异常黏液质型阳痿病证大鼠生精细胞凋亡及伊木萨克片干预研究

目的研究异常黏液质型阳痿病证大鼠生精细胞凋亡及维药伊木萨克片对其影响。方法选用100只雄性SD大鼠,随机选取10只为正常组,余90只为造模组,以湿寒饲料+湿寒性环境的干预条件建立异常黏液质证候模型,20w后从证候组中筛选出阳痿病证模型后,将其分为病证模型组和病证药物干预组,剩余证候模型分为证候模型组、证候药物干预组,干预2w,取材后对睾丸用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色后光镜下观察其睾丸组织病理改变,原位末端转移酶标记技术(TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling,TUNEL)法检测生精细胞的凋亡情况。结果 (1)HE染色结果:正常组结构完好;证候模型组生精细胞数量明显少于正常组,间质细胞及精子数量减少;病证模型组生精小管萎缩或扭曲成不规则形,生精细胞和间质细胞数量显著少于正常组;证候药物干预组生精小管形态、生精细胞数量及管腔内精子数量基本同正常组,间质细胞增多;病证药物干预组生精细胞数量较病证模型组有所增多,精子数量依旧少于正常组。(2)凋亡检测结果:证候模型组及病证模型组生精细胞凋亡较正常组显著增多(P<0.01),经伊木萨克片干预后凋亡数量下降(P<0.01)。结论维医异常黏液质型阳痿病证大鼠模型睾丸组织发生病理学改变,生精细胞发生异常凋亡,伊木萨克片干预可有效减少异常凋亡。

异常黏液质证候大鼠阴茎组织差异性表达microRNA的筛选及生物信息学分析

目的筛选异常黏液质证候及药物干预大鼠阴茎组织差异表达microRNA(miRNA),并验证miR-140-3p和miR-486两项关键指标,探讨其生物学意义。方法取80只性功能正常SD雄性大鼠,从中随机抽取10只大鼠设为正常对照组,余70只为造模组,用芫荽实+菠菜实+湿寒性环境的干预条件建立异常黏液质证候模型,通过生物学表征确认模型成功后,随机分为证候模型组、证候药物组。伊木萨克片干预3周后,提取阴茎组织总RNA进行miRNA Illumina高通量测序,筛选出异常黏液质证候及药物干预相关的候选差异表达miRNA,实时荧光定量PCR验证测序结果的可靠性,并进行生物信息学分析。结果筛选出证候相关miRNA候选标志物15个(上调13个,下调2个),伊木萨克片干预相关miRNA候选靶点标志物3个(均下调),验证结果显示miR-486在证候模型组较正常对照组表达升高(P<0.05),miR-486和miR-140-3p在证候药物干预组较证候模型组表达降低(P<0.05)。结论miR-486可作为异常黏液质证标志物,miR-140-3p、miR-486可作为伊木萨克片靶点标志物,但仍需大样本量验证。