组蛋白去乙酰化酶在孕鼠孕期免疫激活所致子代青春期感觉门控损伤中的作用

目的探讨各亚型组蛋白去乙酰化酶(HDAC)在母孕期免疫激活子代大鼠额叶、海马及肝脏组织中的表达及其与前脉冲抑制效率(PPI%)的相关性。方法将受孕成功的10只Sprague-Dawley雌鼠随机分为模型组(n=5)和对照组(n=5)。于妊娠期第9天,模型组孕鼠经尾静脉注射10 mg·kg^(-1)聚肌胞苷酸(Poly I:C),对照组孕鼠给予等体积无菌生理盐水。3 h后,尾静脉取血,采用酶联免疫吸附法检测2组孕鼠血浆中白细胞介素(IL)-1β、IL-6和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平来评估孕鼠免疫激活状态。将2组孕鼠饲养至自然生产,子鼠在出生后第21天断乳,选取雄性后代继续饲养。在子代大鼠青春期(即出生后第40天)时进行前脉冲抑制测试,评估其空间识别记忆和感觉门控功能。采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测2组子代大鼠海马、额叶及肝脏组织中HDAC家族的基因表达水平。结果模型组孕鼠血浆中IL-6、IL-1β、TNF-α表达水平显著高于对照组(P<0.05)。在前脉冲刺激为75 dB时,模型组子代青春期大鼠的PPI%显著低于对照组(P<0.05);前脉冲刺激为80、85 dB时,模型组与对照组子代青春期大鼠的PPI%比较差异无统计学意义(P>0.05)。在额叶组织中,模型组子代大鼠HDAC3、HDAC4、HDAC8、HDAC9、HDAC10、Sirt mRNA表达水平显著低于对照组子代大鼠(P<0.05),HDAC5 mRNA表达水平显著高于对照组子代大鼠(P<0.05);模型组与对照组子代大鼠HDAC1、HDAC2、HDAC6、HDAC7、HDAC11 mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。在海马组织中,模型组子代大鼠HDAC1、HDAC8、HDAC10 mRNA表达水平显著低于对照组子代大鼠(P<0.05),HDAC2、HDAC5 mRNA表达水平显著高于对照组子代大鼠(P<0.05);模型组与对照组子代大鼠HDAC3、HDAC4、HDAC6、HDAC7、HDAC9、HDAC11、Sirt mRNA表达水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。在肝脏组织中,模型组子代大鼠HDAC6、HDAC10 mRNA表达水平显著低于对照组子代大鼠(P<0.05);模型组与对照组子代大鼠HDAC1、HDAC2、HDAC3、HDAC4、HDAC5、HDAC7、HDAC8、HDAC9、HDAC11、Sirt mRNA表达水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。2组子代大鼠海马组织中HDAC2 mRNA表达水平与75 dB时的PPI%呈负相关(r=-0.965、P<0.05);额叶组织中HDAC10、Sirt mRNA表达水平与75 dB时的PPI%呈正相关(r=0.946、0.925,P<0.05)。结论孕鼠孕期感染poly I:C对子代大鼠HDAC家族的多种蛋白质表达具有显著影响,且与子代大鼠早期感觉门控受损相关,这可为精神分裂症的发病机制及药物治疗研究提供新的线索。

