医学寄生虫实验教学中标本短缺解决办法的尝试

为改变目前寄生虫学实验教学标本短缺、试验内容及形式不能满足临床医学生未来从医需要的现状,近年来在寄生虫学实验教学中实施了标本、活虫体、寄生虫感染动物模型、现场调查相结合的寄生虫学实验教学新模式.

医学寄生虫学立体化教学模式的探索

结合现行医学寄生虫学教学中存在的问题,探索寄生虫学立体化教学的新模式,寻求一种先进、有效的教学手段和方法,提高教学效果,从而提高学生实践能力和创新能力,加深对寄生虫病的认识。

寄生虫学实验教学模式的改进

随着医学寄生虫学学科的不断发展,传统的寄生虫学实验教学模式已经不能满足教学的需要。为克服传统实验教学模式的弊端,新乡医学院寄生虫学实验室开展了以活体教学、实验教学与社会实践相结合以及综合模式实验教学为特色的实验教学改革。通过学生自做观察活体标本,参加寄生虫病调查,多媒体优化辅助教学等手段强化实验教学效果。学生座谈会和问卷调查结果显示采用新教学模式后学生的学习兴趣、综合素质、对教师教学效果的满意度均比之前明显提高。

成人专升本人体寄生虫学教学的改革

目的对成人专升本人体寄生虫学教学进行改革,满足培养实用性医学人才的需要。方法根据成人专升本学生的知识结构特点调整教学内容,将传统的寄生虫生物学知识讲授为主转变为寄生虫病学知识讲授为主,同时注重知识的补缺和更新;改变原来单一的教学方式,充分利用现代教学媒体,直观、形象地展示教学内容,并增加病例讨论和综合思考题练习等内容;加强师生间的交流与沟通,及时解决学生在学习和工作中遇到的寄生虫学或寄生虫病学相关问题。结果学生学习兴趣和学习效率明显提高,掌握了更为实用的寄生虫病学知识,对知识的综合应用能力明显提高。结论改革后寄生虫学教学内容更趋于合理,符合培养高素质实用性医学人才的需要。

活体教学在人体寄生虫实验教学中的应用

为了提高学生学习积极性及解决实验教学过程中的各种问题,我们实施了人体寄生虫学实验教学改革,引入活体教学模式。几年来,活体教学取得了可喜的成绩:使实验教学更贴近于临床寄生虫病的诊断、提高了学生的学习积极性和动手能力、有效解决了实验教学中标本不足的难题、锻炼了教师队伍。

丝光绿蝇抗菌肽的热稳定性研究

目的探讨高温处理对丝光绿蝇抗菌肽抗菌活性的影响。方法丝光绿蝇Ⅲ龄幼虫针刺体壁诱导后,48h后提取其血淋巴,分别于100、80和60℃水浴0、0.5、1、3、5min等不同时间后,观察不同温度处理不同时间后对溶壁微球菌的抑菌效果。结果丝光绿蝇幼虫经针刺诱导的抗菌肽100℃水浴1min仍有抗菌活性,100℃处理3min后活性丧失;80及60℃水浴5min后仍有抗菌活性。结论针刺诱导的丝光绿蝇抗菌肽的抑菌活性具有一定的热稳定性。

