丰富环境对抑郁大鼠行为学及海马组织中丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1表达的影响

目的探讨丰富环境(EE)对慢性不可预见性轻度应激(CUS)抑郁模型大鼠行为学及海马组织中丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响,为抑郁症的治疗提供线索。方法 40只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、CUS组、氟西汀组及EE组,每组10只。CUS组、氟西汀组、EE组大鼠分别给予8周的CUS,从第5周起EE组及氟西汀组大鼠分别给予EE干预及氟西汀灌胃4周;对照组大鼠正常环境饲养8周。采用体质量增加量、旷场试验、蔗糖偏好等评估各组大鼠行为学的变化,采用免疫印迹法检测大鼠海马组织中MKP-1蛋白的表达。结果各组大鼠造模前体质量、水平运动距离、直立次数、穿格次数、蔗糖偏好指数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,造模后CUS组、氟西汀组及EE组大鼠体质量增加减少,水平运动距离、直立次数、穿格次数减少,蔗糖偏好指数降低(P<0.05);CUS组、氟西汀组及EE组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数及蔗糖偏好指数两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。氟西汀及EE干预后,CUS组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数、糖水偏好指数与对照组大鼠比较均减少(P<0.05);氟西汀组及EE组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数及蔗糖偏好指数与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);氟西汀组和EE组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数及蔗糖偏好指数较CUS组均升高(P<0.05);EE组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数及蔗糖偏好指数与氟西汀组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,CUS组和EE组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达显著升高(P<0.05);氟西汀组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与CUS组比较,氟西汀组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达明显下调(P<0.05);EE组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达与CUS组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与氟西汀组比较,EE组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论 EE对大鼠抑郁样症状有显著的改善作用,但对海马组织中MKP-1蛋白表达无显著影响,EE可能不是通过影响MKP-1表达作用于抑郁症。

浅谈基于Motic数码互动系统的组织学实验教学

组织学（histology）是研究人体微细结构及其相关功能的科学,属重要的医学基础课程,学生掌握细胞、组织和器官的光镜结构及超微结构,了解其相关的功能;为学习其它基础医学和临床医学课程奠定基础。那么,在教学过程中要理论教学与实验教学相融合,两者相辅相成,这样更有利于学生的知识学习。其中实验教学占据着举足轻重的地位。对于实验教学,从以往的单纯依靠显微镜和实验标本来传统讲授到现在的计算机信息网络平台的应用,无不显示出教学改革的成效与发展,给学生开辟了获取知识的新的途径。通过对Motic显微镜数码互动实验室功能的学习,了解了这种新兴的实验教学形式,下面就对Motic显微镜数码互动教学在实验教学方面浅谈一下笔者的体会与感受。

氟西汀对抑郁大鼠行为及海马组织内应激活化蛋白激酶信号通路的影响

目的探讨氟西汀对抑郁大鼠行为学表现及海马组织内丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)及Jun氨基末端激酶(JNK)通路蛋白表达的影响。方法40只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为正常组、抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组,每组10只。正常组大鼠不给予任何刺激;抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组大鼠给予8周慢性不可预见性应激(CUMS),于CUMS第5~8周,氟西汀组大鼠给予氟西汀(10 mg·kg^-1·d^-1)灌胃,生理盐水组大鼠给予生理盐水(10 mg·kg^-1·d^-1)灌胃;正常组和抑郁症组大鼠不给予任何干预措施。分别于CUMS前(造模前),CUMS 4周后(造模后)、8周后(干预后)评估4组大鼠行为学变化,最后一次行为学评估后处死大鼠,并取海马组织,采用Western blot法检测海马组织内MKP-1、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达水平,并计算p-JNK/JNK比值。结果造模前各组大鼠体质量、蔗糖偏好指数、强迫游泳不动时间及旷场实验结果比较差异均无统计学意义(P>0.05)。正常组大鼠造模前后各行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);与造模前比较,造模后抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P<0.05)。与正常组比较,造模后抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P<0.05)。造模后,抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠各种行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,干预后生理盐水组及抑郁症组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P<0.05)。干预后,氟西汀组与正常组大鼠各项行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05),生理盐水组与抑郁症组大鼠各项行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与生理盐水组和抑郁症组比较,氟西汀组大鼠体质量增加,蔗糖偏好指数上升,强迫游泳不动时间减少,水平运动距离和直立次数增加(P<0.05)。抑郁症组和生理盐水组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量高于正常组(P<0.05),氟西汀组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量低于抑郁症组和生理盐水组(P<0.05),氟西汀组与正常组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。4组大鼠海马组织内p-JNK、JNK蛋白表达量及p-JNK/JNK比值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论MKP-1改变可能是抑郁症发病的一个重要基因,其影响抑郁症发病的机制可能不是通过JNK信号通路。氟西汀可能通过下调MKP-1表达水平而改善大鼠抑郁状态。