不同频率重复经颅磁刺激对慢性应激抑郁模型大鼠行为的影响

目的:观察慢性应激抑郁模型大鼠经不同频率的重复经颅磁刺激(rTMS)干预后行为学的变化。方法:40只成年雄性SD大鼠分为正常对照组(n=8)和造模组(n=32)。造模组大鼠采用孤养联合慢性不可预见性温和应激方法制备抑郁模型后分为4组:模型组(n=8,不给予任何处理)、高频组(n=8,给予10 Hz的rTMS干预)、低频组(n=8,给予1 Hz的r TMS干预)和伪刺激组(n=8,模拟rTMS环境但不发出rTMS刺激)。在rTMS干预结束后进行行为学评估,包括测量体重、蔗糖水消耗实验以及旷场实验。结果:5组大鼠的体重减分率、蔗糖水消耗量、旷场实验的水平运动评分以及垂直运动评分差异均有统计学意义(F=4.091、7.670、11.008和30.316,P<0.05);与模型组和伪刺激组相比,高频组和低频组大鼠体重减分率、蔗糖水消耗量、旷场实验的水平运动评分以及垂直运动评分均升高(P<0.05),且高频组与低频组相比,差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:rTMS干预可以改善慢性应激抑郁模型大鼠的抑郁样行为;高频rTMS和低频rTMS对大鼠抑郁行为的改善作用基本相同。

氟西汀对抑郁大鼠行为及海马组织内应激活化蛋白激酶信号通路的影响

目的探讨氟西汀对抑郁大鼠行为学表现及海马组织内丝裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1(MKP-1)及Jun氨基末端激酶(JNK)通路蛋白表达的影响。方法40只雄性Sprague Dawley大鼠随机分为正常组、抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组,每组10只。正常组大鼠不给予任何刺激;抑郁症组、生理盐水组和氟西汀组大鼠给予8周慢性不可预见性应激(CUMS),于CUMS第5~8周,氟西汀组大鼠给予氟西汀(10 mg·kg^-1·d^-1)灌胃,生理盐水组大鼠给予生理盐水(10 mg·kg^-1·d^-1)灌胃;正常组和抑郁症组大鼠不给予任何干预措施。分别于CUMS前(造模前),CUMS 4周后(造模后)、8周后(干预后)评估4组大鼠行为学变化,最后一次行为学评估后处死大鼠,并取海马组织,采用Western blot法检测海马组织内MKP-1、JNK、磷酸化JNK(p-JNK)蛋白表达水平,并计算p-JNK/JNK比值。结果造模前各组大鼠体质量、蔗糖偏好指数、强迫游泳不动时间及旷场实验结果比较差异均无统计学意义(P>0.05)。正常组大鼠造模前后各行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05);与造模前比较,造模后抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P<0.05)。与正常组比较,造模后抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P<0.05)。造模后,抑郁症组、生理盐水组、氟西汀组大鼠各种行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与正常组比较,干预后生理盐水组及抑郁症组大鼠体质量降低,蔗糖偏好指数下降,强迫游泳不动时间增加,水平运动距离和直立次数减少(P<0.05)。干预后,氟西汀组与正常组大鼠各项行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05),生理盐水组与抑郁症组大鼠各项行为学指标比较差异均无统计学意义(P>0.05)。与生理盐水组和抑郁症组比较,氟西汀组大鼠体质量增加,蔗糖偏好指数上升,强迫游泳不动时间减少,水平运动距离和直立次数增加(P<0.05)。抑郁症组和生理盐水组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量高于正常组(P<0.05),氟西汀组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量低于抑郁症组和生理盐水组(P<0.05),氟西汀组与正常组大鼠海马组织内MKP-1蛋白表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。4组大鼠海马组织内p-JNK、JNK蛋白表达量及p-JNK/JNK比值比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论MKP-1改变可能是抑郁症发病的一个重要基因,其影响抑郁症发病的机制可能不是通过JNK信号通路。氟西汀可能通过下调MKP-1表达水平而改善大鼠抑郁状态。