丝光绿蝇抗菌物质针刺诱导及其性质研究

目的 探讨针刺体壁对丝光绿蝇抗菌物质的诱导表达。并研究丝光绿蝇免疫血淋巴的性质。方法 丝光绿蝇3龄幼虫针刺体壁处理后,分别于第0、12、24、36、48、60、72、84h提取血淋巴,以金黄葡萄球菌为指示菌,采用平板滤纸片法作抑菌试验,用于显示丝光绿蝇抗菌物质的诱导表达,以抑菌圈直径表示抑菌活力的大小。提取诱导后48h的血淋巴,设置3μl、5μl、7μl不同的血淋巴加样量实验组,记录不同加样量对金黄葡萄球菌的的抑菌效果;设置不同稀释浓度,记录不同浓度的血淋巴对金黄葡萄球菌的抑菌活力。诱导后48h的血淋巴置于冰箱保存后,设置36℃和100℃不同解冻温度,观察不同温度解冻的血淋巴对金黄葡萄球菌和大肠杆菌的抑菌效果。诱导后48h的血淋巴,100℃水浴3min,观察其对金黄葡萄球菌的抑菌活力。提取诱导后48h的血淋巴,观察其对大肠杆菌、金黄葡萄球菌、白色葡萄球菌、变形杆菌、伤寒杆菌、副伤寒杆菌、枯草杆菌、溶壁微球菌等8种细菌的抑菌效果。结果 丝光绿蝇幼虫针刺体壁处理后,对金黄葡萄球菌的抑菌活力高峰出现在处理后48h。平板滤纸片法抑菌试验中,以加7μl血淋巴的抑菌效果最佳。诱导后48h的血淋巴置于冰箱保存后,36℃和100℃不同温度解冻,对金黄葡萄球菌和大肠杆菌均有抑菌效果,36℃解冻效果好于100℃。?

日本血吸虫循环抗原动态消长的实验研究

目的：了解日本血吸虫三类循环抗原（ＣＡｇ）在感染家兔的动态变化及治疗后的消长情况。方法：制备日本血吸虫的三株单抗，以辣根过氧化物酶标记，分别建立检测日本血吸虫肠相关抗原（ＧＡＡ）、膜相关抗原（ＭＡＡ）和可溶性虫卵抗原（ＳＥＡ）的斑点酶联免疫吸附试验（ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ），观察感染日本血吸虫家兔血中三类抗原的动态变化情况。结果：家兔感染后第４ｗｋ，有３９％家兔血中ＧＡＡ呈阳性反应，而仅８．６％家兔ＭＡＡ、ＳＥＡ呈阳性反应，第８ｗｋ三类ＣＡｇ均呈阳性反应，并于第１０ｗｋ左右达高峰。未治疗组家兔直至感染后第２７ｗｋ，血中三类ＣＡｇ一直维持较高水平。感染后第９ｗｋ家兔接受吡喹酮治疗，治疗后第４ｗｋ，ＣＡｇ水平开始下降，治疗后第６ｗｋ有１０％家兔ＳＥＡ阴转，治疗后第８ｗｋ，ＧＡＡ阴转率为２０％，ＳＥＡ为７０％，ＭＡＡ为８０％，治疗后第１４ｗｋ除１例外，三类ＣＡｇ全部阴转。结论：ＧＡＡ早期诊断效果较好，而ＭＡＡ和ＳＥＡ在治疗后较ＧＡＡ消失快。

家蝇抗菌物质针刺诱导研究

目的探讨针刺体壁对家蝇抗菌物质诱导表达的规律。方法室内饲养的家蝇Ⅲ龄幼虫,针刺体壁处理后,分别于第0、24、48、72、96h记录幼虫存活率,并提取其血淋巴,以金黄色葡萄球菌和溶壁微球菌作指示菌,采用平板法做抑菌试验,37℃恒温24h观察抑菌圈,并以抑菌圈直径表示抗菌活力的大小,借以指示家蝇抗菌物质的诱导产生规律。结果经针刺诱导后,家蝇幼虫存活率逐渐降低,提取的血淋巴对金黄色葡萄球菌和溶壁微球菌的抑菌活力峰均出现在诱导后48h。结论针刺体壁可诱导家蝇产生抗菌物质,血淋巴收集在诱导后48h最为合适。

人心肌特异性肌钙蛋白的提取与鉴定

目的从人心肌组织中提取和纯化心肌特异性肌钙蛋白，为建立心肌梗塞病人免疫诊断试剂准备抗原。方法取新鲜人心室肌组织经捣碎离心提取，ＤＥＡＥ５２柱层析纯化，ＳＤＳ－ＰＡＧＥ凝胶电泳鉴定。结果１００ｇ心室肌可提取３７ｍｇ纯品肌钙蛋白。结论本次提取的心肌特异性肌钙蛋白纯度较高，能作抗原使用。