食管鳞癌组织中E-cadherin蛋白表达及对术后预后的影响

目的:探讨食管鳞癌组织中E-cadherin蛋白表达对术后预后的影响。方法:5 620例1985年至2016年间收集的食管鳞癌患者生物样本及临床病理信息均来自河南省食管癌重点开放实验室建立的50万例食管癌和贲门癌临床信息数据库,利用组织芯片和SP免疫组化法测定患者食管鳞癌组织中E-cadherin的表达。结果:男性患者中,分化程度低、淋巴结转移阳性、病理分期晚的患者E-cadherin表达强于分化程度高、淋巴结转移阴性、病理分期早者(P <0. 05)。女性患者中,淋巴结转移阳性、病理分期晚的患者E-cadherin表达强于淋巴结转移阴性、病理分期早者(P <0. 05)。Cox回归分析结果显示,E-cadherin阳性表达不是女性患者术后预后的独立影响因素(P=0. 089);但是男性患者的术后预后独立危险因素,HR(95%CI)为1. 126(1. 066～1. 189)。结论:癌组织中E-cadherin蛋白阳性表达是食管鳞癌男性患者术后预后的危险因素。

二噁英对动物心脏发育影响的研究进展

随着工业化进程的加快,环境污染问题日益严峻。有"世纪之毒"称号的二噁英类化合物日益受到人们的关注。二噁英是非人为生产,没有任何用途,存在于各种环境介质的一类持久性污染物,具有致畸性、致癌性、免疫毒性、神经毒性、生殖发育毒性及心脏毒性等。本文就二噁英的机体作用途径及其对鱼类、鸟类及哺乳动物的心肌发育、心率及心血管等方面的影响进行综述。

癌-睾丸抗原SSX基因在肝细胞癌中的表达及临床意义

目的:检测癌-睾丸抗原SSX1-5 mRNA在肝细胞癌(HCC)组织中的表达,探讨其用于HCC免疫治疗的可能性.方法:采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)技术,检测61例HCC组织及52例配对的HCC癌旁组织中SSX1-5 mRNA,结合临床相关指标进行统计学分析.随机抽取PCR阳性产物进行DNA测序.结果:SSX1、SSX2、SSX4和SSX5 mRNA在HCC中的表达率分别为42.6%(26/61)、8.2%(5/61)、39.3%(24/61)和6.6%(4/61);未检测到SSX3的表达.在癌旁组织中,未检测到SSX1-5 mRNA;HCC组织中,至少表达1个SSX基因者达50.8%(31/61);表达2个或2个以上者达32.8%(20/61),表达3个或3个以上者达9.8%(6/61),同时表达4个者达3.3%(2/61).SSX的表达与临床相关指标关系的分析结果显示:门静脉癌栓形成与SSX1的表达、患者的年龄与SSX4的表达均具有显著性差异(P<0.05);DNA测序证实PCR阳性产物为目的基因.结论:SSX1、SSX2、SSX4和SSX5在HCC组织中表达频率不尽相同,但具有较强的特异性,提示有可能成为HCC免疫治疗的靶抗原.

