选择素的放射响应及L选择素的调控

放射生物剂量计的研究一直是放射生物学领域中的一个热点及难点,核事故后对放射伤员进行快速、准确的诊断是事故救援及后续正确救治的关键,建立快速、高通量的放射生物剂量诊断方法具有重要的意义。外周血是临床检验中方便实用的检材,血液中蛋白质检验方法多样,易实现高通量、快速检测。在现阶段的研究中发现外周血中P选择素和L选择素均具有较好的放射响应,但是在放射医学领域关于选择素家族分子的研究尚未深入。本文对放射医学领域中选择素家族的研究现状进行总结,并对L选择素的调控机制进行简单综述,期望能为放射生物剂量计的研究引入新的分子,为将来放射损伤后L选择素的调控机制研究提供帮助。

人胃癌细胞系SGC-7901放射敏感性及异质性的研究

目的研究人胃癌细胞系ＳＧＣ７９０１及其克隆亚系的放射敏感性。方法ＳＧＣ７９０１细胞株及其两个克隆亚系（大集落、小集落）的细胞用８ＭｅＶ直线加速器电子束以不同剂量照射，分别经４８小时、７２小时培养及集落培养后，计数并得出各组存活曲线。结果１．两个克隆亚系之间的Ｄ０值有显著差异（Ｐ＜００５）；２．大集落亚系与ＳＧＣ母系之间在集落形成实验中，其Ｄ０值有差异（Ｐ＜００５）。结论ＳＧＣ７９０１细胞系及其克隆亚系对放射的敏感性存在着异质性。

基于拉曼光谱的鼻咽癌细胞株总蛋白放射敏感性研究

本文以鼻咽癌细胞株CNE2为放射敏感性的研究对象,经不同剂量X射线照射及不同时间培养后分别提取总蛋白,用共聚焦显微拉曼光谱仪检测其拉曼光谱。统计分析表明:被测样品的拉曼光谱中观察到一些可以归属于蛋白质物质的较为明显的基团频率振动峰;不同剂量的X射线照射后,总蛋白质的平均拉曼光谱与对照组谱形基本一致,但与对照组间的光谱存在着对应峰信号强度的不同。实验提示:照射后谱峰强度的增大或减小,提示着相关物质含量有所改变。分析照射后癌细胞总蛋白拉曼光谱的变化情况,结合数学统计方法,以探寻放射敏感性的特征拉曼标志,可以作为研究肿瘤放射敏感性的手段之一。

潘生丁、凡拉帕米对逆转K 562/ADM耐药性的研究

本研究结果提示:潘生丁、凡拉帕米均有增强ADM和VCR对K562和K562/ADM的作用,在ADM为0.01μg/ml时,对K562的抑制率为35.9％,当同时含有潘生丁6.25μg/ml～50.0μg/ml或凡拉帕米1.8μg/ml～14.4μg/ml时,使细胞的抑制率可分别再提高20.8％～34.50％和7.7％～29.5％,而对K562/ADM,潘生丁和凡拉帕米分别使细胞抑制率提高21.6％～70.9％和40.3％～61.1％。在VCR为0.1μg/ml时,对K562的抑制率为58.4％,当含有潘生丁或凡拉帕米时,抑制率可分别提高19.1％～24.9％和18.7％～22.6％,而对K562/ADM,在VCR8.0μg/ml时,抑制率为18.8％,当含有潘生丁或凡拉帕米时,抑制率可分别提高32.5％～45.1％和23.8％～35.4％。从上述结果可看出,潘生丁或凡拉帕米在逆转K562/ADM的耐药性是有益的。