河南蜂胶对溶壁微球菌的抑菌作用

目的 探讨河南蜂胶对溶壁微球菌的抑菌效果。方法 采用琼脂平板扩散法 ,以溶壁微球菌为实验菌种 ,设置不同的蜂胶稀释度组 ,每组 3次重复 ,记录不同稀释度的蜂胶对溶壁微球菌 2 4 h的抑菌效果。结果 河南蜂胶原液从 31.0 %倍比稀释至 1∶ 5 12 ,9个稀释处理组对溶壁微球菌 2 4 h的抑菌环直径依次分别为 :(2 2 .83± 3.5 1)、(17.6 7± 2 .0 8)、(16 .33± 1.4 4 )、(16 .75± 1.0 6 )、(12 .6 7± 2 .89)、(9.6 7± 1.15 )、(7.83± 1.4 4 ) mm、0、0。结论 河南蜂胶稀释度降低 ,抑菌环直径变小 ,最小可观察到抑菌环的稀释度为 1∶ 12 8。

膳食矿物质与骨密度关系调查

目的 研究老年人膳食中矿物质含量对骨密度 (BMD)的影响 ,探讨防治老年骨质疏松的措施。方法 对 30 9例 6 0岁以上老人进行了膳食调查及健康检查。结果 老年女性骨矿物质含量 (BMC)和骨密度 (BMD)显著低于男性。健康老人平均每日摄入钙、锰、铜、硒的量男性均显著高于女性。OP患者与同性别健康老人每日矿物质摄入量相比 ,OP组钾、钙、镁、铁、锰、锌、磷、来源于奶的钙 (简称奶钙 )、硒摄入量均显著低于同性别健康老人组 ,BMD与钾、钙、镁、锌、铜、磷、硒、奶钙摄入量和钙磷比值均呈显著正相关。结论 膳食矿物质与BMD存在一定的关系 ,膳食钾、钙。

弓形虫感染家兔血液中虫体的动态观察

目的探明虫体在家兔血液中动态变化情况。方法用RH株弓形虫速殖子105个/只的剂量腹腔感染雄性家兔16只。在家兔感染前后分别采集家兔血液,抗凝处理后,-40℃冻存备用,用实时定量PCR检测弓形虫感染家兔血液中弓形虫DNA,依据对照计算虫体拷贝量,绘制感染后时间与血液中虫体含量的动态曲线图。结果雄兔弓形虫感染后4d血液中即可检测到虫体DNA,血液中虫体含量为217.887×103个/ml,血液中虫体含量在感染后8 d达到高峰期,血液中虫体含量为248.019×103个/ml,然后虫体含量逐渐下降,在感染后121 d雄兔血液中虫体密度为1.45×103/ml。结论弓形虫感染雄兔血液中虫体含量随感染后时间不同而变化。

丝光绿蝇抗菌肽针刺诱导及初步电泳分离

目的探讨丝光绿蝇抗菌肽的诱导及电泳分离方法。方法丝光绿蝇3龄幼虫针刺体壁诱导后,第48小时提取其血淋巴,设置3、5、7、10μl不同的加样量和pH值6.0、6.5、7.0的琼脂平板,观察对溶壁微球菌的抑菌效果。置于100、80℃水浴30s、1、3和5min后,观察不同温度处理不同时间后的去杂蛋白效果和对溶壁微球菌的抑菌效果,并对各样品进行电泳分离。结果随加样量增加抑菌环直径增大,10μl环太大易变形,不易测量,以加7μl血淋巴对溶壁微球菌的抑菌效果最佳。平板pH值6.0时,对溶壁微球菌的抑菌环直径最大,随pH值增加而抑菌环直径减小。血淋巴100℃水浴30s、1min仍有抑菌活性,处理3和5min无抑菌活性;80℃水浴30s至5min均有抑菌活性,电泳显示100℃处理3和5min的样品与其他相比缺少2条蛋白区带。结论针刺诱导的丝光绿蝇抗菌肽在酸性条件下抑菌活性更强,分离时血淋巴预处理采用80℃水浴1-3min去杂蛋白效果较好,诱导的血淋巴100℃处理3和5min即丧失抗菌活性,电泳显示缺少2条区带,此2条差异区带可能为抗菌肽组分。

