BALB/cSpf小鼠和野生型BALB/c小鼠生物学特性比较

目的比较分析BALB/cSpf小鼠与野生型BALB/c(N-BALB/c,N:normal)小鼠生物学特性指标差异,为其实验应用提供基础数据。方法3~12周,每周对雌雄BALB/cSpf小鼠和N-BALB/c小鼠生长曲线、采食量、饮水量进行统计分析;取BALB/cSpf小鼠雌性和N-BALB/c小鼠雌性各30只,二雌一雄长期同居交配方式繁殖饲养,记录产仔数,产仔性别;采集血液进行17项血液生化指标和22项血液生理指标测定。结果BALB/cSpf小鼠和N-BALB/c小鼠采食量和饮水量差异不显著(P>0.05),BALB/cSpf小鼠体质量显著高于N-BALB/c小鼠(雌性从第5周开始,雄性从第3周开始)。1~3胎产仔数及产仔性别差异不显著。雌性BALB/cSpf小鼠生理指标WBC、Neu、Lym、RBC、HGB、HCT、MPV、PDW显著高于N-BALB/c小鼠(P<0.01)。雄性BALB/cSpf小鼠生理指标WBC、Neu、Lym、Mon、HCT、MCHC显著低于N-BALB/c小鼠(P<0.01)。雌性BALB/cSpf小鼠生化指标UREA显著高于N-BALB/c小鼠(P<0.05);AST、CK、LDH显著低于N-BALB/c小鼠(P<0.01)。BALB/cSpf小鼠生化指标TG、TC、LIP、UREA、MgⅡ显著高于N-BALB/c小鼠(P<0.01);ALT、AST、Glu-G、Ca显著低于N-BALB/c小鼠(P<0.01)。结论BALB/cSpf小鼠和N-BALB/c小鼠生物学特性有一定差异。

建立6种近交系大鼠遗传质量检测及品系鉴别的单核苷酸多态性组合

目的 筛选出均匀分布在大鼠染色体上的单核苷酸多态性(SNP)位点,建立常用近交系大鼠遗传质量检测及品系鉴别方法。方法 在文献中获得SNP共141个,利用Ensembl数据库中获取的信息筛选出在BN、F344、GK、LEW、SHR和WKY 6种大鼠品系中呈现多态性的SNP位点,并从中优化出均匀分布各染色体且包含品系特异性SNP的最佳位点组合。通过PCR扩增技术和Sanger测序方法对组合位点用于常用近交系大鼠遗传质量检测和品系鉴别的效果进行验证。结果 优化出了在各品系内表现单态性、品系间呈多态性的40个SNP标记。其中包含可以用于品系鉴别的特异性位点:4个BN大鼠特异性位点,3个F344大鼠特异性位点,2个GK大鼠特异性位点,2个LEW大鼠特异性位点和1个SHR大鼠特异性位点。分别利用BN、F344、LEW、SHR和WKY大鼠的DNA混合样本对优化出的40个位点进行验证,结果与网站数据一致。结论 成功建立了常用近交系大鼠遗传质量检测及品系鉴别的SNP组合。

