SIRT6在二乙基亚硝胺诱导小鼠自发肝癌中的作用

目的探讨SIRT6在二乙基亚硝胺(DEN)诱导小鼠自发肝癌中的作用。方法选取Huh7-sirt6细胞和Huh7-GFP细胞,常规培养,细胞计数试剂盒(CCK-8)法检测过表达SIRT6对肝癌细胞体外增殖的影响。选取Wt小鼠和TgSIRT6小鼠各1只,Western blot法检测TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6表达;另选取15日龄清洁级无病原体全身性过表达SIRT6转基因(TgSIRT6)小鼠20只(雄性14只,雌性6只)和C57BL6/J野生型(Wt)小鼠18只(雄性12只,雌性6只)为研究对象,将小鼠分为TgSIRT6-DEN组16只(雄性10只,雌性6只)、Wt-DEN组14只(雄性8只,雌性6只)、TgSIRT6对照组4只(雄性)和Wt对照组4只(雄性)。TgSIRT6-DEN组和Wt-DEN组小鼠腹腔注射DEN25 mg·kg-1;TgSIRT6对照组和Wt对照组小鼠腹腔注射相同剂量的生理盐水。给药后48周颈椎脱臼法处死各组小鼠,取肝脏,观察肝脏颜色、大小、质地及有无癌变结节,记录肝脏肿瘤的大小、数量,并行肝肿瘤组织苏木精-伊红染色。结果细胞培养第4天,Huh-SIRT6细胞增殖速度显著低于Huh-GFP细胞(P<0.05)。Wt小鼠和TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6的表达量分别为0.247±0.055和1.178±0.037,TgSIRT6小鼠肝脏组织中SIRT6的表达量高于Wt小鼠(P<0.05)。TgSIRT6对照组和Wt对照组小鼠肝脏中未观察到肿瘤;TgSIRT6-DEN组雄鼠和雌鼠的致瘤率分别为80%(8/10)和33%(2/6),Wt-DEN组雄鼠和雌鼠的致瘤率分别为100%(8/8)和83%(5/6);TgSIRT6-DEN组雄鼠和雌鼠肿瘤数量及最大肿瘤直径均小于Wt-DEN组(P<0.05)。HE染色结果显示,肿瘤为肝细胞癌。结论肝细胞中SIRT6过表达能抑制DEN诱发的肝脏肿瘤的形成。