地锦草总黄酮最佳提取分离工艺的研究

采用四因素三水平的正交实验方法,对地锦草总黄酮的最佳提取工艺进行了探索.采用乙酸乙酯萃取、酸碱沉淀、铅盐沉淀3种方法,对其最佳分离工艺进行了探索.正交实验结果表明:温浸法中四因素对地锦草黄酮的影响顺序为乙醇浓度>样液比>提取温度>提取时间.通过实验得到了地锦草总黄酮的最佳提取工艺:以10倍体积的50%的乙醇水溶液在80℃浸提1 h.地锦草总黄酮的最佳分离方法为酸碱沉淀法.这些数据为中药地锦草的开发和应用提供了科学依据.

决明子中总蒽醌苷元的大孔吸附树脂纯化工艺的研究

目的探索决明子蒽醌苷元的大孔吸附树脂纯化工艺。方法以决明子总蒽醌苷元质量分数和收率为主要考察指标,比较了乙醚和氯仿对蒽醌苷元提取的专属性,考察了大孔吸附树脂S-8、AB-8、X-5、NKA-12、D4020、D-101对决明子蒽醌苷元的吸附和解吸附特性以及纯化能力。结果决明子药粉采用氯仿浸提,上S-8型大孔树脂柱,水洗至中性,乙醇-5%NaOH(4∶1)洗脱,醇碱洗脱液浓缩、酸化处理得到质量分数为42.62%的蒽醌苷元。结论建立了一种蒽醌苷元的纯化工艺,为决明子中蒽醌苷元类成分的工业化生产提供依据。

鸢尾苷元和鸢尾苷的电子结构和光谱性质的含时密度泛函理论研究

采用ab initio的HF和DFT的B3LYP方法,对化合物鸢尾苷元和鸢尾苷基态结构进行优化,分析了前线分子轨道特征和能级分布.用含时密度泛函理论(TD-DFT)和半经验的ZINDO方法,对鸢尾苷元和鸢尾苷的电子光谱进行了研究,发现该物质主要吸收光谱源于分子内的π→π*的电子跃迁.计算结果表明,分子结构改变可影响化合物前线分子轨道分布和吸收光谱,吸电子基使紫外光谱红移.

多指标综合研究返魂草提取物的提取工艺

利用L9(34)正交试验设计表,采用绿原酸、咖啡酸、异槲皮苷三种单体为含量测定指标,同时考虑总固体物得率,探讨了返魂草提取工艺中的几个影响因素,并对实验结果进行极差和方差分析.实验结果表明,提取次数为3次、90℃条件下、乙醇质量分数为60%、每次提取6 h为最佳提取工艺.该工艺操作简便、稳定可靠,为返魂草新制剂的研究提供了参考.

四环素基因调节系统下小鼠VEGF基因表达效率的测定

为了测定四环素基因调节小鼠模型的有效性和潜在的应用价值,针对各组织中VEGF mRNA表达水平受四环素调节的效率进行了分析.从小鼠不同组织提取总RNA,进行realtime PCR分析,并利用相对定量2-△△CT方法分析这些组织中VEGF基因在mRNA表达水平上的差异,同时观察和统计小鼠组织发育情况.结果表明,转基因小鼠体内各个组织的VEFG mRNA表达水平普遍下降,尤以脂肪和卵巢最为明显.其中心脏VEFG mRNA下降53%,肝脏下降72%,肺下降50%,血小板下降49%,肾脏下降44%,脑下降55%,脂肪下降90%,子宫下降52%,卵巢下降80%.同时VEGF基因表达下降导致小鼠各个相应组织器官的发育大小出现异常.因此,四环素基因调节系统能够有效地调节转基因小鼠各个组织VEGF基因的表达水平.

麻叶千里光挥发油抗病毒活性及成分分析

利用体外细胞病变效应(CPE)法,发现菊科千里光属植物麻叶千里光(Senecio cannabifoliusLess.)挥发油对呼吸道合胞病毒(RSV)和单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-Ⅰ)致HeLa细胞病变有显著的抑制作用,能不同程度地延缓副流感病毒、柯萨奇病毒B3、腺病毒Ⅲ型和流感病毒致细胞病变作用。为进一步确定麻叶千里光挥发油抗病毒的活性成分,经气相色谱-质谱联用技术对其进行了成分分析。麻叶千里光挥发油得率0.22%(mL/100g),从中初步鉴定了26种化合物,占挥发油总量的88.47%,主要为正十六(烷)酸(27.01%)、胡萝卜次醇(13.73%)、9,12-十八碳二烯酸(9.99%)、α-蒎烯(9.28%)和β-蒎烯(5.58%)。在鉴定出的化合物中,萜烯占47.42%,脂肪酸类占37.61%,其它成分仅占3.44%,故提示麻叶千里光挥发油中高含量的萜烯和脂肪酸类可能与其抗病毒活性有关。