氧化砷诱导人小细胞肺癌细胞凋亡的研究

目的 研究砷剂 (As2 O3 )对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用以及干扰素 (IFNα 2b)对As2 O3 作用的影响。方法 采用DNA电泳、TUNEL原位末端标记和免疫细胞化学染色检测不同浓度As2 O3 作用不同时间对人小细胞肺癌细胞凋亡诱导作用及相关基因蛋白的表达。结果 在一定的浓度范围内 ,As2 O3 可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡 ,并且随浓度的升高和作用时间的延长 ,凋亡细胞数增加 ,相关基因蛋白Bcl 2、PCNA表达降低。联合使用IFNα 2b可增强凋亡诱导作用。结论 As2 O3 可诱导人小细胞肺癌细胞凋亡 ,且与药物浓度和作用时间有关。IFNα

维甲酸逆转 K526/ADM 耐药细胞株耐药性的研究

维甲酸逆转Ｋ５２６／ＡＤＭ耐药细胞株耐药性的研究沈世人王衡邹长木炎苏颖高频关键词维甲酸Ｋ５６２／ＡＤＭ细胞多药耐药逆转中图号Ｒ７３－３６肿瘤患者反复用药引起耐药性的产生是治疗失败的重要原因，研究如何克服耐药性是提高癌症化疗效果的关键之一。本实验结果提...

鼻咽癌放射抗拒细胞株CNE-2(R743)的建立及其差异表达蛋白的初步分析

目的建立放射抗拒的人鼻咽癌(NPC)细胞株,探讨NPC细胞的放射抗拒机制。方法应用X射线反复照射NPC CNE-2细胞,总剂量为51Gy,筛选出放射抗拒的细胞株CNE-2(R743)。采用克隆形成实验测定细胞的放射敏感性,流式细胞术检测细胞周期特征;采用双向凝胶电泳结合质谱分析法鉴定差异表达蛋白。结果与CNE-2细胞相比,CNE-2(R743)细胞显示出更强的放射抗性,CNE-2(R743)细胞的放射抗性(存活分数SF2)是其亲本细胞CNE-2的1.49倍(P<0.05)。CNE-2(R743)细胞周期分布中,S期比例较其亲本CNE-2细胞明显增高(P<0.01),而G0/G1和G2/M期比例则下降(P<0.01)。与CNE-2相比,CNE-2(R743)细胞存在24个差异表达较显著的蛋白质,其中14个上调,10个下调。结论经辐射诱导所建立的细胞株CNE-2(R743)比其亲本对射线更加抗拒,并显示与亲本不同的细胞周期特征。存在与亲本差异表达的蛋白质,这些蛋白质可能与NPC细胞的放射敏感性相关。

SGC-7901细胞株中不同集落生物学特性的观察

对于肿瘤的转移及其细胞生物学特性的研宄,使人们认识到了肿瘤的异质性。本文报导对人胃癌细胞株(SGC—7901)中不同集落的生长曲线及其药物敏感性的测试,结果为同一细胞株中的两个不同的集落虽然其增殖状况相仿,但对几种药物的敏感性却有很大的差异。

肝癌组织端粒酶活性表达及DNA含量的研究

目的 研究肝癌组织、癌旁组织端粒酶活性的表达及DNA含量的变化。方法 取肝癌手术标本 30例 ,每例均取癌组织、癌旁肝组织及外侧切缘肝组织。采用PCR -ELISA法检测其端粒酶的活性 ;流式细胞仪技术检测细胞DNA含量 ,DNA倍体及细胞分期。结果 肝癌组织端粒酶阳性率为 76 7% (2 3 30 ) ,癌旁组织端粒酶阳性率为 16 7% (5 30 ) ,外侧切缘肝组织无阳性 (0 30 ) ,肝癌组织与癌旁组织及外侧切缘肝组织端粒酶的表达有显著差异 (P <0 0 1)。癌旁组织与外侧切缘肝组织端粒酶的表达也有显著差异 (P <0 0 5 )。肝癌组织与外侧切缘肝组织DNA异倍体表达率有显著差异 (P <0 0 5 )。端粒酶阳性及阴性组间DNA异倍体率、DNA指数 (DI)、S期细胞比率 (SPF) ,细胞增殖指数 (PI)未见明显变化。结论 端粒酶与肿瘤的恶性行为存在一定的密切关系 ,其作为肝癌诊断的分子标志具有一定的价值。同时检测DNA倍体类型可进一步提高其临床参考价值。

