案例式教学在病理生理学中的应用评估

本教研室自2007年起开始推行病理生理学的案例式教学.对部分班级进行了问卷调查,内容包括案例式教学的调查和教师教学情况的调查.结合调查结果可以看出,在病理生理学的教学过程中使用案例式教学方法并有机的结合PBL教学方法可以进一步加深基础医学与临床医学的联系,对培养学生的临床思维有一定的帮助.

实施“国家大学生创新性实验”的几点体会

"国家大学生创新性实验计划"在全国范围内的开展,对医学院校的实验教学改革起了重大的推动作用。医学实验模式逐步发生了变化,同时学生的创新能力得到了培养和发展,并从各方面提高了学生的综合能力,为培养出适合国家和社会需要的医学人才奠定了基础。

文献报告会结合病例分析教学法在消化内科教学中的应用

消化系统疾病学是一门重要的临床医学主干课程,研究生教学是医学教育中至关重要的一环。消化内科重视研究生的培养,不断探索有效的教学方法、开展新的教学模式,为培养优秀的研究生提供新思路。文献报告会教学模式的核心是学习某一专业领域的最新文献,获取学科前沿最新资讯,通过联合病例分析,可以使前沿资讯与临床病例有机结合,让学生在紧跟最新研究的同时提高解决临床问题的能力。将文献报告会结合病例分析教学法应用到消化内科临床专业型研究生的培养中,有利于培养学生自主学习的习惯及临床思维,增加学生从事临床的兴趣。在开展此教学模式的过程中也发现了一些问题,将在日后的探索中不断完善。

p62敲除对细胞自噬的影响及其对泛素化修饰蛋白募集的作用

目的探讨p62敲除对细胞自噬及泛素化蛋白募集的影响。方法将野生型(Wild Type,WT)和p62基因敲除(p62 knockout,p62-KO)的大鼠肾上皮细胞(NRK)分别分为野生型阴性对照组(WT CT组)和野生型饥饿4 h组(WT Sta4 h组)、p62基因敲除阴性对照组(p62-KO CT组)和p62基因敲除饥饿4 h组(p62-KO Sta4 h组)。WT CT组和p62-KO CT组中加入普通培养基,对细胞进行空白对照处理;WT Sta4 h组和p62-KO Sta4 h组中加入饥饿培养基,对细胞进行饥饿4 h处理。免疫印迹法鉴定和检测p62基因的敲除及自噬体标志蛋白微管相关蛋白1轻链3(LC3)、泛素化修饰蛋白(Ub)的表达;电子显微镜观察自噬体形成;激光共聚焦显微镜法观察LC3蛋白阳性点状结构的数量。结果鉴定p62基因成功被敲除。饥饿处理4 h后,WT和p62-KO细胞中均能观察到自噬结构(包括自噬体和自噬溶酶体)。与WT CT组比较,WT Sta4 h组中LC3蛋白酯化和Ub蛋白表达水平升高(P<0.05),LC3蛋白阳性点状结构数量显著增加(P<0.01);与p62-KO CT组比较,p62-KO Sta4 h组中LC3蛋白酯化和Ub蛋白表达水平升高(P<0.05),LC3蛋白阳性点状结构数量显著增加(P<0.01)。结论p62参与细胞自噬并募集泛素化修饰蛋白,最终影响选择性自噬体底物的凝聚和降解。

黄芪与当归对人脐静脉内皮细胞增殖及VEGF表达的影响

目的: 探讨黄芪与当归对内皮细胞(ECs)增殖周期及血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达的影响。方法: 以体外培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)为模型,HUVEC经分离、原代和传代培养与鉴定,选择第4 或第5代细胞进行实验;MTT法检测不同剂量黄芪与当归对细胞增殖的影响;流式细胞仪检测黄芪与当归对HUVEC增殖周期的影响;半定量RT PCR检测黄芪与当归对HUVEC的VEGF mRNA表达的影响。结果:细胞周期检测显示黄芪及当归组S期细胞数显著增多(P<0.01)。黄芪+当归组G0 G1 期细胞数明显减少(P<0.05),S期和G2 M期细胞数明显增多(P<0.05)。RT PCR结果表明,黄芪与当归使HUVEC的VEGF mRNA表达明显增强,黄芪+当归(200μg/ml)组是对照组的1.82倍;当归(200μg/ml)组是对照组的1.88倍;黄芪(200μg/ml)组是对照组的1.51倍。结论:黄芪与当归及其复方具有促进内皮细胞增殖作用,黄芪+当归可明显促进HUVEC的DNA合成及有丝分裂。黄芪与当归可促进HUVEC的VEGF mRNA表达,提示黄芪与当归通过刺激VEGF表达而促血管新生。

