草地资源与管理课程教学案例库建设与研究

草地资源与管理课程是农业硕士农艺与种业领域研究生培养课程体系中的一门选修课。针对很多学生对该门课程缺乏兴趣、主动性和积极性较差、学习敷衍了事和对知识不求甚解的学习现状,文章从课程属性和教学现状出发,通过分析该门课程教学案例库建设的意义,构建案例库建设内容,并进一步对案例教学进行课堂设想,旨在激发学生学习兴趣,促进学生将知识与技能进行有机融合,从而提升课堂教学水平和质量,切实保证应用型、复合型高层次人才培养目标的实现。

围栏封育对蒿类荒漠植物-土壤碳氮磷化学计量特征的影响

为明确蒿类荒漠植物茎、叶、根和土壤碳(C)、氮(N)、磷(P)含量及其化学计量特征对围栏封育的响应规律,对封育区(2年)和放牧区荒漠草地植被及其土壤C、N、P含量进行测定分析。结果表明,与放牧区相比,短期封育对蒿类荒漠植物群落茎、叶和根系C、N和P含量影响不显著,而植物群落茎氮磷比(N∶P)显著降低14.27%。封育区20—30 cm土层中的根系C含量、碳氮比(C∶N)、碳磷比(C∶P)相较于放牧区显著增加45.00%、80.72%、41.58%;而30—50 cm根系的N含量、N∶P显著降低21.81%、37.56%,但P含量显著增加22.22%;50—70 cm根系C∶N也显著增加64.53%。与放牧区相比,短期封育后0—5 cm土壤N显著降低36.76%;5—10 cm土壤N和P含量分别显著降低37.34%和25.35%;50—70 cm土壤P含量显著降低12.5%。此外,封育区20—30 cm土壤C∶P和10—20 cm土壤N∶P显著降低36.93%和23.45%。因此,短期封育没有达到植被、土壤恢复的效果,应加长封育年限,采取添加磷肥等综合措施促进退化草地的恢复。

含硫氨基酸基因植物表达载体的构建及对百脉根的转化

在本研究中,用限制性内切酶NcoⅠ和BglⅡ从中间载体pMD18zeolin和pMD18zein上切下zeolin基因(约1600bp)和γ-zein基因(约720bp),将其定向连接在经相同酶切的质粒载体pCAMBIA1302上,构建成植物表达载体pCBzeolin和pCBzein。采用冻融法将pCBzeolin和pCBzein导入根癌农杆菌(Agrobac-terium tumefaciens)菌株LBA4404,利用该菌株转化百脉根(Lotus corniculatusL.)。经过共培养、筛选分化、再生,得到抗性植株。对抗性植株进行了PCR、RT-PCR检测表明,γ-zein和zeolin基因已经整合到百脉根基因组中,在核酸水平得到了表达。含硫氨基酸数据分析表明,转zeolin基因植株含硫氨基酸含量极显著高于转γ-zein基因植株和对照植株的含量(P<0.01),但转γ-zein基因植株与对照植株间差异不显著。

含硫氨基酸蛋白与GFP融合基因的表达分析

提高饲用植物中的含硫氨基酸水平已成为动物营养学家关注的焦点,含硫氨基酸对奶制品、肉类及羊毛产量有重要影响。γ-zein和zeolin(γ-zein和菜豆球蛋白的融合基因)编码2种含硫氨基酸蛋白基因,利用基因轰击法将质粒pCBzein、pCBzeolin和pCAMBIA1302分别转入洋葱(Alliumcepa L.)表皮细胞,激光共聚焦扫描显微结果表明γ-zein和zeolin在洋葱表皮细胞的细胞核、内质网及细胞壁中均有表达。采用冻融法分别将表达载体pCBzein、pCBzeolin和pCAMBIA1302导入根癌农杆菌(Agrobacteriumtumefaciens)菌株LBA4404,利用该菌株转化烟草(Nicotianatabacum);在Hygromycin选择压力下获得烟草抗性不定芽和再生植株;激光共聚焦扫描显微结果表明γ-zein和zeolin蛋白以颗粒的形式不均匀地分布在烟草原生质体中,并验证表达载体pCBzein和pCBzeolin的选择基因、目的基因和报告基因均得到了表达,为进一步开展豆科牧草营养品质改良奠定了基础。

盐胁迫下转基因紫花苜蓿同工酶活性和可溶性糖含量的变化

试验以NaCl为胁迫因子,设置0,0.3%,0.5%,0.7%共4个盐浓度梯度,研究不同盐胁迫对转基因苜蓿和保定苜蓿体内SOD,POD,CAT活性和可溶性糖含量的变化。试验表明,转基因苜蓿和保定苜蓿的酶活性以及可溶性糖含量受盐胁迫影响比较大,转基因苜蓿的酶活性和可溶性糖含量随着盐浓度的增加而增加,尤其是可溶性糖变化比较明显;在NaCl盐浓度为0.3%时,保定苜蓿的SOD,CAT活性和可溶性糖含量达到最低,POD活性最高。