长期应用不同剂量左旋多巴对帕金森病大鼠模型学习记忆能力和血浆同型半胱氨酸的影响

目的观察长期应用不同剂量左旋多巴(L-dopa)对帕金森病(PD)模型大鼠的学习记忆能力和血浆同型半胱氨酸(Hcy)的影响。方法应用6-羟多巴胺(6-OHDA)制作PD大鼠模型。将288只成功PD模型大鼠分为对照组及实验组。实验组再分为3个不同剂量组,分别用不同剂量的L-dopa腹腔注射(10mg/kg/d,20mg/kg/d,30mg/kg/d)连续28d,分别于不同时点(1、3、5、7、14和28d)作行为学测定,并抽血测定Hcy、叶酸;同时分离大鼠海马区制作冰冻切片,进行刚果红染色并测定海马区β淀粉样蛋白阳性斑块的积分吸光度。结果随着应用L-dopa剂量的增大、时间的增加可使PD模型大鼠学习记忆能力明显下降(P<0.05);海马区β淀粉样蛋白阳性斑块增多(P<0.05)。血浆Hcy浓度变化不一,随L-dopa剂量增大而升高,随L-dopa应用时间增长而波动,叶酸浓度降低(P<0.05)。结论长期大量使用L-dopa能使PD模型大鼠学习记忆能力明显下降,血浆Hcy浓度升高,引起β淀粉样蛋白阳性斑块增多,推测PD痴呆(PDD)可能与Hcy升高有关。

术前预后营养指数对贲门腺癌患者术后预后评价的价值

目的:研究术前预后营养指数(PNI)对贲门腺癌(GCA)术后预后的评价价值。方法:回顾性分析河南省安阳市肿瘤医院接受根治术治疗的GCA患者627例的临床资料。根据术前1周内检查的血清白蛋白水平和淋巴细胞数计算PNI。结果:PNI判定术后5 a生存的ROC曲线下面积为0. 650,最佳截断值为45. 5; PNI≥45. 5者375例,<45. 5者252例。Cox回归结果显示,PNI <45. 5是GCA患者术后预后的独立危险因素,HR(95%CI)为2. 645(2. 183～3. 205)。结论:术前PNI可用于GCA患者术后预后的判定,PNI≥45. 5的患者预后相对较好。

IL-18的毕赤酵母表达及其激活NF-κB和p38途径促进BRL-3A细胞增殖

目的：探讨白细胞介素18（IL-18）在毕赤酵母中的表达条件及其对BRL-3A细胞的增殖作用和作用机制.方法：构建表达载体p PIC9K-IL-18,电转化至毕赤酵母GS115,PCR、Western blotting和SDS-PAGE方法鉴定表达产物的正确性,并对发酵条件进行优化,再经双水相萃取偶联DEAE离子交换层析分离纯化表达产物.然后,MTT法检测重组大鼠IL-18（rr IL-18）对BRL-3A细胞的增殖作用,RT-PCR和Western blotting方法检测IL-18信号通路相关基因的表达变化.结果：在3 L发酵罐规模下600的菌体密度、p H=6.0、诱导温度23℃、体积分数分别为20%DO和0.25%甲醇浓度条件下表达质量浓度最高约为280 mg/L,经分离纯化后纯度可达95%.此外,质量浓度为15-20 ng/m L rr IL-18孵育48 h,能明显促进BRL-3A细胞增殖（P〈0.5）,且IL18R、My D88、NF-κB及其下游靶蛋白cyclin B1和cyclin B2的表达量均显著高于对照组（P〈0.5）.同时,p38途径的ATF2及其下游靶蛋白cyclin A2和Bcl-2的表达量也随之升高（P〈0.5）.结论：成功构建大鼠IL-18表达载体,优化在毕赤酵母中的发酵条件和纯化工艺,并首次证实IL-18能通过NF-κB和p38/ATF2途径激活细胞增殖相关靶蛋白cyclin B1、cyclin B2、cyclin A2和Bcl-2,进而促进BRL-3A大鼠肝细胞增殖。

