重组斑马鱼p8蛋白的原核表达及纯化

目的:在大肠杆菌中重组表达斑马鱼p8蛋白并纯化。方法:PCR扩增斑马鱼p8蛋白基因编码区,连接到带有6×His标签的原核表达载体pET-28a中,构建重组表达质粒pET-28a-p8并转化大肠杆菌BL21(DE3),用IPTG诱导表达;优化表达条件后用Ni2+柱纯化重组蛋白。结果:构建了pET-28a-p8重组质粒;目的蛋白在大肠杆菌中获得表达,亲和纯化后,SDS-PAGE显示相对分子质量为预期的12.8×103。结论:获得了斑马鱼p8融合蛋白,为其生物学功能研究奠定了基础。

鱼类脂味觉的行为学检测

选取斑马鱼和蓝鲨为代表,设计并改进了一系列味觉行为学实验方法来探索鱼类的味觉感受。结果表明,斑马鱼和蓝鲨除了具有对苦味和鲜味的感受外,很可能具有对脂肪酸的味觉感受。研究发现,蓝鲨对甜味具有偏好性,这与斑马鱼无甜味感受能力的报道不同。

重组斑马鱼CD36蛋白的原核表达及纯化

目的：在大肠杆菌中重组表达斑马鱼CD36蛋白胞外区38～432氨基酸残基段并纯化。方法：PCR扩增斑马鱼CD36蛋白的基因编码区，连接到带有6~His标签的原核表达载体pET-28a中，构建重组表达质粒pET28a-CD36，并转化大肠杆菌BL21（DE3），用IPTG诱导表达，优化表达条件后用Ni^2＋柱进行纯化。结果：构建了pET28a-CD36重组质粒；目的蛋白在大肠杆菌中获得表达，亲和纯化后，SDS-PAGE显示相对分子质量为预期的46．8×10^3。结论：获得了斑马鱼CD36融合蛋白，为其生物学功能研究奠定了基础。