姜黄素对LPS诱导的大鼠星形胶质细胞NF-κB炎症因子信号通路的影响

目的探讨姜黄素对脂多糖(LPS)诱导的大鼠星形胶质细胞核因子(NF)-κB炎症因子信号通路的影响。方法将新生SD大鼠大脑皮层的星形胶质细胞进行原代培养,采用胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光染色法对星形胶质细胞进行鉴定。给予LPS单独作用或与姜黄素共同作用星形胶质细胞24 h后,噻唑蓝(MTT)法检测细胞活性,硝酸还原酶法检测一氧化氮(NO)含量,Western印迹检测诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、p-p65和p65蛋白表达,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β和IL-6含量,荧光素酶报告基因实验检测NF-κB活性。结果GFAP免疫荧光鉴定星形胶质细胞的阳性率达95%以上。与对照(无任何药物作用)组相比,100 ng/ml LPS单独作用或与姜黄素5、10、20μmol/L共同作用后,星形胶质细胞的活力无显著变化(P>0.05),而姜黄素40、80μmol/L与LPS共同作用后细胞活力较对照组显著降低(P<0.05)。与对照组相比,给予100 ng/ml LPS单独作用后,星形胶质细胞中iNOS蛋白表达、NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量、p-p65/p65比值和NF-κB活性均明显升高(P<0.05);与100 ng/ml LPS单独处理组相比,给予5、10、20μmol/L浓度的姜黄素处理后,细胞中iNOS蛋白表达、NO、TNF-α、IL-1β、IL-6含量、p-p65/p65比值和NF-κB活性均呈浓度依赖性明显降低(P<0.05)。结论姜黄素可抑制LPS诱导的大鼠星形胶质细胞NF-κB炎症因子信号通路的活化,减少促炎因子IL-1β、IL-6、TNF-α和NO释放,进而减轻神经元损伤。