乌骨藤中五环三萜类化合物的分离鉴定

利用硅胶柱色谱法、Sephadex LH-20凝胶柱色谱法及半制备高效液相色谱法,从乌骨藤的正丁醇萃取物中分离得到4种五环三萜类化合物。利用核磁共振谱、质谱、红外光谱等分析方法对化合物结构进行了分析和表征,确定了4种化合物分别为β-香树脂醇(β-amyrin)、白桦酯醇(betulin)、白桦酯酸(betulinic acid)和羽扇豆醇(lupeol),它们为首次在牛奶菜属植物中发现,其中后3种化合物具有抗肿瘤活性。

葛花异黄酮对急性心肌梗死小鼠心肌的保护作用

目的通过小鼠急性心肌梗死模型观察葛花异黄酮对缺血心肌的影响,并探讨其作用机制。方法开胸结扎左冠状动脉前降支建立小鼠急性心肌梗死模型,以丹参注射液为阳性对照,观察葛花总黄酮低、高剂量组对心肌梗死面积、血清心肌酶、血清SOD和MDA含量的影响;并通过RT-PCR的方法,检测葛花总黄酮对缺血心肌β-肾上腺受体激酶1(β-adrenergic receptor kinase,β-ARK1)表达的影响。结果葛花总黄酮可明显缩小小鼠心肌梗死面积,降低血清心肌酶和MDA含量,下调心肌β-ARK1 mRNA的表达,并随着剂量的增加其作用加强。结论葛花总黄酮对急性心肌梗死小鼠心肌有明显的保护作用,其作用机制与其抗氧化损伤及下调心肌β-ARK1mRNA的表达有关。

离子凝聚法制备负载流感疫苗的壳聚糖微球

采用三聚磷酸钠(TPP)作为离子交联剂,应用离子凝聚法制备负载流感疫苗的壳聚糖微球.筛选出壳聚糖起始质量分数为1%.TPP的浓度对壳聚糖微球的制备影响较大,采用低浓度的TPP(200μg/mL)制备的微球放置过夜均出现沉淀现象,高浓度的TPP(800μg/mL)在制备过程中出现絮状沉淀.固化比影响微球的释放行为,固化比为1∶1的微球爆炸式释放率达到90%,固化比为1∶3的微球6 h后逐步释放,12 h后释放率达到95%.固化比为1∶5的微球6 h后没有明显的释放行为.壳聚糖溶液的pH对微球的制备和释放没有显著的影响.通过对负载流感疫苗的壳聚糖微球的制备条件和释放行为的研究结果表明,pH=5.6的壳聚糖溶液,固化比为1∶3,TPP的质量浓度为400μg/mL是较理想的流感疫苗壳聚糖微球的制备条件.

千金子油理化性质及其脂肪酸和挥发油成分分析

对千金子油理化性质进行了系统的分析测试,并利用气相色谱法分析了千金子油脂肪酸及千金子挥发油,结果表明,千金子油中油酸含量最高占78.158%,其次是软脂酸、硬脂酸,分别为8.513%和5.523%;千金子挥发油中油酸、亚油酸和油酸-2-丙三醇酯含量较高,分别为17.747%,15.852%和13.196%.

北五味子中一种新的莽草酸衍生物的分离纯化及其含量测定

从北五味子中提取分离得到一种新的莽草酸衍生物,经一维、二维核磁共振波谱(1D NMR,HMQC,HMBC)等数据解析,鉴定为莽草酸正丁酯.并采用ZORBAX Extend C18柱,以乙腈-0.05%磷酸为流动相进行梯度洗脱,检测波长为215nm,流速1.0mL/min,建立了北五味子中莽草酸正丁酯含量的高效液相色谱分析方法.结果表明,莽草酸正丁酯在2～65μg/mL浓度范围内线性关系良好,相关系数r=0.9999,平均回收率为98.25%,相对标准偏差(RSD)为1.55%,表明本法简单准确,重复性好.

鸢尾苷元对急性心肌梗死小鼠心肌的保护作用

目的观察鸢尾苷元对小鼠急性心肌梗死模型缺血心肌的影响,并探讨其作用机制。方法开胸结扎左冠状动脉前降支建立小鼠急性心肌梗死模型,分生理盐水组、复方丹参组、溶媒组、鸢尾苷元小剂量(5g·L-1)和大剂量组(10g·L-1),每组10只。观察各组心肌梗死面积、血清心肌酶、血清过氧化物歧化酶(SOD)和丙二醛(MDA)含量,及缺血心肌血管内皮生长因子A(VEGFa)、内皮型一氧化氮合成酶(eNOS)和β-肾上腺素受体激酶1(β-ARK1) mRNA的表达。结果与生理盐水组相比,鸢尾苷元组心肌梗死面积明显缩小(P<0.01),血清心肌酶和MDA含量降低(P<0.01)。心肌VEGFa和eNOS mRNA的表达上调(P<0.01),β-ARK1 mRNA的表达下调(P<0.01),且随着剂量的增加其作用加强。结论鸢尾苷元对急性心肌梗死小鼠心肌有明显的保护作用,其作用机制与其抗氧化损伤及上调VEGFa和eNOS mRNA的表达、下调β-ARK1的表达有关。