试论药学和医学专业《实验动物学》的教学改革

在药学和医学专业本科生及科学教育工作者中普及《实验动物学》知识具有非常重要的意义。但是目前很多院校在开设《实验动物学》课程中存在着诸多问题,教学现状令人担忧。为改变这种状况,我们应从重视实验动物课程教学、制定全国统一的教学大纲和编写统一教材、加强专业化的《实验动物学》师资建设等多种途径出发,提高《实验动物学》的教学质量,培养合格人才。

医学院校本科生毕业设计中存在的问题及对策

毕业设计是本科教育的最后一个教学环节,对培养学生的实践能力和创新精神具有重要作用,其质量也是衡量教学品质的重要依据。由于受师资、研究生考试、就业等各种因素的影响,医学院校本科生毕业设计未得到足够重视,整体质量不高。应针对医学院校本科生毕业设计工作开展过程中出现的问题,制定相应对策,以提高本科生毕业设计质量。

实验动物饲养管理中的动物福利

本文简要介绍了动物福利和实验动物福利,及我国实验动物福利当前的现状。着重指出了在饲养管理中影响实验动物福利的因素和对策。

温度、湿度、饲养密度、噪音对实验动物福利的影响

主要阐述了温度、湿度、饲养密度及噪音四种因素对实验动物福利各方面的影响,包括实验动物的舒适度、生长发育、繁殖、健康等。

原子吸收光谱法测定实验豚鼠心脏等组织中的金属元素

Na、K、Mg是生物体所必须的常量元素,Zn、Fe、Cu是生物体所必须的微量元素,它们都是生命活动的物质基础之一,这些元素一旦在体内失去平衡将会引起生物体代谢紊乱和机体失调,所以测定生物体内这些元素含量以及评价生命活动质量是有重要意义的。本文研究了原子吸收光谱法(FAAS)测定这些元素的实验条件,测定了豚鼠的心、脾、肺、肾、肝中所含有的K、Na、Mg、Fe、Zn、Cu6种金属元素及其分布状况。相对标准偏差(RSD)小于5.0%,平均回收率在96.4%—105.3%之间,方法快速简便,结果准确。为研究Na、K、Mg、Zn、Fe、Cu在实验豚鼠组织中的含量提供了有用的数据。

低剂量γ-射线及香烟对仔鼠发育和反射行为的影响

母鼠暴露于低剂量γ－射线（照射源６０Ｃｏ，剂量为０、０．２５、０．５、１．０ＧＹ）及香烟烟雾水溶物（浓度为０、０．５、１．０、１．５、２．０支／只），可使子代小鼠发育（开眼、张耳、生毛、出牙）及反射行为（平面翻正、空中翻正、视觉定向、听觉惊愕）出现不同程度的延迟。并且低剂量γ－射线与香烟烟雾水溶物还有极显著的协同效应。

睾酮多克隆抗体的制备及免疫学检测方法的建立

采用优化的碳化二亚胺法制备睾酮(TES)人工抗原,免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体,建立间接竞争ELISA标准曲线。标准曲线在PBS中的线性检测范围为0.096～92.200 ng/mL,相关系数R2=0.972 2,半数抑制浓度(IC50)为2.800 ng/mL,最低检测限(LOD)为0.035 ng/mL;抗体与去甲睾酮的交叉反应率为22.3%,与其他检测化合物的交叉反应很小或忽略不计。羊尿20倍稀释后进行添加回收试验,其添加值与检测值的相关系数为0.985 2。因此,该免疫学方法可用于动物尿液中睾酮残留水平的定量分析。

诺氟沙星单克隆抗体的制备及初步应用

采用优化的碳二亚胺法制备诺氟沙星(NOR)人工抗原,紫外扫描和红外光谱图表明人工抗原偶联成功。采用细胞融合技术筛选抗NOR单克隆抗体(NORmAb)杂交瘤细胞株,体内诱生腹水法制备NORmAb,建立间接竞争ELISA(icELISA)标准曲线。结果表明,筛选的3株杂交瘤细胞分泌的抗体为IgG1亚型,具k轻链;建立的icELISA标准曲线在PBS中的的线性检测范围为0.04～43.6ng/mL,IC50值为0.62ng/mL,检测限(LOD)为0.02ng/mL;抗体与环丙沙星(87.2%)、培氟沙星(76.9%)、依诺沙星(66.8%)、恩诺沙星(48.6%)和洛美沙星(36.6%)有较高的交叉反应率;禽肉基质中NOR添加回收率满足检测要求。

