索拉菲尼诱导的细胞凋亡和自噬对HeLa细胞耐药性的影响

目的 探究索拉菲尼(sorafenib)通过细胞凋亡和自噬对人宫颈癌细胞系HeLa增殖的影响,及对HeLa细胞耐药性的影响。方法 用间歇诱导法构建耐药细胞株,以0、2.5、5.0、7.5、10.0、15.0、20.0μmol/L为梯度的索拉菲尼处理HeLa细胞,每个浓度维持1周,并筛选出可稳定传代的耐药细胞株;MTT法检测索拉菲尼对细胞增殖的影响;流式细胞术分析细胞周期分布情况;RT-qPCR检测亲本株和耐药株在不同药物浓度下耐药和凋亡基因表达水平的变化。Western blot检测与自噬相关的标志物蛋白LC3-Ⅰ和LC3-Ⅱ的变化。结果 成功获得稳定的耐药株;经药物处理的细胞更多的被阻滞在G1期。在耐药细胞中,凋亡抑制基因Bcl-2表达量显著降低;凋亡基因Bax表达量明显增加;耐药基因表达明显升高。Western blot中耐药细胞LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ显著高于亲本细胞(P<0.05)。结论 索拉菲尼通过阻滞细胞周期抑制HeLa细胞增殖并诱导其自噬。细胞自噬在宫颈癌治疗过程中可能参与了细胞耐药的发展,促进细胞存活;在一定程度下,药物诱导的细胞自噬能激活耐药细胞的凋亡信号通路,促进细胞耐药逆转。

槲皮素对索拉非尼耐药Hela细胞增殖、迁移、凋亡及自噬的研究

目的:探讨槲皮素(Quercetin, QU)联合索拉非尼(Solafenib)对索拉非尼耐药Hela细胞的作用及其机制。方法:MTT法测定不同浓度索拉非尼(0, 2.5, 5.0, 7.5, 10.0, 15.0, 20.0 µmol/L)对细胞的增殖的影响;细胞划痕实验检测各组细胞的迁移水平;PCR实验检测各组凋亡基因Bax、Bcl-2及自噬基因LC3-B、Beclin-1的表达水平;Western-blot (WB)检测细胞凋亡相关蛋白caspase-3的相对表达量。结果:随着药物浓度的增加,耐药细胞和亲本细胞的抑制率逐渐升高,且对亲本细胞的抑制率明显高于耐药细胞。联合用药组抑制耐药细胞的迁移率,并且联合用药组的Bax和LC3-B基因相对表达量降低,Bcl-2、Beclin-1基因相对表达量、Bax/Bcl-2的值以及caspase-3蛋白相对表达量升高,与空白对照组和索拉非尼组相比,联合用药组细胞凋亡显著升高。结论:槲皮素与索拉非尼联合用药是通过上调Bcl-2、Beclin-1、Bax/Bcl-2基因相对表达量、下调Bax、LC3-B基因相对表达量同时上调caspase-3蛋白相对表达量的途径,抑制耐药细胞的迁移率、促进耐药细胞凋亡、抑制细胞自噬,从而起到逆转耐索拉非尼Hela细胞耐药性的作用。

细菌外膜囊泡在抗肿瘤中的研究进展

肿瘤是困扰全球健康的主要问题之一,如何克服目前所使用的治疗手段中的限制,是亟需解决的问题关键。细菌在分子机制方面得到了充分的证实,已被广泛的考虑在肿瘤治疗中的应用。外膜囊泡(Outer membrane vesicles, OMVs)是由革兰氏阴性菌分泌的双层脂质纳米囊泡。OMVs含有多种生物分子,是细菌与细菌、环境和宿主等交流的重要介质,因此它们可能成为抗肿瘤的有效的方案。本文综述了OMVs的结构、发生机制和生物学功能,此外,本文还重点关注了OMVs在抗肿瘤方面的应用进展。