传承大爱情怀—浅谈学习张丽莉精神

岁月悄悄溜走，世事变幻，恩师的表率，却常常在我们左右。一位好老师，胜过万卷书。在新乡医学院这片神圣的土地上，开垦着自己的职业土地，这里有很多很多优秀的园丁，他们不辞辛苦，用言语纸笔播种着希望，用心血汗水浇灌着未来。他们不是演员，却吸引着众多饥渴的目光；他们不是歌唱家，却让知识的清泉叮咚作响，唱出迷人的歌曲；他们不是雕塑家，却塑造着一批批青年人的灵魂。

肿瘤最长直径对贲门腺癌患者术后预后判定的价值

目的:探讨肿瘤最长直径(MTD)判断贲门腺癌(GCA)患者术后预后的价值。方法:4 347例GCA患者基本信息、随访记录均来自河南省食管癌重点开放实验室50万例食管癌和贲门癌临床信息数据库,MTD与TNM分期等临床病理资料来自医院病历记录。结果:低发区、TNM晚期GCA患者MTD大于高发区或TNM早期患者(P <0. 05)。Cox回归分析结果显示,MTD较大是GCA患者术后预后的独立危险因素,HR(95%CI)=1. 163 (1. 084～1. 248)。结论:MTD可为GCA的预后评估提供参考。

上皮钠离子通道在肺水肿中的作用机制研究进展

肺泡及呼吸道表面的液体对维持正常肺功能至关重要,肺泡腔内的液体过多积聚形成肺水肿会损伤气体交换。肺泡上皮细胞中的上皮钠离子通道(ENaC)在肺泡表面液体转运中起重要作用。在成人肺中,肺上皮细胞的重吸收限制了急性肺损伤和心源性水肿患者肺泡水肿的程度。ENaC是Na+驱动的液体重吸收的主要参与者,是治疗肺水肿的合适靶点。本文就ENaC在肺水肿中的作用、调控机制进行综述,旨在为临床预防和治疗肺损伤提供理论支持。

微课在组织病理学实验教学中的应用探索

微课是一种基于网络化和现代教育技术实现学生为学习的教学模式。在微课模式下,教师已经不仅仅是"传道授业解惑者",还是微课的开发设计者、新教学理念和模式的开拓者、学生学习的引路者。

海马神经元突触可塑性在抑郁症发病机制中的研究

目的 本文基于目前抑郁症发病机制中海马神经元突触可塑性的研究结果归纳总结,期望为抑郁症的临床和动物实验等研究提供参考和依据.方法 2014年4月在Pubmed、中国知网、万方数据知识服务平台以“抑郁”、“抗抑郁”、“丰富环境”、“慢性不可预见性刺激”、“海马”、“突触”、“可塑性”、“突触素（SYN-1）”、“微管相关蛋白-2（MAP-2）”、“突触结合蛋白-1（SYT-1）”、“突触后致密物-95（PSD-95）”等作为检索词,分析国内外相关研究结果中抑郁与海马神经元突触可塑性、抗抑郁与海马神经元突触可塑性等的关系,总结海马神经元突触可塑性在抑郁症发病过程中的作用.结果 检索文献679篇,最终纳入分析37篇,结果显示抑郁症的发病多伴有海马神经元突触可塑性的损伤,一些抗抑郁的治疗过程常伴随海马神经元突触可塑性的恢复.结论 海马神经元突触可塑性降低或损伤可能是抑郁症发病的机制所在,可表现为SYN-1、MAP-2、SYT-1、PSD-95等突触相关蛋白功能或表达的改变.同时,利用丰富环境治疗抑郁症的研究也从另一方面证明了抑郁症的发病很可能与海马神经元突触可塑性降低或损伤相关.而抑郁症神经元突触可塑性降低或损伤表现在哪些蛋白的怎样的改变还不十分清楚,未来丰富环境治疗抑郁症的内部设置等仍需进一步研究.