黄芪甲苷对CUMS抑郁症大鼠模型的血清代谢组学研究

目的运用血清代谢组学的方法探索黄芪甲苷(astragaloside IV,AST)对慢性不可预见性轻度应激(chronic unpredictable mild stress,CUMS)抑郁症大鼠的影响。方法 CUMS构建抑郁症模型。大鼠随机分为5组:健康组(Ctrl);模型组(CUMS);黄芪甲苷(10、20、50 mg/kg)组。苏木素-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色观察脑组织病变。酶联免疫吸附实验(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)检测白细胞介素(interleukin,IL)-1β、肿瘤坏死因子(tumor necrosis factorα,TNF-α)、总胆固醇(total cholesterol,TC)、甘油三酯(triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(low density lipoprotein cholesterin,LDL-c)、高密度脂蛋白胆固醇(high density lipoprotein cholesterin,HDL-c)、一氧化氮(nitric oxide,NO)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、丙二醛(methane dicarboxylic aldehyde,MDA)、谷胱甘肽(glutathione,GSH)水平。蛋白印记检测CPT-1、ACOX1、PPAR-α、SREBP-1c、FAS和DGAT-2表达。结果黄芪甲苷可改善CUMS抑郁症大鼠脑组织锥体细胞层较薄,细胞密度相对较少,排列紊乱、稀疏,细胞边缘模糊不清等病变。模型组大鼠IL-1β、TNF-α的水平高于健康组(P<0.01)。黄芪甲苷(10、20、50 mg/kg)组大鼠IL-1β、TNF-α的水平低于模型组(P<0.01)。黄芪甲苷可降低CUMS抑郁症大鼠血糖浓度(P<0.01)。与健康组相比,模型组大鼠TC、TG、LDL-c水平升高,HDL-c水平下降(P<0.01)。与模型组相比,黄芪甲苷(10、20、50 mg/kg)组大鼠TC、TG、LDL-c水平降低,HDL-c水平上升(P<0.01)。黄芪甲苷可减弱CUMS抑郁症大鼠CPT-1、ACOX1、PPAR-α表达,增强SREBP-1c、FAS、DGAT-2表达(P<0.01)。与健康组相比,模型组大鼠NO和MDA水平升高,SOD和GSH水平下降(P<0.01)。与模型组相比,黄芪甲苷(10、20、50 mg/kg)组大鼠NO和MDA水平降低,SOD和GSH水平上升(P<0.01)。结论黄芪甲苷可改善CUMS抑郁症大鼠脑组织病变、炎症反应、糖脂代谢异常及氧化应激。

重复经颅磁刺激对慢性应激抑郁模型大鼠行为及海马神经元凋亡的影响

目的 探讨重复经颅磁刺激（repetitive transcranial magnetic stimulation,rTMS）对慢性应激抑郁模型大鼠抑郁样行为的改善作用及对海马神经元凋亡的影响.方法 40只雄性SPF级SD大鼠经过筛选后其中38只随机分为2组,分别为对照组（n=8）和造模组（n=30）,造模组应用孤养联合慢性不可预见性温和应激（chronic unpredictable mild stress,CUMS）方法建立大鼠抑郁模型,剔除造模不成功的大鼠,将造模成功的24只大鼠分为三组：模型组（n=8,不给予任何处理）、rTMS组（n=8,给予10 Hz的rTMS干预）和伪刺激组（n=8,模拟rTMS环境而没有rTMS刺激发出）.各组大鼠分别于造模前、造模后和干预后采用体质量测量、蔗糖水消耗实验和旷场试验检测大鼠行为学的改变,采用尼氏染色法检测大鼠海马神经元的大小、形态和数目的变化,采用免疫组织化学方法检测大鼠海马神经元凋亡蛋白Bax的表达变化.结果 （1）行为学结果显示：应激可以使大鼠行为学评分显著降低（均P＜0.05）,rTMS干预可以显著改善其行为学评分（均P＜0.01）;与模型组相比,rTMS组大鼠体质量减分率（0.32±0.05）％、蔗糖水消耗实验评分（7.03±1.02）分、旷场实验的水平运动评分（8212.41±1416.15）分以及垂直运动评分（8.75± 1.58）分均显著增高,差异具有统计学意义（均P＜0.01）.（2）尼氏染色结果显示：应激21d导致大鼠海马CA3区神经元损伤,细胞形态差,尼氏小体数目减少;rTMS干预可以阻止海马神经元受损,使细胞形态饱满,尼氏小体数目增多.（3）免疫组织化学结果显示：应激导致大鼠海马CA3区Bax蛋白表达显著增高（P＜0.01）,rTMS干预可以显著降低Bax蛋白表达（P＜0.01）.结论 rTMS干预可以改善慢性应激抑郁模型大鼠的抑郁行为及海马神经元的凋亡情况,可能与海马神经元凋亡蛋白Bax的表达下调有关.

