丰富环境对抑郁大鼠行为学及海马组织中丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1表达的影响

目的探讨丰富环境(EE)对慢性不可预见性轻度应激(CUS)抑郁模型大鼠行为学及海马组织中丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)表达的影响,为抑郁症的治疗提供线索。方法 40只Sprague-Dawley大鼠随机分为对照组、CUS组、氟西汀组及EE组,每组10只。CUS组、氟西汀组、EE组大鼠分别给予8周的CUS,从第5周起EE组及氟西汀组大鼠分别给予EE干预及氟西汀灌胃4周;对照组大鼠正常环境饲养8周。采用体质量增加量、旷场试验、蔗糖偏好等评估各组大鼠行为学的变化,采用免疫印迹法检测大鼠海马组织中MKP-1蛋白的表达。结果各组大鼠造模前体质量、水平运动距离、直立次数、穿格次数、蔗糖偏好指数比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,造模后CUS组、氟西汀组及EE组大鼠体质量增加减少,水平运动距离、直立次数、穿格次数减少,蔗糖偏好指数降低(P<0.05);CUS组、氟西汀组及EE组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数及蔗糖偏好指数两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。氟西汀及EE干预后,CUS组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数、糖水偏好指数与对照组大鼠比较均减少(P<0.05);氟西汀组及EE组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数及蔗糖偏好指数与对照组比较差异均无统计学意义(P>0.05);氟西汀组和EE组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数及蔗糖偏好指数较CUS组均升高(P<0.05);EE组大鼠体质量增加、水平运动距离、直立次数、穿格次数及蔗糖偏好指数与氟西汀组比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与对照组比较,CUS组和EE组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达显著升高(P<0.05);氟西汀组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与CUS组比较,氟西汀组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达明显下调(P<0.05);EE组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达与CUS组比较差异无统计学意义(P>0.05)。与氟西汀组比较,EE组大鼠海马组织中MKP-1蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论 EE对大鼠抑郁样症状有显著的改善作用,但对海马组织中MKP-1蛋白表达无显著影响,EE可能不是通过影响MKP-1表达作用于抑郁症。

脑源性神经营养因子促进低血糖幼鼠海马神经干细胞的定向分化

背景:有研究表明脑源性神经营养因子可以维持神经元的存活、影响神经元的迁移,在体外可以促进神经干细胞的存活和分化。目的:探讨脑源性神经营养因子对低血糖幼鼠海马神经干细胞定向分化的作用。方法:取新生1d低血糖模型大鼠脑海马组织进行原代、传代及单细胞克隆培养。培养的细胞一部分进行神经干细胞鉴定,另一部分依据培养液中脑源性神经营养因子质量浓度的不同将单克隆细胞分为0,100,200μg/L组,取第4代细胞进行诱导分化,行神经元特异性烯醇化酶免疫荧光染色,计数阳性细胞比例。结果与结论:单克隆培养后3组细胞均呈巢蛋白阳性,诱导分化后细胞呈行神经元特异性烯醇化酶和胶质纤维酸性蛋白阳性;100,200μg/L组神经干细胞生长较快,且分化为神经元特异性烯醇化酶阳性细胞比例较高(P<0.05),但两组神经干细胞之间差异无显著性意义(P>0.05)。提示脑源性神经营养因子促进低血糖幼鼠海马神经干细胞向神经元定向分化。

RegⅠ在胃泌素促胃癌细胞体外增殖通路中的作用

目的探讨再生蛋白I(RegⅠ)在胃泌素刺激胃癌细胞增殖通路中的作用。方法根据RegⅠcDNA已知序列,在线设计3个小干扰RNA,并经基因库同源性比较,构建其RegⅠ-shRNA表达载体(pSUPER-EGFP-REG/1、pSUPER-EGFP-REG/2和pSUPER-EGFP-REG/3),利用脂质体2000转染试剂分别转染胃癌细胞BGC823细胞株、SGC7901细胞株,同时设转染空质粒的实验对照组和无质粒转染的空白细胞组。后经G418筛选建立稳定转染细胞株。RT-PCR检测RegⅠ基因mRNA的转录水平,四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测胃泌素孵育对胃癌细胞增殖的效应。结果酶切及测序鉴定,插入片段正确,3个RegⅠ-shRNA表达载体构建成功;RT-PCR显示,pSUPER-EGFP-REG/1可有效抑制RegⅠmRNA在胃癌细胞BGC823、SGC7901的转录。Western boltting结果显示,BGC823和SGC7901细胞的RegⅠ蛋白表达率分别下调到空载体对照组的(45±4)%和(53±4)%;MTT结果显示,RegⅠ基因表达抑制胃癌细胞系的增殖效率均降低(P<0.05)。胃泌素孵育后,胃癌细胞BGC823、SGC7901的增殖效率均增加(P<0.05),而RegⅠ基因表达抑制的胃癌细胞系增殖效率则无明显改变(P>0.05)。结论实验成功建立了RegⅠ基因表达抑制的胃癌细胞系;RegⅠ基因可能对胃泌素促胃癌细胞的增殖有促进的作用。

