人参皂苷Re对乙醇诱导的大鼠H4IIE肝细胞线粒体功能损伤的作用机制

[目的]探讨人参皂苷Re对乙醇诱导的大鼠H4IIE肝细胞线粒体功能损伤的作用机制.[方法]采用MTT法检测不同浓度乙醇分别刺激H4IIE细胞不同时间时的细胞活力水平,确定建立模型的乙醇浓度及作用时间.实验分为空白对照组、乙醇(EtOH 800 mmol/L)模型组、人参皂苷Re(10μmol/L)组和人参皂苷Re+乙醇(Re 10μmol/L+EtOH 800 mmol/L)组.采用流式细胞仪及荧光显微镜分别检测各组细胞活性氧(ROS)和膜电位(MMP)的变化情况,并使用多功能酶标仪检测各组ATP水平变化;采用Western blot法检测各组氧化应激相关蛋白Keap1、Nrf2、HO-1及Bach1蛋白表达水平.[结果]MTT法检测结果显示,与空白对照组比较,随着乙醇浓度的升高及作用时间的延长,各组细胞存活率明显降低(P<0.05).与空白对照组比较,乙醇模型组ROS生成明显增多,且MMP、ATP水平明显降低,差异均具有统计学意义(P<0.05);乙醇模型组Keap1、total-Nrf2、nucleus-Nrf2、HO-1及Bach1表达均明显升高(P<0.05).[结论]乙醇可降低大鼠H4IIE肝细胞生存率,且在一定范围内呈时间-剂量效应关系;乙醇可致大鼠H4IIE肝细胞线粒体功能损伤;人参皂苷Re对酒精性肝细胞损伤具有一定的保护作用,其机制认为可能与保护线粒体功能及Nrf2-ARE通路的抗氧化作用有关系.