宏基因组DNA分析技术在传统发酵乳制品微生物多样性研究中的应用

本文对近几年广泛应用于传统发酵乳制品微生物多样性分析的宏基因组DNA分析技术进行了综述,尤其是对基于16S r RNA基因序列的分子标记技术,如:变性梯度凝胶电泳、限制性片段长度多态性分析、末端标记限制片段长度多态性分析、单链构象多态性等以及这些方法的研究进展。

不同地区酸马奶中乳杆菌的分离及其生物学特性的研究

从内蒙古锡林浩特市(16份样品)和蒙古国(5份样品)以传统方法制作酸马奶的牧民家庭中共采集到21份酸马奶样品;从蒙古国样品采集的样品中共分离到30株乳杆菌。分别鉴定为Lb.casei(1株)、Lb.plantarum(9株)和Lb.acidophilusGroup(20株)的菌株;从内蒙古采集的样品中的共分离到50株乳杆菌,分别为Lb.casei(16株)、Lb.plantarum(6株)和Lb.acidophilusGroup(10株)、Lb.paracaseisubsp.paracase(3株)、Lb.coryniformissub-sp.coryniformis(5株)、Lb.curvatus(1株)、Lb.kefiranofaciens(2株)和异型乳酸发酵的Lb.fermentum(1株)、Weis-sellakandleri(1株)、Weissellaparamesenteroides(1株)以及未明确的Lactobacillussp.(2株)等。结果表明,蒙古国酸马奶样品中以高温性Lb.acidophilusGroup的菌株分离率较高,而内蒙古酸马奶样品中以中温性Lb.casei菌株最多,其次为Lb.acidophilusGroup的菌株。

新疆维吾尔自治区酸马奶化学组成分与微生物学分析

对新疆不同地区的28个家庭自然发酵的酸马奶的化学成分及微生物组成进行了分析。结果如下:脂肪质量浓度平均为(1.87±0.33)g/100mL,蛋白质质量浓度平均为(2.07±0.29)g/100mL,乳糖质量浓度平均为(2.69±0.63)g/100mL,灰分质量浓度平均为(0.28±0.05)g/100mL,钙质量浓度平均为(72.25±13.46)mg/100mL,磷质量浓度平均为(52.23±11.35)mg/100mL。pH值平均为3.89±0.27,酸度平均为(106.57±43.21)oT,乳酸质量浓度平均为(9.10±3.56)g/L,乙酸质量浓度平均为(1.18±0.50)g/L,柠檬酸质量浓度平均为(0.06±0.06)g/L,乙醇质量浓度平均为(14.52±3.79)g/L。28个酸马奶样品中25个乳酸菌数在(1.07￣9.70)×107mL-1之间,1个样品的乳酸菌数为1.38×108mL-1,2个样品的乳酸菌数为2.06×106mL-1和7.50×106mL-1;4个样品的酵母菌数在(3.12￣9.05)×104mL-1之间,14个样品酵母菌数在(1.60￣9.00)×105mL-1之间,10个样品的酵母菌数在(1.04￣2.72)×106mL-1之间。酸马奶中乳酸菌数要较酵母菌数高一个对数级。

益生乳酸菌Lactobacillus casei Zhang和Lactobacillus plantarum P8对全价饲料pH及微生物类群变化的研究

研究了益生乳酸菌干酪乳杆菌Zhang(Lactobacillus casei Zhang)和植物乳杆菌P8(Lactobacillus planta-rum P8)对全价饲料pH及微生物类群变化的影响。分别将L.casei Zhang、L.plantarum P8单一菌种及复合菌种(11)以6.30 lg cfu/g的接种总量发酵全价饲料,测定25℃10 d发酵期间全价饲料pH和微生物类群的变化,应用选择培养基测定发酵饲料中的乳酸菌及杂菌(酵母菌、霉菌、大肠菌群、芽胞杆菌和梭状芽胞杆菌)的动态变化,应用RT-PCR技术测定试验组中的L.casei Zhang和L.plantarum P8的动态变化。结果显示,试验组pH下降显著,发酵10 d时,L.casei Zhang、L.plantarum P8单一菌种和复合菌种发酵饲料的pH分别为4.23、4.24和4.22,显著低于对照组(P<0.05);L.casei Zhang、L.plantarum P8单一菌种和复合菌种发酵饲料中的L.casei Zhang、L.plantarum P8活菌数分别为8.91、8.89、6.58和8.69 lg cfu/g。发酵期间,试验组中酵母菌、霉菌、大肠菌群、芽胞杆菌及梭状芽胞杆菌活菌数显著低于对照组(P<0.05),其中L.plantarum P8单一菌种发酵和复合菌种发酵对杂菌抑制效果显著优于L.casei Zhang单一菌种发酵(P<0.05)。结果表明,全价饲料经L.casei Zhang、L.plantarum P8发酵可以显著降低其pH,抑制其中杂菌的生长,同时L.casei Zhang、L.plantarum P8在饲料中具有良好的稳定性。