抗精神病药物治疗急性期精神分裂症的早期反应情况及相关因素的分析

目的 探讨急性期精神分裂症治疗的早期反应与后期疗效之间的关联,以及药物与早期反应的关系.方法 回顾性分析2010年5月至2011年9月于新乡医学院第二附属医院住院治疗的146例精神分裂症患者的临床资料,将患者分为早期反应组（2周末PANSS总分减分率≥20%）和早期无反应组,比较两组一般资料、药物使用情况和基线、2、4、6周末的阳性和阴性症状量表（PANSS）;采用相关分析、回归分析得出早期治疗反应与后期疗效的关系及药物选择对早期反应的影响.结果 2、4、6周末,早期反应组较早期无反应组的PANSS总分及五因子分低[2、4、6周末总分（66.2±11.8）分比（84.5±10.9）分,（55.9±13.2）分比（70.9±13.7）分,（48.9±13.1）分比（60.6±14.9）分,均P〈0.05],减分率高[2、4、6周末总分减分率（37±14）%比（9±7）%,（56±19）%比（32±18）%,（68±20）%比（49±21）%,均P〈0.05];2周末与4、6周末PANSS总分减分率相关系数r分别为0.730、0.541（均P〈0.05）;2、4周末,奥氮平组PANSS总分减分率高于阿立哌唑、喹硫平、齐拉西酮组[2周末（29±19）%比（19±16）%、（18±14）%、（17±15）%,4周末（51±21）%比（37±25）%、（39±18）%、（37±22）%,均P〈0.05];早期反应的保护性因素是奥氮平治疗（P〈0.05）.结论 早期反应者的症状改善更迅速更明显;药物种类对早期反应有影响;早期无反应的患者可以通过及早调整治疗方案获益.

孕期母体免疫激活导致子代大鼠代谢紊乱及系统性炎症反应

目的分析母孕期免疫激活(maternal immune activation, MIA)子代精神分裂症大鼠模型的代谢表型, 评估该模型在探究精神分裂症并发代谢综合征分子机制的适用性, 并分析其可能的发生机制。方法在孕鼠9.5 d尾静脉分别注射聚肌胞苷酸(Polyinosinic-polycytidylic acid, Poly I:C)或生理盐水, 将雄性子代分别定义为MIA组或对照组, 并进行行为学评估以及代谢风险指标评估, 通过定量PCR分析炎症因子水平, 采用独立样本t检验进行组间比较。结果与对照组相比, MIA组成年早期出现显著的行为异常, 包括焦虑水平增加、记忆损伤、感觉门控功能障碍;MIA组青春期出现代谢紊乱风险, 包括单核细胞百分比增加(t=2.50, df=14, P=0.028), 低密度脂蛋白胆固醇水平升高(t=3.34, df=14, P=0.005)以及动脉粥样硬化指数升高(t=2.23, df=14, P=0.043);肝脏形态异常且球蛋白(t=3.61, df=14, P=0.003)和总蛋白(t=3.40, df=14, P=0.004)水平降低;MIA组存在中枢神经系统和肝脏的系统性炎症。结论行为障碍和代谢紊乱在MIA大鼠中并存, 且代谢紊乱早于行为异常出现, 提示该模型对精神分裂症并发代谢综合征的研究具有一定价值;系统性炎症可能是母孕期感染子代行为障碍和代谢紊乱的发生机制。