慢性刺激大鼠海马微管相关蛋白-2的表达及氟西汀联合丰富环境的作用

目的 探讨慢性不可预见性刺激（chronic unpredictable stress,CUS）大鼠海马微管相关蛋白-2（microtubule associated protein-2,MAP-2）表达水平的变化,氟西汀联合丰富环境对CUS大鼠的作用.方法 将30只成年雄性Sprague-Dawle（SD）大鼠采用随机数字表法分为CUS组、正常组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组,每组6只.CUS组均孤养并接受6周CUS,正常组标准环境每笼3只群养6周,剩余3组接受6周CUS并于第3周末至第6周末分别氟西汀、丰富环境、氟西汀＋丰富环境干预,CUS前后及干预后以糖水消耗实验、体重测量、旷场实验对大鼠行为进行评估,以免疫组织化学法测定各组大鼠海马MAP-2表达水平.结果 （1）CUS前各组大鼠行为评估组间两两比较,糖水消耗、体重、水平运动距离、直立次数、粪便粒数差异均无统计学意义.（2）CUS后CUS组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组较正常组糖水消耗少、体重增加少、水平运动距离小（均P＜0.05）.（3）干预后正常组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组较CUS组糖水消耗多、体重增加多、水平运动距离大（均P＜0.05）;正常组[（84±3）g,（6 687±664） cm]较CUS＋氟西汀组[（75±4）g,（5 859±624） cm]、CUS＋丰富环境组[（77±8）g,（5 876±784） cm]体重增加多（P=0.005、0.029）、水平运动距离大（P=0.028、0.031）;CUS＋氟西汀＋丰富环境组[（6 657±430） cm]较CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组水平运动距离大（P=0.033、0.037）.（4）免疫组织化学显示,正常组（0.408±0.014、0.405±0.011、0.406±0.012）、CUS＋氟西汀组（0.403±0.011、0.403±0.011、0.403±0.012）、CUS＋丰富环境组（0.406±0.015、0.399±0.013、0.406±0.017）、CUS＋氟西汀＋丰富环境组（0.407±0.015、0.401±0.010、0.407±0.013）MAP-2在海马CA1、CA3和齿状回区表达水平较CUS组（0.379±0.020、0.390±0.014、0.394±0.013）增加（均P＜0.05）.结论 氟西汀、丰富环境、氟西汀联合丰富环境均可能逆转CUS大鼠抑郁样行为,氟西汀联合丰富环境效果可能优于单独使用氟西汀或丰富环境;CUS大鼠海马CA1、CA3、齿状回区MAP-2表达水平可能降低,且可能被上述3种方法逆转.

丙烯醛对肺上皮细胞增殖活力及生物钟基因Per1蛋白表达的影响

目的研究丙烯醛对肺上皮细胞增殖活力的影响及其可能机制。方法选用A549和MLE15两种肺上皮细胞株作为模型,分别用PBS(对照组)和80μmol/L丙烯醛处理30 min。采用CCK-8试剂盒检测丙烯醛处理结束恢复培养12 h、24 h、36 h和48 h时细胞的增殖活力,Western blot检测丙烯醛处理结束恢复培养24 h时生物钟基因Per1的蛋白表达水平。检测在恢复培养阶段加入10 mg/L转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)处理对丙烯醛处理后的肺上皮细胞增殖活力及Per1蛋白表达的影响。结果80μmol/L丙烯醛刺激30 min可导致A549细胞及MLE15细胞增殖活力明显降低以及细胞Per1蛋白表达下降(P<0.05)。丙烯醛处理结束以后,在细胞恢复培养过程中添加10 mg/L TGF-β未明显改变丙烯醛诱导的细胞增殖活力的降低,但是肺上皮细胞中Per1蛋白的表达水平高于未添加TGF-β的丙烯醛处理组(P<0.05)。结论丙烯醛会导致肺上皮细胞增殖活力以及Per1表达量降低,TGF-β虽然不能逆转丙烯醛导致的细胞增殖活力的下降,但可以使Per1的表达得到一定程度的恢复。