Big-BALB/c小鼠亚系选育前后的抗体制备效率比较研究

目的比较利用BALB/c和Big-BALB/c(简称B-BALB/c)两种亚系小鼠制备鼠痘及鼠肝炎单克隆抗体的效率,为今后通过杂交瘤进行体内诱导单克隆抗体制备时实验动物的选择提供参考。方法从常规繁育的BALB/c小鼠群体中选择4周龄体重超过正常动物5%(后期选种标准为超过10%)的个体进行选种并单独繁育,经10代选育制备B-BALB/c小鼠亚系。选择10~11周龄、雌雄各半的BALB/c小鼠和B-BALB/c小鼠各40只,分别接种用液体石蜡预处理后的鼠痘单克隆抗体杂交瘤细胞株G23或鼠肝炎单克隆抗体杂交瘤细胞株Y15,然后通过体内诱生法获取含单克隆抗体的小鼠腹水,利用间接ELISA法检验抗体效价,按照品系、性别和接种杂交瘤类型对小鼠进行分组,分析腹水产量、抗体效价和抗体产量以评估两种亚系小鼠的抗体制备效率。结果经10代选育后获得的10周龄雄性和雌性B-BALB/c小鼠体重分别比同周龄BALB/c小鼠增加了22.3%和12.8%。抗体制备过程中,B-BALB/c小鼠的耐受力比BALB/c小鼠更好,能够适应二次腹水采集;与BALB/c小鼠相比,B-BALB/c小鼠腹水产量和抗体效价均显著提高,尤以杂交瘤细胞株G23接种组更明显(均P<0.0001)。接种杂交瘤细胞株G23或Y15后,B-BALB/c小鼠的平均抗体产量(14.99×10^(4)U和33.22×10^(4)U)高于BALB/c小鼠(5.33×10^(4)U和19.31×10^(4)U)(均P<0.01)。接种杂交瘤细胞株G23后,B-BALB/c小鼠的平均单位体重的抗体产量(0.55×10^(4)U/g)高于BALB/c小鼠(0.23×10^(4)U/g)(P<0.0001)。接种杂交瘤细胞株Y15后,雌性B-BALB/c和BALB/c小鼠的单位体重抗体产量高于同亚系的雄性B-BALB/c小鼠(均P<0.01)。结论B-BALB/c小鼠在单克隆抗体体内诱导制备中可作为BALB/c小鼠的替代选择,能够达到减少实验动物使用数量、降低人力成本并提高抗体制备效率的目的。

移植不同饲料利用效率猪的粪便可定向改变伪无菌小鼠的生长性能

目的通过将不同饲料利用效率猪的粪便移植至伪无菌小鼠,探讨其对受体小鼠生长性能的影响规律,并初步揭示其机制。方法使用36头28 kg左右的杜×长×大阉公猪进行42 d单笼饲养(自由采食)并测算其饲料转化效率。实验结束时将36头猪根据饲料转化效率分为高、中、低3组,采集三组猪的新鲜粪便,通过灌胃移植到经广谱抗生素处理过的小鼠中,监测粪便移植后小鼠的生长性能变化。采用全收粪法测定饲料利用效率高、中、低三组猪的营养物质消化率,并采用16S rRNA V3-4可变区扩增测序对猪和小鼠的粪便微生物组成进行分析比较。结果将不同饲料利用效率猪的粪便移植至广谱抗生素处理的伪无菌小鼠后,小鼠重现了猪的生长性能表型;在肠道微生物的组成结构方面,高饲料转化效率猪及其高生长性能的受体鼠,肠道微生物的物种丰富度和微生物多样性相对较高;高饲料利用效率猪的总能消化率(P=0.01)显著增加,产气短杆菌的丰度显著提高,且其粪便移植后受体小鼠的肠球菌和阿克曼氏菌丰度也显著高于低饲料利用效率的受体小鼠,表明肠道微生物在能量的高效利用方面起着重要的作用。结论移植不同饲料利用效率猪的粪便可定向改变伪无菌小鼠肠道微生物的物种丰富度、微生物多样性及其生长性能。高饲料利用效率猪的优势主要在于能量消化利用效率较高,肠道中与能量高效利用相关微生物丰度相对较高。

不同遗传背景小鼠输卵管移植效率的研究

目的选用不同遗传背景的小鼠,研究移植不同胚胎数量对产仔率的影响,旨在提高小鼠的移植效率。方法本研究主要采用输卵管移植技术将2-细胞胚胎移植至假孕鼠体内,对妊娠母鼠的产仔数量进行统计分析。结果与封闭群相比,近交系的移植效率较低,平均产仔率为37.5%,封闭群则为45%。免疫缺陷动物对移植的胚胎数量要求较高,每只小鼠单侧移植11~15枚细胞时的产仔率最高,为63.5%;不同类型小鼠的平均产仔率比较:C57BL/6J(49.8%)>KM(45.8%)>ICR(44.1%)>NOD-SCID(35.6%)>BAL B/c-nu(29.3%)。ICR、C57、NOD-SCID三种小鼠移植胚胎数量在11~15枚时,产仔率最高;而KM小鼠移植胚胎数量在16~30枚时,产仔率最高;BALB/c-nu小鼠移植胚胎数量≤10枚时,产仔率最高。结论不同遗传背景的小鼠输卵管移植效率不同,相同遗传背景小鼠移植产仔率随移植胚胎数量的不同而有所变化。