HepG2细胞凋亡以及caspase3在其中的作用。方法人肝癌HepG2细胞分为3组,①对照组:加生理盐水10μl;②c-fos正义寡核苷酸(SO)处理组:加入SO10μl(5μg/μl);③c-fos反义寡核苷酸(ASO)处理组:加入ASO10μl(5μg/μl)。各组细胞再培养1h后进行后续实验。采用Hoechst 33258染色检测细胞凋亡情况,并分别运用实时荧光定量PCR和Western blotting检测caspase 3在mRNA和蛋白水平的表达变化。结果Hoechst 33258细胞染色显示,对照组和SO处理组的细胞核为弥散均匀的圆形或椭圆形荧光,而ASO处理组的细胞核或细胞质内可见致密浓染的颗粒、新月体或环状荧光,核固缩,部分切片可见核碎裂。PCR和Western blotting检测显示,与对照组和SO处理相比,ASO处理组caspase 3 mRNA和蛋白的表达均明显上调。结论c-fos反义探针可以诱导人肝癌HepG2细胞凋亡,且caspase 3参与了此过程。