RegⅠ-shRNA载体对胃泌素促胃癌细胞BGC823增殖作用的影响

目的探讨再生蛋白Ⅰ(RegⅠ)在胃泌素刺激胃癌细胞增殖通路中的作用。方法构建3个RegⅠ-shRNA表达载体:pSUPER-EGFP-REG/1、pSUPER-EGFP-REG/2和pSUPER-EGFP-REG/3。分别转染胃癌细胞BGC823,G418筛选。RT-PCR检测RegⅠmRNA的转录水平,建立RegⅠ基因表达抑制胃癌细胞系。MTT法检测胃泌素孵育对胃癌细胞增殖的效应。结果 pSUPER-EGFP-REG/1可有效抑制RegⅠmRNA在胃癌细胞BGC823中的表达。胃泌素孵育前,RegⅠ基因表达抑制的胃癌细胞增殖能力较无基因表达抑制的胃癌细胞明显降低(P<0.05);胃泌素孵育后,胃癌细胞的增殖能力明显增加(P<0.05),而RegⅠ基因表达抑制的胃癌细胞增殖能力无明显改变(P>0.05)。结论成功建立了RegⅠ基因表达抑制的胃癌细胞系,RegⅠ基因可能对胃泌素促胃癌细胞的增殖有促进的作用。

二噁英的生殖毒性研究进展

二噁英对环境的污染和对人类的危害越来越引起全球的重视,目前已列入世界上最毒物质之一,有"毒中之王"的称号。因具有高毒性、难自然降解、生物富集效应、雌激素样作用等特性,给人类的生殖健康带来巨大的危害。动物实验表明其可导致胚胎畸形、胚胎死亡、生长发育迟缓、后代生殖能力下降,还可影响雌性排卵及激素分泌,雄性精液质量下降等,本文就二噁英对生殖系统的影响进行综述。

课堂教学与网络课程的应用之我见

课堂教学就是我们最传统的教学模式,教学主要时间都是在课堂上度过。但是随着计算机技术的日益发展,Internet网络不断改变着我们的生活方式,对于我们传统教学模式的冲击也是巨大的。如何去平衡"传统模式"与"网络模式"将会是一个不大不小的难题,本文探讨了两者的现状及一些存在的问题。我们只有根据两者及自身的优缺点来把握好平衡,才能使学生对知识的学习更加的全面和方便灵活。

盐酸异丙肾上腺素腹腔注射建立心肌缺血性坏死大鼠模型的最佳药物浓度研究

目的探讨盐酸异丙肾上腺素(ISO)诱导心肌缺血性坏死动物模型的最佳药物浓度。方法将42只健康雄性Sprague Dawley大鼠随机分为对照组和2、4、6、8、10 mg·kg^-1 ISO组,每组7只。2、4、6、8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠分别按照2、4、6、8、10 mg·kg^-1将ISO配成10 mL工作液进行腹腔注射,对照组大鼠给予同体积生理盐水腹腔注射,每日1次,连续7 d。每日注射后15 min及第8天麻醉大鼠稳定后监测各组大鼠心电图;腹腔注射结束的第2天开胸取心室血检测各组大鼠血清肌酸激酶(CK)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、乳酸脱氢酶(LDH)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)和ɑ-羟丁酸脱氢酶(ɑ-HBDH)水平,以辅助判断大鼠心肌缺血性坏死程度;取左心室心肌组织制备切片,苏木精-伊红染色,利用Image J图像分析软件分析心肌缺血坏死区面积百分比。结果ISO腹腔注射第7天,对照组大鼠心电图表现正常,2、4、6、8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠心电图均可见心肌缺血性改变。2、4 mg·kg^-1 ISO组大鼠心率高于对照组(P<0.05),8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠心率低于对照组(P<0.05);6 mg·kg^-1 ISO组大鼠心率与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05);其中,4 mg·kg^-1 ISO组大鼠心率加快,其心电图ST段呈弓背向上抬高,出现病理性Q波。与对照组比较,4、6、8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清AST、LDH、ɑ-HBDH显著升高(P<0.05),2、4、6、8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清CK、CK-MB显著升高(P<0.05)。与2 mg·kg^-1 ISO组比较,4、6、8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清AST、CK、CK-MB显著升高(P<0.05),6、8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清LDH显著升高(P<0.05),8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清ɑ-HBDH显著升高(P<0.05)。与4 mg·kg^-1 ISO组比较,6、8 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清CK显著升高(P<0.05),8 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清CK-MB显著升高(P<0.05)。与6 mg·kg^-1 ISO组比较,10 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清CK显著降低(P<0.05),8 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清CK-MB显著升高(P<0.05)。与8 mg·kg^-1 ISO组比较,10 mg·kg^-1 ISO组大鼠血清CK、CK-MB显著降低(P<0.05)。心肌组织病理学结果显示,ISO不同剂量组大鼠均出现心室肌细胞缺血坏死,4、6、8、10 mg·kg^-1 ISO组大鼠心肌缺血坏死区面积均大于2 mg·kg^-1 ISO组(P<0.05),其余组间两两比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论不同剂量ISO腹腔注射均可造成大鼠心肌缺血坏死性损伤,但4 mg·kg^-1 ISO腹腔注射制备心肌缺血性坏死大鼠模型的效果最佳。

