重症肌无力患者白细胞介素-36表达及其对调节性T细胞和Th17细胞平衡的调控

目的观察重症肌无力(MG)患者白细胞介素(IL)-36的表达,研究IL-36对MG患者调节性T细胞(Tregs)和Th17细胞的调控作用。方法入组2016年7月至2021年8月新乡市中心医院就诊的MG患者51例(MG组)和健康对照者25名(对照组),采集外周血,分离血浆和外周血单个核细胞(PBMCs),采用酶联免疫吸附试验检测血浆IL-36α、IL-36β、IL-36γ、IL-36RA、IL-35、IL-17水平,流式细胞术检测Tregs和Th17细胞比例,实时定量聚合酶链反应法检测叉头盒蛋白3(FoxP3)和维甲酸相关孤独核受体γt(RORγt)mRNA表达。用重组IL-36β(5 ng/ml)刺激MG患者的PBMCs或纯化的Tregs,分析Tregs和Th17细胞比例、IL-35和IL-17分泌、FoxP3和RORγt mRNA表达、Tregs抑制活性的变化。结果IL-36α、IL-36γ、IL-36RA水平在对照组和MG组之间的差异均无统计学意义(均P>0.05)。MG组IL-36β水平高于对照组[(73.43±13.91)pg/ml比(60.91±12.65)pg/ml,t=3.79,P<0.001)。MG组Tregs比例[(4.67±1.33)%比(6.32±1.81)%,t=4.48,P<0.001]、IL-35水平[(50.06±7.93)pg/ml比(65.37±8.90)pg/ml,t=7.59,P<0.001]、FoxP3 mRNA(1.03±0.14比1.57±0.46,t=7.78,P<0.001)低于对照组,而Th17细胞比例[(1.05±0.15)%比(0.94±0.21)%,t=2.61,P=0.011]、IL-17水平[(40.61±13.13)pg/ml比(33.09±11.48)pg/ml,t=2.44,P=0.017]、RORγt mRNA(1.26±0.16比1.03±0.13,t=6.08,P<0.001)高于对照组(均P<0.05)。上述指标在不同性别之间、早发型和晚发型之间、非胸腺瘤组和胸腺瘤组之间、不同Osserman分型之间的差异均无统计学意义(均P>0.05),与定量重症肌无力(QMG)量表评分均无明显相关性(均P>0.05)。重组IL-36β对MG患者PBMCs增殖无影响(P=0.248),可降低Tregs比例[(3.05±0.66)%比(4.18±1.07)%,t=4.23,P<0.001]、IL-35分泌[(48.12±10.93)pg/ml比(56.96±13.73)pg/ml,t=2.36,P=0.023]和FoxP3 mRNA表达(0.99±0.17比1.18±0.13,t=4.01,P<0.001),但对Th17细胞比例、IL-17分泌和RORγt mRNA表达无影响(均P>0.05)。重组IL-36β刺激的Tregs免疫抑制活性减弱,表现为细胞增殖升高[(0.83±0.12)×10^(5)个比(0.69±0.15)×10^(5)个,t=3.02,P=0.005]和IL-35分泌降低[(28.71±10.08)pg/ml比(37.12±10.47)pg/ml,t=2.39,P=0.023]。结论MG患者中升高表达的IL-36β可能主要通过抑制Tregs功能调控Tregs/Th17细胞平衡。