两种方法培养人胎盘间充质干细胞的生物特性比较

背景:胎盘间充质干细胞能够为细胞治疗提供理想的种子细胞,但其培养未曾使用过胰酶冷消化法,故对此方法进行探索,并与组织块法进行比较,从中筛选出一种方便易行、培养成功率更高的方法。目的:观察胰酶冷消化法与组织块法分离培养的人胎盘间充质干细胞的生物学特性。方法:采用胰酶冷消化法和组织块法从人胎盘中分离、纯化和传代培养人胎盘间充质干细胞(n=6)。记录胎盘间充质干细胞首次出现时间及原代培养周期,绘制第3代细胞生长曲线,流式细胞仪分析第3代细胞表面标志,检测其向成神经及成脂方向诱导分化能力。结果与结论:(1)使用上述2种培养方法均可获得胎盘间充质干细胞,胰酶冷消化法首次出现贴壁细胞时间早于组织块法(P <0.05),原代培养周期短于组织块法(P <0.05);(2)生长曲线提示在进入平台期后的各个时间点胰酶冷消化法培养的细胞数量明显多于组织块法(P<0.05);(3)2种细胞具有均一的细胞表型,均表达CD29,CD105,不表达CD34,CD45;(4)2种方法培养的胎盘间充质干细胞经诱导后均具有成神经及成脂分化潜能;(5)上述结果表明,对于胎盘间充质干细胞的培养而言,胰酶冷消化法具有明显优势。