类开菲尔粒中乳酸菌和酵母菌的分离鉴定及生物学特性

从采自内蒙古锡林高勒河流域牧区的类Kefir粒中分离出8株乳酸球菌和6株酵母菌,通过对其形态、培养特性、生物学特性的研究,鉴定乳酸球菌中,2株属于明串珠菌属,3株属于片球菌属,3株属于肠球菌;酵母菌中4株属于克鲁维酵母属,2株属于酒香酵母属。

乳制品中明串珠菌的分离鉴定及其生物学特性研究

对内蒙古自治区呼伦贝尔市牧区98个乳样中的明串珠菌进行了分离及生物学特性研究。共分离到明串珠菌3株,分别属于乳明串珠菌(EW21),肠膜明串珠菌葡聚糖亚种(EW24-2)和肠膜明串珠菌肠膜亚种(CB8-1)。它们均可在pH=4.8的环境中生长,且菌株EW24-2和CB8-1可利用蔗糖生成葡聚糖。

乳及乳制品中抗生素类兽药残留快速检测技术

抗生素等兽药残留物分析是个十分复杂的技术问题,介绍了按不同目的和要求对抗生素等兽药残留物进行的分级检测的策略,并对目前国内外正在应用或开发的快速检测技术进行了介绍。

喂饲Lactobacillus casei Zhang对大鼠体内脂质代谢的影响

从内蒙古锡林郭勒盟正蓝旗传统酸马奶中分离筛选到1株降胆固醇功效较好的乳杆菌Lactobacillus．casei Zhang。用Lb．casei Zhang灌胃高脂血症模型大鼠研究其对血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)的影响。结果表明:灌胃14 d后,Lb．casei Zhang热致死菌体组大鼠血清中TC浓度较对照组显著降低(P<0．01),TG浓度虽有降低但不呈显著性,同时HDL-C浓度显著升高(P<0．05);Lb．casei Zhang活菌体组大鼠血清中TC、TG浓度均有所降低,HDL-C浓度升高,但未呈显著性。灌胃28 d后,Lb．casei Zhang热致死菌体组大鼠血清中TC浓度较对照组显著降低(P<0．05),Lb．casei Zhang活菌体组TC浓度及两组TG、LDL-C浓度降低,但差异不显著,HDL-C未发生明显的改变。Lb．casei Zhang热致死菌体组和活菌体组粪便中的胆酸含量均增高,但只有热致死菌体组差异显著(P<0．05)。通过实验表明Lb．casei Zhang通过菌体对胆固醇的吸收吸附及减少肝肠循环中的胆酸来达到降血脂的功效。

酸马奶中乳杆菌Lb.casei.Zhang和ZL12-1的16S rDNA基因序列及聚类分析

利用遗传学方法对分离自内蒙古锡林郭勒盟牧区采集的酸马奶样品中的乳杆菌Lb.casei.Zhang和ZL12-1进行16SrDNA基因扩增与测序,并将结果与同属的乳杆菌作同源性分析,建立系统发育树,以求更准确地确定其归属,为益生菌的筛选奠定基础。结果表明,菌株Lb.casei.Zhang与标准菌株Lb.caseiATCC334T的同源性为100%,菌株ZL12-1与标准菌株Lb.gallinarumATCC33199T的同源性为98%。结合系统发育树及16SrDNA的部分序列分析结果,将Lb.casei.Zhang判定为Lb.caseisubsp.casei,ZL12-1鉴定为Lb.gallinarum,这与传统分类方法所得鉴定结果一致。

