同源盒基因A7在胶质瘤组织中的表达及其对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨同源盒基因A7(HOXA7)在脑胶质瘤组织的表达及其对胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响。方法选择2010年9月至2016年8月新乡医学院第一附属医院神经外科手术切除的46例神经胶质瘤标本和10例颅脑外伤手术切除的正常脑组织,应用实时荧光定量聚合酶链式反应检测脑胶质瘤组织和正常脑组织中HOXA7 mRNA相对表达量。选取对数生长期U251细胞随机分为空白对照组、无义序列对照组和HOXA7 siRNA组,空白对照组细胞不进行转染,无义序列对照组细胞转染无义序列Scrambled小干扰RNA(siRNA),HOXA7 siRNA组细胞转染HOXA7 siRNA;应用实时荧光定量聚合酶链式反应检测3组细胞中HOXA7 mRNA相对表达量,细胞计数盒-8增殖实验检测3组细胞增殖活力,流式细胞仪检测3组细胞的细胞周期及凋亡率。结果高级别脑胶质瘤中HOXA7的mRNA相对表达量显著高于低级别脑胶质瘤和正常脑组织,低级别脑胶质瘤中HOXA7 mRNA相对表达量显著高于正常脑组织(P<0.05)。HOXA7 siRNA组U251细胞中HOXA7 mRNA相对表达量显著低于空白对照组和无义序列对照组(P<0.05),空白对照组与无义序列对照组U251细胞中HOXA7 mRNA相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。培养24、48、72、96 h时,HOXA7 siRNA组U251细胞增殖活力显著高于空白对照组和无义序列对照组(P<0.001);空白对照组与无义序列对照组U251细胞增殖活力比较差异无统计学意义(P>0.05)。HOXA7 siRNA组G_(0)/G_(1)期U251细胞占比显著高于空白对照组和无义序列对照组(P<0.05);空白对照组与无义序列对照组G_(0)/G_(1)期U251细胞占比比较差异无统计学意义(P>0.05)。HOXA7 siRNA组S期U251细胞占比显著低于空白对照组和无义序列对照组(P<0.05);空白对照组和无义序列对照组S期U251细胞占比比较差异无统计学意义(P>0.05)。HOXA7 siRNA组G_(2)/M期U251细胞占比显著高于空白对照组和无义序列对照组(P<0.05);空白对照组与无义序列对照组G_(2)/M期U251细胞占比比较差异无统计学意义(P>0.05)。HOXA7 siRNA组U251细胞凋亡率显著高于空白对照组和无义序列对照组(P<0.05),空白对照组与无义序列对照组U251细胞凋亡率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论HOXA7在脑胶质瘤组织中呈高表达,且随着脑胶质瘤级别的增加其表达水平显著增高;HOXA7可能通过促进脑胶质瘤细胞的增殖能力和抑制脑胶质瘤细胞的凋亡,参与脑胶质瘤的发生发展。

芒果苷通过PI3K/Akt/mTOR通路对蛛网膜下腔出血后神经细胞的保护作用

目的探讨芒果苷(MF)在蛛网膜下腔出血(SAH)后早期阶段对神经细胞的保护作用及机制。方法采用小鼠来源神经瘤母细胞(Neuro-2a细胞)和氧合血红蛋白(OxyHb)建立体外SAH模型,分为对照组、蛛网膜下腔出血组(SAH)及芒果苷干预组(MF+SAH)3组,利用免疫荧光检测受损线粒体与溶酶体的结合;利用JC-1和DCFH-DA分别检测线粒体膜电位(Δψm)和活性氧(ROS);Western blot分别检测细胞内磷脂酰肌醇-3-激酶(PI3K)、蛋白激酶B(Akt)和雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达,胞浆、线粒体中凋亡相关蛋白淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl2关联X蛋白(Bax)、细胞色素C(Cyt-C)和Caspase-3的表达。结果与对照组相比,SAH组线粒体膜电位(Δψm)明显去极化(P<0.05),细胞内ROS水平增多(P<0.01),p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达水平显著减少(P<0.05),胞浆内Cyt-C表达水平显著增加(P<0.05),线粒体内Cyt-C表达水平显著减少(P<0.05),Bax和Caspase-3表达水平显著增加(P<0.05),Bcl-2表达水平显著减少(P<0.05);与SAH组相比较,MF+SAH组Δψm和ROS明显恢复(P<0.05),p-PI3K、p-Akt、p-mTOR的表达水平明显增加(P<0.05),胞浆内Cyt-C表达水平显著下降(P<0.05),线粒体内Cyt-C表达水平显著增加(P<0.05),Bax和Caspase-3表达显著减少(P<0.05),Bcl-2表达显著增加(P<0.05)。结论芒果苷可以通过稳定线粒体膜电位,减少ROS的产生,改善线粒体功能障碍,从而抑制SAH后早期阶段神经细胞的凋亡。