睾酮单克隆杂交瘤细胞株的筛选及性能鉴定

为建立大批量样品中睾酮残留的检测方法,采用细胞融合技术、间接ELISA和间接竞争ELISA(icELISA)等方法,对睾酮单克隆杂交瘤细胞株进行了筛选及性能鉴定。结果表明:筛选出5株(T2C3,T2D9,T3A5,T4B1、T4E8)杂交瘤细胞,抗体亚类均为IgG1型,具k轻链,亲和常数为4.38×108～5.24×109 L/mol;腹水纯化后的抗体效价和灵敏度(IC50)分别为0.64×105～2.56×105和1.58～2.92ng/mL。以T2D9细胞株建立icELISA标准曲线,其线性范围为0.06～63.5ng/mL,检测限和IC50值分别为0.04和1.55ng/mL。

家蝇室内种群孵化特征观察

目的 观察家蝇室内种群在整个产卵期内的孵化特征。方法 观察家蝇室内种群整个产卵期内的第4代及第5代卵块每天孵化幼虫数量和未孵出数量,计算每天的孵化率,并进行分析。结果 第4代孵化幼虫数量高峰出现在产卵期第7天,第11天后孵出幼虫数量持续在低水平;第5代孵化幼虫数量高峰出现在产卵期第4天,第8天后孵出幼虫数量持续在低水平。第4代及第5代孵化率前8天维持在较高水平,后期孵化率起伏较大。结论 家蝇室内种群第4代及第5代在产卵期前期幼虫孵化数量以及孵化率相对较高且较稳定。

家蝇室内连续饲养6代蛹期特征观察

为观察家蝇室内连续饲养的各代蛹期特征 ,将家蝇引入室内 ,采用人工配制的幼虫饲料在室内进行连续饲养 ,分别随机挑取室内第 1～ 6代 1日龄蛹 ,及时称量鲜蛹重及干蛹重 ,测量蛹长 ,并记录各代羽化率。结果发现 ,第 1代羽化率为 70 ,其余几代羽化率均高于 90。第 5代蛹长显著性小于第 2、3代蛹长 ,第 6代蛹长显著性小于第 1～ 3代蛹长。第 5代鲜蛹重显著性小于第 2、3代鲜蛹重 ,第 6代鲜蛹重显著性小于第 1～ 5代鲜蛹重。第 4～ 6代干蛹重均显著性小于第 2、3代干蛹重。提示室内饲养的家蝇各代羽化率稳定在较高水平 ,而蛹期形态从第 4代开始有减小趋势。

来航鸡FOXL2蛋白单克隆抗体的制备

目的:制备来航鸡FOXL2蛋白的单克隆抗体。方法:利用生物信息学的方法分别预测来航鸡FOXL2蛋白最有可能的线性表位,并人工合成多肽,高效液相色谱分析其纯度,与KLH偶联后免疫小鼠制备其单克隆抗体,用间接ELISA方法和免疫印迹进行筛选,然后对筛选出来的细胞株进行一般性质测定、亲和常数测定、IC50测定。结果:合成多肽纯度>95%,细胞融合后,其平均融合率为75%,并用间接ELISA方法和Western blot筛选出1条可与FOXL2蛋白发生明显反应的细胞株C2;经测定,C2细胞株上清效价为1/128,腹水效价为1/256,其亚型属于IgG1,杂交瘤细胞染色体为102条,腹水单抗的蛋白含量为1.576 g/L,其亲和常数为2.12×106L/mol,IC50值为0.082 47μg/L。结论:成功制备了FOXL2蛋白单克隆抗体,为下一步深入研究FOXL2蛋白奠定基础。

交联壳聚糖对亚硝酸根离子的吸附性能

以壳聚糖为原料,环氧氯丙烷为交联剂制备出交联壳聚糖,并用红外光谱对其结构进行表征。以8-羟基喹啉作偶合试剂分光光度法测定吸附后的亚硝酸根离子的浓度,研究了交联壳聚糖对亚硝酸根离子的吸附性能。结果表明,交联壳聚糖的用量、吸附时间、亚硝酸根离子的初始浓度、吸附温度和溶液pH值都对交联壳聚糖吸附亚硝酸根离子的性能有较大影响,满足实验所得的最佳吸附条件时,吸附率可达92.5%;而在相同条件下,壳聚糖对亚硝酸根离子的吸附率却只有10%左右。壳聚糖交联壳聚糖对亚硝酸根离子的吸附机理,既有固体表面的物理吸附,也有溶液中离子之间的静电吸附,即质子化的阳离子CCTS-NH3+与阴离子NO2-的静电引力吸附。