不同泌乳时间内内蒙古阿拉善双峰驼驼乳化学组成变化分析

本研究对10匹内蒙古阿拉善双峰驼驼乳的化学组成进行了分析。结果表明,第1次所挤初乳中总干物质为20.16%,在2～30d内变化范围为17.42%～18.22%,到90d下降为14.31%。第1次所挤初乳中蛋白质为14.23%,12h后下降到9.63%,之后进一步下降,在7、15、30及90d分别为7.40%、5.32%、4.87%和3.55%。乳糖含量在1～90d泌乳期内变化较小,为4.24%～4.44%。第1次所挤初乳脂肪含量为0.27%,到24h增加到4.18%,30d时为6.91%,90d又下降到5.65%。第1次所挤初乳中灰分含量为1.22%,到12h下降到0.99%,在90d泌乳期内稳定在0.82%～0.98%范围内。第1次所挤的初乳中,WPN占总氮58.74%,CN占总氮38.57%,NPN仅占总氮的2.69%;24h,WPN、CN及NPN分别占总氮的32.54%、65.08%及2.38%。随泌乳进行,驼乳氮分布中CN逐渐升高,WPN逐渐降低,2～90dNPN占总氮变化较小,为5.26%～7.89%。驼乳中C12:0～C18:0偶数长链饱和脂肪酸占总脂肪酸的57.54%,其中C16:0、C18:0及C12:0分别占总脂肪酸的30.12%、15.15%和11.49%,C18:1～C18:3长链多不饱和脂肪酸占总脂肪酸组成的30.25%,其中以C18:1脂肪酸为主,为26.05%。第1次所挤的初乳中钙、磷含量最高,分别为222.58mg/100g和153.74mg/100g;钙、磷、钠、钾及氯在3～90d变化范围分别在154.57～186.87、116.82～141.67、59.5～79.5、150.0～191.0和80.9～152.0mg/100g。初乳中VA、VC含量低于常乳,VE、VB1高于常乳,VD、VB2及VB6与常乳相近。90d驼乳中VA、VE、VB1、VB2、VB6、VC和VD分别为0.97mg/L和1.45、0.124、1.24、0.54和29.60mg/L和692IU/L。

驼乳医疗保健作用的研究进展

本文综述了驼乳治疗炎症、肾病、辅助治疗糖尿病及抑制肿瘤增长等作用;展望了驼乳医疗保健价值的发展前景。

酸马奶中乳杆菌MG2-1株的抗氧化作用研究

应用分离自酸马奶,并经过耐酸性实验、人工胃肠消化液中存活能力筛选的L.acidophilusMG2-1,制备成热致死菌体和活菌制剂后灌服大鼠至28d,测定大鼠肝脏组织匀浆和血清SOD,GSH-PX活力和MDA含量。结果表明,活菌制剂能够使大鼠肝脏组织匀浆中SOD活力和GSH-PX活力活力均明显提高,与对照组比较分别达到显著(P<0.05)和极显著(P<0.01)水平;大鼠血清中GSH-PX活力显著提高(P<0.05)。L.acidophilusMG2-1活菌制剂能够显著地降低大鼠血液和肝脏组织匀浆中MDA含量(P<0.05)。L.acidophilusMG2-1活菌制剂的抗氧化作用优于热致死菌体制剂。本研究证明来源于传统酸马奶的乳杆菌具有一定的抗氧化生理活性作用。

乳杆菌Lb.casei.Zhang对小鼠血清中细胞因子水平的影响

目的:观察及评价乳杆菌Lb.caseiZhang对小鼠血清中IFN-γ、IL-12、IL-1α、TNF-α水平的影响。方法:应用分离自酸马奶,并经过耐酸性实验、人工胃肠消化液中存活能力筛选的L.caseiZhang,制备成热致死菌体和活菌制剂各分成高、中、低三个剂量组灌服小鼠至15d,采用ELISA法检测血清中IFN-γ、IL-12、IL-1α、TNF-α的含量。结果:活菌制剂高、中剂量组小鼠血清中IFN-γ、IL-12含量明显高于对照组(p<0.05),IL-1α、TNF-α含量明显低于对照组(p<0.01);灭活菌制剂对细胞因子的影响与对照相比无显著差异。结论:Lb.caseiZhang活菌制剂的免疫调节作用优于热致死菌体制剂。活菌制剂对小鼠的细胞免疫功能产生了多方面的、有利于机体免疫功能状态的调节作用。

干酪乳杆菌干酪亚种Lactobacillus casei subsp.casei SY_(13)对衰老模型小鼠的抗氧化作用

【目的】利用一株经体外筛选具有较强抗氧化活性的干酪乳杆菌干酪亚种(Lactobacillus casei subsp.casei)SY13活菌制剂和灭活制剂研究D-半乳糖所致衰老模型小鼠体内抗氧化能力。【方法】采用SY13活菌制剂和灭活制剂饲喂由D-半乳糖连续皮下注射诱导的亚急性衰老模型小鼠,以各组小鼠血清和肝组织匀浆中超氧化物岐化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活力、总抗氧化能力(T-AOC)及脂质过氧化产物丙二醛(MDA)的含量为指标,全面评价其在小鼠体内的抗氧化能力。【结果】Lactobacillus casei subsp.casei SY13活菌制剂高、中剂量组(20、10mL·kg-1)能降低连续6周注射D-半乳糖诱发的衰老小鼠血清和肝脏组织中的MDA含量,同时提高血清和肝脏组织中GSH-Px活力以及总抗氧化能力(T-AOC),SOD活力变化不明显。【结论】SY13活菌制剂能有效提高亚急性衰老小鼠的抗氧化能力,具有一定延缓衰老的作用。

