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miRNA-34a基因敲除DBA1/J小鼠的建立
1
作者
邱莎丽
刘雪
+8 位作者
汪竹涛
王蓉
晁天柱
王晶哲
潘子辉
梁银明
王荟
刘霞
邵启祥
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2019年第6期461-466,共6页
目的:利用CRISPR/Cas9技术,构建全基因组微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)基因敲除DBA1/J小鼠,并进行繁殖、鉴定。方法:根据CRISPR/Cas9原理,构建出miR-34a-/+DBA1/J鼠为F0代小鼠;将其与DBA1/J野生型小鼠进行杂交,通过PCR鉴定筛选出...
目的:利用CRISPR/Cas9技术,构建全基因组微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)基因敲除DBA1/J小鼠,并进行繁殖、鉴定。方法:根据CRISPR/Cas9原理,构建出miR-34a-/+DBA1/J鼠为F0代小鼠;将其与DBA1/J野生型小鼠进行杂交,通过PCR鉴定筛选出基因型为miR-34a-/+的F1小鼠;筛选miR-34a-/-的F2代小鼠,分析其生长特性、繁殖能力;通过流式细胞术检测小鼠体内免疫器官和外周血中T、B淋巴细胞比例。结果:获得2只F0代小鼠,4只F1代小鼠,5只F2代小鼠;与DBA1/J小鼠比较,miR-34a-/-DBA1/J小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群比例没有显著变化(P> 0. 05),但B淋巴细胞比例明显增加(P <0. 05);未发现miR-34a-/-DBA1/J小鼠的体重、繁殖能力有明显的改变(P> 0. 05)。结论:通过CRISPR/Cas9技术成功敲除miR-34a基因并繁殖获得目的小鼠。
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关键词
CRISPR/Cas9
MIR-34A
基因敲除
繁殖
鉴定
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职称材料
题名
miRNA-34a基因敲除DBA1/J小鼠的建立
1
作者
邱莎丽
刘雪
汪竹涛
王蓉
晁天柱
王晶哲
潘子辉
梁银明
王荟
刘霞
邵启祥
机构
江苏大学
医学院
新乡医学院免疫遗传工程实验室
出处
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2019年第6期461-466,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(31400773)
江苏省大学生创新创业训练计划项目(201910299156Y,201710299063Y,201810299089Y)
文摘
目的:利用CRISPR/Cas9技术,构建全基因组微小RNA-34a(microRNA-34a,miR-34a)基因敲除DBA1/J小鼠,并进行繁殖、鉴定。方法:根据CRISPR/Cas9原理,构建出miR-34a-/+DBA1/J鼠为F0代小鼠;将其与DBA1/J野生型小鼠进行杂交,通过PCR鉴定筛选出基因型为miR-34a-/+的F1小鼠;筛选miR-34a-/-的F2代小鼠,分析其生长特性、繁殖能力;通过流式细胞术检测小鼠体内免疫器官和外周血中T、B淋巴细胞比例。结果:获得2只F0代小鼠,4只F1代小鼠,5只F2代小鼠;与DBA1/J小鼠比较,miR-34a-/-DBA1/J小鼠CD4+、CD8+T淋巴细胞亚群比例没有显著变化(P> 0. 05),但B淋巴细胞比例明显增加(P <0. 05);未发现miR-34a-/-DBA1/J小鼠的体重、繁殖能力有明显的改变(P> 0. 05)。结论:通过CRISPR/Cas9技术成功敲除miR-34a基因并繁殖获得目的小鼠。
关键词
CRISPR/Cas9
MIR-34A
基因敲除
繁殖
鉴定
Keywords
CRISPR/Cas9
miR-34a
gene knockout
reproduction
identification
分类号
R393 [医药卫生—基础医学]
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职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
miRNA-34a基因敲除DBA1/J小鼠的建立
邱莎丽
刘雪
汪竹涛
王蓉
晁天柱
王晶哲
潘子辉
梁银明
王荟
刘霞
邵启祥
《江苏大学学报(医学版)》
CAS
2019
0
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参考文献
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