不同条件下一氧化氮合酶阳性神经元在脊髓背角浅层表达

目的探讨不同条件下一氧化氮合酶(NOS)阳性神经元在脊髓背角浅层的分布及数量变化,分析脊髓背角浅层NOS阳性神经元与针刺镇痛的关系。方法应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶反应,观察在正常情况下、疼痛刺激下、电针刺激下及疼痛加电针刺激下NOS阳性神经元在脊髓背角浅层的表达。结果正常组脊髓背角浅层有少量NOS阳性细胞;疼痛刺激组NOS阳性细胞数目较正常组增多(P<0.01);电针刺激组NOS阳性细胞较正常组无明显变化(P>0.05);疼痛刺激加电针刺激组NOS阳性细胞数较疼痛刺激组明显减少(P<0.01),而与正常组相比无明显变化(P>0.05)。结论抑制疼痛刺激引起的NOS阳性细胞数目增多,可能是电针镇痛的机制之一。

电针对福尔马林炎性痛大鼠脊髓中央管周围灰质神经元一氧化氮合酶表达的影响

目的探讨电针对福尔马林炎性痛大鼠脊髓中央管周围灰质神经元一氧化氮合酶(NOS)表达的影响。方法应用还原型尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸脱氢酶法,观察在正常情况下(正常组)、疼痛刺激下(疼痛刺激组)、电针刺激下(电针刺激组)、疼痛加电针刺激下(疼痛+电针刺激组)NOS阳性神经元在脊髓中央管周围灰质的表达。结果正常组脊髓中央管周围灰质有少量NOS阳性细胞,疼痛刺激组NOS阳性细胞数目较正常组增多(P<0.01),电针刺激组NOS阳性细胞与正常组比较差别无统计学意义(P>0.05);疼痛+电针刺激组NOS阳性细胞数较疼痛刺激组明显减少(P<0.01),而与正常组相比差别无统计学意义(P>0.05)。结论抑制疼痛刺激引起的NOS阳性细胞数目增多,可能是电针镇痛的机制之一。

家畜肢体骨折固定架

传统的骨折固定为绷带加竹片、木条或石膏绷带。这样固定操作及拆除都费力。并且开放性骨折又不能在中途换药,往往效果不佳,有时由于中途不能换药造成感染,以致治疗失败。此固定架取料方便,操作简单,又能随时对患处局部换药,以达到事半功倍之功效。

单纯电针刺激对大鼠行为的影响

目的观察电针刺激对大鼠行为学的影响,以探讨电针刺激在镇痛方面可能的机制。方法应用动物行为学方法观察单纯电针刺激对大鼠行为学的影响。结果疼痛组第一相、第二相自发缩足反射次数均较正常组明显增多(P<0.01),单纯电针刺激组第一相和第二相自发缩足反射次数较正常组无明显变化(P>0.05);疼痛刺激加电针刺激组与正常组相比,第一相缩足反射次数明显增多(P<0,01),而第二相缩足反射次数无明显变化(P>0.05);与疼痛刺激组相比,第一相缩足反射次数无明显变化(P>0.05),第二相缩足反射次数明显减少(P<0.01)。结论电针刺激可以抑制疼痛,但机制尚待进一步研究。

火焰原子吸收光谱法测定实验大鼠心脏等组织中的Na、K和Mg含量

采用空气-乙炔焰原子吸收光谱法分别测定了老年、青年和幼年雌雄性实验大鼠的心、肺、脾、肾4种组织24个样品中的Na、K、Mg 3种常量元素,大鼠组织采用浓硝酸和高氯酸体积比为4:1混酸进行消解。测得相对标准偏差(RSD)小于5.5%,平均回收率大于96.6%,方法简便可靠。

地克珠利尿素固体分散体的制备与质量研究

为了制备地克珠利尿素固体分散体并提高其溶解度,试验采用溶剂熔融法制备地克珠利尿素固体分散体,并用显微鉴别法、差示热分析法和溶出速率法验证,同时还建立紫外含量测定方法,比较地克珠利原料、物理混合物和地克珠利尿素固体分散体的溶解度和累积溶出度。结果表明:地克珠利原料、物理混合物、固体分散体的差示热曲线和累积溶出度有较大区别,固体分散体可以显著提高药物的溶解度,在5.0～20.0μg/mL浓度范围内吸光度与浓度间线性关系良好。说明地克珠利尿素固体分散体制备方法简单,质量可控,可以显著提高药物的溶解度,便于临床应用。