三氧化二砷对人肝癌细胞作用的研究

目的 :应用体外培养的肝癌细胞株 (SMMC 772 1)观察砷剂 (As2 O3)的凋亡诱导作用。方法 :采用MTT法检测As2 O3对肝癌细胞增殖的影响 ,DNA电泳及流式细胞仪检测不同浓度As2 O3作用不同时间对肝癌细胞的凋亡诱导作用及细胞周期的影响。结果 :As2 O3抑制肝癌细胞的增殖并具有剂量 -时效关系 ;As2 O3可使肝癌细胞周期改变 ,与浓度有关 ,与作用时间未见明显关系 ;As2 O3诱导肝癌细胞发生凋亡 ,并与浓度、时间有关。结论 :As2 O3能抑制肝癌细胞增殖 ,改变肝癌细胞周期 。

^3H—TdR放射自显影在人肝癌SMMC7721细胞药物敏感性试验中的应用

用＾３Ｈ－ｄＲ掺入放射自显影法测定人肝癌ＳＭＭＣ７７２１细胞对抗癌药ＤＤＰ、ＡＤＭ、５－ＦＵ的浓度依赖性，三者均有良好的线性关系。ｒ〉ｒ．０５，ＩＣ５０分别为２．５４、１．２３、６９．７（μｇ／ｍｌ），而集落培养法，除ＤＤＰｒ〉ｒ．０５外，ＡＤＭ、５－ＦＵ均相差不显著。从实验结果看，＾３Ｈ－ＴｄＲ放射自显影法的敏感性和重复性均优于集落培养法。

携带人可溶性TRAIL基因的重组腺病毒在肺癌细胞中的转染效率及表达特性研究

目的研究重组腺病毒感染肺腺癌细胞A549的转染效率及重组腺病毒介导的人可溶性肿瘤坏死因子相关诱导凋亡配体(hTRAIL95-281)基因的体外表达。方法用不同感染滴度(MOI)(0-10 000 VP/cell)的重组腺病毒Ad-CMV-EGFP转染A549细胞后48 h收集细胞,经流式细胞仪检测其转染效率,并在共聚焦荧光显微镜下观察绿色荧光蛋白表达;用MOI为5 000 VP/cell的Ad-CMV-EGFP感染肿瘤细胞后不同时间(24 h、48 h、72 h和96 h)收集细胞,经流式细胞仪检测其转染效率;用重组腺病毒Ad-CMV-hTRAIL95-281感染293T细胞后不同时间收集培养物用ELISA方法检测上清中的TRAIL表达。结果重组腺病毒载体对A549细胞的转染效率和绿色荧光蛋白表达在一定范围内随着MOI的增加而增高,MOI为5 000 VP/cell时转染效率达峰值,MOI为10 000 VP/cell时转染效率反而降低。重组腺病毒转染A549细胞后72 h内转染效率随时间的变化而增高,峰值为98%,96 h有所降低(P<0.05)。转染重组腺病毒Ad-CMV-hTRAIL95-281的293T细胞在转染后24 h表达量最高(P<0.001),达到131.45 pg/ml,48 h时TRAIL蛋白表达量明显降低(P<0.01),72小时也有继续降低的趋势。结论重组腺病毒在适宜的MOI值下,在A549细胞中96小时内均有较高的转染效率,且重组腺病毒介导的可溶性hTRAIL基因在体外能够有效表达。

X线辐射对免疫活性细胞的生物学效应

对用X线一次性照射人外周血淋巴细胞和用人脾细胞培养的LAK细胞所产生的生物学效应进行报道.实验结果表明:在200OcGy剂量范围内,X线对人外周血淋巴细胞短期存活率无影响,而对淋转率、IL—2分泌细胞的出现频率和LAK细胞杀伤活性均有显著影响.随着照射剂量增大,以上3个参数均呈线性降低.说明X线辐射对淋巴细胞的影响主要发生在与DNA代谢有直接关系的生命活动中;另外,小剂量辐射对免疫反应之一淋转有促进作用.