乳酸菌酸胁迫反应机制研究进展

乳酸菌可发酵糖类产生乳酸,并广泛应用于食品、药物和饲料等工业。由于有机酸的积累,乳酸菌大部分的生长代谢都在低pH的酸性环境中进行,具有酸胁迫反应。pH的自我平衡、ATR反应机制、对大分子的保护和修复作用及细胞膜的变化等是乳酸菌酸胁迫反应的主要机制,其中,pH自我平衡包括F0F1-ATPase质子泵、精氨酸脱氨酶途径(ADI)和谷氨酸脱羧酶途径(GAD)等。由此可见,乳酸菌酸胁迫反应机制涉及到基因和蛋白的表达调控等,是非常复杂的网络调控体系。

饲喂乳酸菌对小白鼠血清中IgG及肠道中SIgA影响的研究

本试验以2株乳杆菌MG2-1、L.casei.zhang按不同剂量分别饲喂小鼠,在5、10、15、20、25、30d测定其血清中IgG及肠道内SIgA含量,结果表明饲喂不同剂量的2株菌的乳悬液均能极显著提高IgG、SIgA含量(P<0.01)。对提高IgG含量方面两菌株均表现出低、中剂量饲喂组随着饲喂时间不断增加,有超过高剂量组的趋势。在第25d时,菌株MG2-1组,中剂量组极显著的高于高剂量组,L.casei.zhang组低剂量极显著的高于中、高剂量组。而SIgA水平高剂量组比低、中剂量组高。

胡萝卜花色香肠的研制

将胡萝卜浓缩汁添加到肉馅中,研制成橙色的新型花色香肠制品。通过测定香肠的感官、理化和微生物指标,确定了胡萝卜花色香肠的最佳配方和加工工艺条件。

苏尼特双峰驼鲜驼乳对荷瘤小鼠免疫功能的影响及其抗肿瘤作用

目的:观察苏尼特双峰驼鲜驼乳的抗肿瘤作用及其对荷瘤小鼠免疫功能的影响。方法:以H22肝癌小鼠为模型,观察苏尼特鲜驼乳的抗肿瘤效果,并对小鼠免疫学指标进行测定。结果:苏尼特双峰驼鲜驼乳对H22肿瘤细胞的生长有一定的抑制作用,并能显著增加荷瘤小鼠的脾指数、胸腺指数,增强巨噬细胞吞噬功能,使小肠Payer’s结、小肠黏膜sIgA和CD3明显增加。结论:苏尼特双峰驼乳具有抗肿瘤和增强荷瘤小鼠免疫功能的作用。

内蒙古不同地区、不同畜种乳及乳制品中乳杆菌属细菌的分布

对采集呼伦贝尔市、巴彦淖尔盟及阿拉善盟牧民家庭的各类乳及乳制品样品中的乳酸杆菌进行了分离鉴定.以研究内蒙古不同地区、不同畜种乳样中乳酸菌的种类及分布情况。结果表明,不同地区、不同畜种乳样中乳酸杆菌的分布是有差异的,呼伦贝尔市以鼠李糖乳杆菌(24.1％)、戊糖乳杆菌(17.2％)、植物乳杆菌(13.8％)占优势;巴彦淖尔盟以植物乳杆菌(62.5％)、干酪乳杆菌(7.5％)和瑞士乳杆菌(7.5％)占优势;阿拉善盟以干酪乳杆菌(31.2％)和植物乳杆菌(25％)占优势。3个地区共有的菌株类型为植物乳杆菌、干酪乳杆菌和弯曲乳杆菌。在内蒙古传统乳制品中,植物乳杆菌占绝对优势,占分离菌数的38.8％,其次是干酪乳杆菌、鼠李糖乳杆菌等。

益生菌Lactobacillus casei Zhang发酵特性的评价

以L.acidophilus NCFM,L.rhamnosus GG,L.casei Shirota和Bifidobacterium animalis Bb12为参照,对益生菌L.casei Zhang的发酵特性进行了研究。结果表明:发酵结束时,添加L.casei Zhang的发酵乳具有较高的pH值和较低的滴定酸度。4℃贮藏28 d后,L.casei Shirota和Bifidobacterium animalis Bb12的蛋白水解能力下降,而L.asei Zhang,L acidophilus NCFM和L.rhamnosus GG蛋白水解能力不断上升。尽管L.casei Zhang在脱脂乳中的发酵速度低于对照益生菌,但贮藏期内其活菌数缓慢上升并于贮藏结束时达到最高。L.casei Zhang完全具备益生菌所应有的发酵特性,因此其适合应用于发酵乳的开发。