川芎嗪对缺氧小鼠的保护作用

目的 探讨川芎嗪对常压缺氧和化学性缺氧小鼠的保护作用。方法 昆明种小鼠 40只 ,体重 2 0± 2g ,随机分成 4组 ,对照组腹腔注射生理盐水 ,实验组分 2 5mg·kg-1、5 0mg·kg-1、10 0mg·kg-13个剂量组注射川芎嗪 ,30min后 ,放于缺氧瓶内 ,观察小鼠存活时间 ;化学性缺氧动物只数、分组、给药同上 ,30min后分别腹腔注射氰化钾和亚硝酸钠 ,观察小鼠存活时间。结果 川芎嗪各组均能显著延长常压缺氧小鼠的存活时间 (P <0 .0 1) ;5 0mg·kg-1和10 0mg·kg-1川芎嗪对亚硝酸钠中毒小鼠的存活时间有显著延长作用 (P <0 .0 1) ;10 0mg·kg-1川芎嗪能显著延长氰化钾中毒小鼠的存活时间 (P <0 .0 1)。

低温对家蝇卵及蛹的影响

目的探讨低温对家蝇卵孵化率以及蛹羽化率的影响。方法室内连续饲养的家蝇第4代卵,置于2℃分别处理1、2、3、4和5d后,取出置于室内(26℃)孵化,记录处理不同时间后的孵化率。第4代1日龄蛹和3日龄蛹,分别置于2℃和6℃处理1、2、3、4和5d后,取出置于室内羽化,记录不同日龄以及不同时间的低温处理后的羽化率。结果家蝇卵经不同时间2℃低温处理后的孵化率依次为(91.52±7.70)%、(85.93±18.99)%、(48.52±19.48)%、0、0;家蝇1日龄蛹经不同时间2℃低温处理后的羽化率依次为(75.00±13.54)%、(51.25±13.15)%、(30.00±15.81)%、(6.25±6.29)%、(6.25±4.79)%;1日龄蛹经不同时间6℃低温处理后的羽化率依次为(88.75±4.79)%、(66.25±10.31)%、(40.00±12.91)%、(37.50±18.48)%、(12.50±6.45)%;3日龄蛹经不同时间2℃低温处理后的羽化率依次为(90.0±7.07)%、(78.75±11.09)%、(57.50±9.57)%、(61.25±11.09)%、(32.50±22.55)%;3日龄蛹经不同时间6℃低温处理后的羽化率依次为(92.50±5.00)%、(90.00±10.80)%、(88.75±2.50)%、(90.00±5.77)%、(66.25±10.31)%。结论家蝇卵经2℃低温处理4d后即不能孵化幼虫,卵对低温的耐受力比蛹弱。温度越低,蛹羽化率越低,低温处理时间越长,蛹羽化率越低;蛹日龄越大。

蜂胶对链球菌的抑菌实验

[目的]了解河南蜂胶对3种链球菌的抑菌作用。[方法]设6个不同pH组(蜂胶浓度31%)和8个不同蜂胶浓度组(pH5.5),琼脂平板扩散法记录蜂胶对甲型链球菌、乙型链球菌和丙型链球菌的抑菌效果。[结果]河南蜂胶对甲型链球菌和乙型链球菌有明显的抑菌环产生,对丙型链球菌无明显的抑菌环。河南蜂胶对甲型链球菌和乙型链球菌的抑菌环直径随pH增加而减小,随蜂胶浓度降低而减小。[结论]河南蜂胶对丙型链球菌无明显的抑菌活性,对甲型链球菌和乙型链球菌有明显的抑菌环活性,抑菌活性随pH增加和浓度降低而减弱。