带前导肽的人锰超氧化物歧化酶抗顺铂诱导的肾损伤效应

目的 探讨前导肽的融合对人锰超氧化物歧化酶(SOD2)结构以及抗顺铂(DDP)诱导的肾损伤效应。方法 通过结构预测和SOD比活力测定分析线粒体靶向序列(MTS)对SOD2构效的影响;建立昆明(KM)小鼠DDP损伤模型,以阿米福汀(AMFT)为阳性对照,测定小鼠肾功能、肾脏指数、肾脏抗氧化能力,同时观察肾脏表观及病理变化,以评估MTS-SOD2抗DDP诱导的肾损伤效应。结果 MTS前导肽对SOD2的二三级结构有一定影响,但也使MTS-SOD2蛋白的比活力提高。预给予中剂量MTS-SOD2(0.84 mg/kg)可以使损伤鼠肾脏丙二醛(MDA)水平显著降低,SOD活力和总抗氧化能力(T-AOC)显著增加,进而减少肾脏病理损伤,维持肾功能,整体效果与200 mg/kg AMFT相当甚至优于后者。结论 MTS前导肽既增强了SOD2的活性,又使其因具有跨膜功能而发挥优异的抗DDP诱导的肾损伤效应。

snoRNA在电离辐射诱导的DNA损伤中的作用及研究进展

核仁小RNA(small nucleolus RNA,snoRNA)是一类在真核生物中普遍存在的非编码RNA,根据其结构特征,可分为两大类:box C/D snoRNA和box H/ACA snoRNA,分别介导RNA 2′⁃O⁃甲基化和假尿嘧啶化修饰。近期研究发现,snoRNA还影响mRNA前体(pre⁃mRNA)的可变剪接,能够通过生成miRNA来介导基因沉默,并通过与蛋白质相互作用调节其功能活性。在电离辐射的生物效应中,DNA损伤与修复过程是至关重要的生物学基础。然而,目前关于snoRNA在电离辐射引起的DNA损伤中的作用的研究还相当有限。本综述旨在概述snoRNA的生物学功能及其在电离辐射诱导的DNA损伤修复中可能的调控角色,以期为探究snoRNA的功能及机制提供新思路。

三氧化二砷抑制肝癌细胞端粒酶表达及诱导细胞凋亡作用

目的:观察三氧化二砷对体外培养的人肝癌细胞株细胞端粒酶表达和细胞生长抑制的影响及诱导细胞凋亡的作用,探讨三氧化二砷的抗肿瘤作用及机制.方法:采用噻唑蓝比色分析法(MTT法),流式细胞分析,原位杂交方法以及TUNEL原位末端标记法观察和检测了不同浓度的三氧化二砷对人肝癌细胞株(SMMC-7721)细胞的增生,细胞DNA含量的分布,细胞端粒酶表达的影响及细胞凋亡的诱导作用.结果:20,5,5μmol/L三氧化二砷在24,48,72h时抑制率分别为22.0%,25.7%,32.0%,均能明显抑制人肝癌细胞株细胞的增生(单侧置信区间为10.1,23.7,18.0,P<0.05).流式细胞分析显示加药组G0/G1期细胞比例减少,S期细胞所占比例增高.随着药物浓度的增加细胞端粒酶的表达下降,而凋亡细胞数增加.结论:三氧化二砷能抑制人肝癌细胞增生,其抑制作用具有时间-计量效应关系,并能抑制肝癌细胞端粒酶的表达及诱导肝癌细胞凋亡.