上皮钠离子通道在肺水肿中的作用机制研究进展

肺泡及呼吸道表面的液体对维持正常肺功能至关重要,肺泡腔内的液体过多积聚形成肺水肿会损伤气体交换。肺泡上皮细胞中的上皮钠离子通道(ENaC)在肺泡表面液体转运中起重要作用。在成人肺中,肺上皮细胞的重吸收限制了急性肺损伤和心源性水肿患者肺泡水肿的程度。ENaC是Na+驱动的液体重吸收的主要参与者,是治疗肺水肿的合适靶点。本文就ENaC在肺水肿中的作用、调控机制进行综述,旨在为临床预防和治疗肺损伤提供理论支持。

慢性刺激大鼠海马微管相关蛋白-2的表达及氟西汀联合丰富环境的作用

目的 探讨慢性不可预见性刺激（chronic unpredictable stress,CUS）大鼠海马微管相关蛋白-2（microtubule associated protein-2,MAP-2）表达水平的变化,氟西汀联合丰富环境对CUS大鼠的作用.方法 将30只成年雄性Sprague-Dawle（SD）大鼠采用随机数字表法分为CUS组、正常组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组,每组6只.CUS组均孤养并接受6周CUS,正常组标准环境每笼3只群养6周,剩余3组接受6周CUS并于第3周末至第6周末分别氟西汀、丰富环境、氟西汀＋丰富环境干预,CUS前后及干预后以糖水消耗实验、体重测量、旷场实验对大鼠行为进行评估,以免疫组织化学法测定各组大鼠海马MAP-2表达水平.结果 （1）CUS前各组大鼠行为评估组间两两比较,糖水消耗、体重、水平运动距离、直立次数、粪便粒数差异均无统计学意义.（2）CUS后CUS组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组较正常组糖水消耗少、体重增加少、水平运动距离小（均P＜0.05）.（3）干预后正常组、CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组、CUS＋氟西汀＋丰富环境组较CUS组糖水消耗多、体重增加多、水平运动距离大（均P＜0.05）;正常组[（84±3）g,（6 687±664） cm]较CUS＋氟西汀组[（75±4）g,（5 859±624） cm]、CUS＋丰富环境组[（77±8）g,（5 876±784） cm]体重增加多（P=0.005、0.029）、水平运动距离大（P=0.028、0.031）;CUS＋氟西汀＋丰富环境组[（6 657±430） cm]较CUS＋氟西汀组、CUS＋丰富环境组水平运动距离大（P=0.033、0.037）.（4）免疫组织化学显示,正常组（0.408±0.014、0.405±0.011、0.406±0.012）、CUS＋氟西汀组（0.403±0.011、0.403±0.011、0.403±0.012）、CUS＋丰富环境组（0.406±0.015、0.399±0.013、0.406±0.017）、CUS＋氟西汀＋丰富环境组（0.407±0.015、0.401±0.010、0.407±0.013）MAP-2在海马CA1、CA3和齿状回区表达水平较CUS组（0.379±0.020、0.390±0.014、0.394±0.013）增加（均P＜0.05）.结论 氟西汀、丰富环境、氟西汀联合丰富环境均可能逆转CUS大鼠抑郁样行为,氟西汀联合丰富环境效果可能优于单独使用氟西汀或丰富环境;CUS大鼠海马CA1、CA3、齿状回区MAP-2表达水平可能降低,且可能被上述3种方法逆转.