猫爪草乙醇提取物调控结直肠癌细胞HCT116凋亡的分子机制研究

目的探讨猫爪草乙醇提取物(CCEE)调控结直肠癌细胞HCT116凋亡的潜在分子机制。方法使用CCEE处理结直肠癌细胞HCT116,检测其凋亡水平。将CCEE处理后结直肠癌细胞HCT116进行半定量质谱分析。过表达差异蛋白后,检测结直肠癌细胞HCT116的凋亡水平。通过miRDB在线分析和荧光素酶报告系统检测差异蛋白的miRNA。结果CCEE处理24 h后,结直肠癌细胞HCT116的凋亡水平上升[(23.18±3.15)%vs.(68.21±12.05)%],差异有统计学意义(t=6.26,P<0.05)。CCEE处理结直肠癌细胞HCT11624 h后,半定量蛋白质组学发现BAX的蛋白表达水平上升(P<0.05)。当过表达BAX时,结直肠癌细胞HCT116的凋亡水平上升[(28.00±6.68)%vs.(85.08±4.97)%],差异有统计学意义(t=11.87,P<0.05)。CCEE处理结直肠癌细胞HCT116后,miR-761的表达水平显著下降[(0.82±0.10)vs.(0.11±0.02)],差异有统计学意义(t=12.00,P<0.05)。过表达miR-761后,BAX的蛋白和mRNA水平下降[(0.061±0.003)vs.(0.004±0.001),t=16.08,P<0.05],细胞凋亡水平下降[(21.59±5.66)%vs.(6.04±2.13)%,t=4.45,P<0.05],差异均有统计学意义。此外,miR-761靶向BAX mRNA的3端非编码区[(100.00±9.59)vs.(14.22±2.45),t=15.01,P<0.05]。结论CCEE抑制结直肠癌细胞HCT116中miR-761的表达水平,减少因miR-761所致的BAX mRNA降解,增强BAX的蛋白翻译,促进结直肠癌细胞HCT116的细胞凋亡。