口腔鳞癌中survivin、cyclinD1和p53基因的表达及其相关性

目的:探讨survivin、cyclinD1和p53基因蛋白在口腔鳞癌中的表达及其相互关系。方法:应用免疫组化SP法检测95例口腔鳞癌组织和50例正常口腔黏膜组织中survivin、cyclinD1和p53蛋白的表达。结果:survivin、cyclinD1和p53在口腔鳞癌与正常口腔黏膜组织之间的差异均有统计学意义(P<0.05);在口腔鳞癌中,Survivin和CyclinD1蛋白的过表达均与临床分期及淋巴结转移有关(P<0.05或P<0.01),p53过表达与组织分化程度及临床分期有关(P<0.05或P<0.01);survivin的过表达与cyelin D1及p53蛋白表达均呈正相关(r=0.628,0.829),cyclin D1蛋白的过表达与p53蛋白表达也呈正相关。结论:survivin、cyclinD1和p53基因在口腔鳞癌的发生、发展中起着不同程度的作用,三者之间可能具有协同作用。

三氧化二砷及干扰素联用对K562及K562/ADM耐药细胞系的作用

目的 研究三氧化二砷 (As2 O3)对 K5 6 2及其耐药细胞 K5 6 2 / ADM细胞株几种耐药机制的作用 ,以及干扰素 (IFNα- 2 b)与之联用的效应。方法 采用免疫细胞化学染色及 TU NEL 原位末端标记检测不同浓度 As2 O3作用不同时间或与 IFNα- 2 b联用 ,对 K5 6 2及 K5 6 2 / ADM细胞相关耐药基因蛋白 (P- gp、GST-π、Bcl- 2 )表达的影响及凋亡诱导作用。 结果 K5 6 2、K5 6 2 / ADM细胞表面 P- gp蛋白表达无明显改变 ;As2 O3(5 ,10 ,2 0 μm ol/ m L)作用 72 h可降低 K5 6 2、K5 6 2 / ADM细胞 GST- π的表达 ,与对照组比较 P<0 .0 5 ;As2 O3抑制 K5 6 2、K5 6 2 / ADM细胞 Bcl- 2蛋白的表达 ,诱导细胞凋亡 ,并有计量时间效应 ;IFNα- 2 b与 As2 O3联用可增强对 K5 6 2细胞的作用 ,对 K5 6 2 / ADM细胞未见明显增强效应。 结论 As2 O3具有抑制 K5 6 2、K5 6 2 / ADM细胞 GST- π、Bcl- 2蛋白的表达及诱导细胞凋亡作用 ;对 P- gp蛋白表达无明显影响 ;IFNα- 2 b可增强其对 K5 6

鼻咽癌细胞放射敏感性的比较蛋白质组学研究

目的探讨与鼻咽癌细胞放射敏感性相关的并可能预测鼻咽癌细胞放射敏感性的蛋白质。方法以人鼻咽癌细胞株CNE-2诱导建立放射抗拒的鼻咽癌细胞株CNE-2（R743），通过克隆形成实验及流式细胞术检测以比较CNE-2和CNE-2（R743）细胞的放射敏感性及细胞周期的特征。提取细胞总蛋白质，进行双向凝胶电泳，ImageMaster7．0图像分析软件分析图谱以识别差异蛋白质点，MALDI—TOF／TOF肽质量指纹图谱分析，蛋白质质谱数据库搜索鉴定差异蛋白。应用RT—PCR和Western blot验证2种细胞中相关差异蛋白的表达。结果得到7个差异表达较显著的蛋白质，与CNE．2相比较，CNE-2（R743）细胞中6个上调，1个下调。Western blot及RT-PCR证实膜联蛋白A2、原肌球蛋白及糖调节蛋白78在CNE-2（R743）的表达均上调（t=24．22、24．20和29．19，P〈0．05），与蛋白质组学结果一致。结论不同放射敏感性鼻咽癌细胞存在差异表达的蛋白质，其中膜联蛋白A2、原肌球蛋白及糖调节蛋白78有可能成为预测鼻咽癌细胞放射敏感性的候选生物标志物。