黑木耳粗提物在大鼠急性肾功能衰竭过程中的作用

目的:探讨黑木耳粗提物对大鼠腹腔注射顺铂诱发急性肾功能衰竭的作用及其可能机制。方法:将健康雄性Wistar大鼠32只随机分为对照组、模型组、黑木耳组及尿毒清组,每组8只。采用RT-PCR方法检测各组大鼠肾脏组织内皮素1(ET-1)mRNA的表达水平。同时测定血尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)的含量及血气指标。结果:模型组与尿毒清组中ET-1 mRNA的表达,BUN和Cr的含量均高于对照组和黑木耳组(P<0.05),而黑木耳组中ET-1 mRNA的表达与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。血气分析也表明,黑木耳组发生了代偿性的酸碱平衡紊乱,且血K+浓度与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论:黑木耳粗提物在急性肾功能衰竭过程中可能通过影响血管活性物质的合成与释放,调节体内电解质和酸碱的平衡而发挥保护作用。

唇香草对失血性休克脑的保护作用机制的探讨

目的探讨家兔失血性休克过程中唇香草对脑的保护作用及其可能的作用机制。方法健康家兔32只,随机分为对照组、失血性休克组、补液组和唇香草组,每组8只。在规定时间点测定脑组织中琥珀酸脱氢酶(SDH)、ATP酶、一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、髓过氧化物酶(MPO)的变化。结果在失血性休克过程中,脑组织SDH、ATP酶的活性在休克组和补液组与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),经唇香草治疗后其活性与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。而休克组和补液组的NO、MDA及MPO的含量增加,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05),但在唇香草组含量均明显减少(P>0.05)。结论唇香草对失血性休克时脑组织的损伤有一定的保护作用。

大鼠肝缺血再灌注损伤时血清内毒素的变化及对心功能的影响

目的：探讨肝缺血再灌注损伤时内毒素变化对心功能的影响及其可能的发生机制. 方法：健康雄性Wistar大鼠48只随机分为对照组、缺血30 min组（Ⅰ组）及缺血30 min再灌注即刻、2 h、4 h和6 h组（I/R及I/R2、4、6 h 组）,每组8只,采用BL-420生物信号采集系统测定各组心功能[包括心率（HR）、左室收缩压（LVSP）、左室舒张末期压力（LVEDP）、左室内压最大上升/下降速率（±dp/dtmax）],采用偶氮显色法测定血清中的内毒素水平. 结果：在肝缺血再灌注损伤过程中,Ⅰ组、I/R组HR明显低于对照组（P＜0.05）,随着再灌注时间的延长呈上升趋势,但与对照组比较差异无统计学意义（P＞0.05）;I/R6 h组LVSP 、±dp/dtmax明显低于对照组（P＜0.05～0.01）,LVEDP明显高于对照组（P＜0.01）;Ⅰ组和I/R组内毒素水平达到高峰,随着再灌注时间的延长逐渐下降,但仍高于对照组（P＜0.05）. 结论：肝缺血再灌注损伤过程中,肠源性内毒素吸收入血及肝脏解毒功能的降低所致的内毒素血症是引起心功能改变的始动环节之一.

RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α转录后调控机制的初步研究

目的:探讨RNA结合蛋白HuR对NF-κB抑制因子α(IκB-α)转录后调控机制。方法:构建IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒,并转染3T3细胞;体外生物素标记IκB-αmRNA 3'UTR并进行RNA pull-down;过表达及干扰HuR后,qPCR检测其对IκB-αmRNA稳定性的影响,Western bltting检测其对IκB-α蛋白表达的影响。结果:(1)IκB-αmRNA 3'UTR报告基因真核表达质粒构建成功;(2)报告基因检测:共转染pcDNA3-HA-HuR质粒及IκB-αmRNA 3'UTR报告基因质粒后与对照组相比其数值明显增高;(3)用生物素标记的IκB-αmRNA3'UTR探针进行RNA pull-down,可以检测到特异性结合的HuR蛋白;(4)过表达HuR,IκB-αmRNA稳定性无明显变化,蛋白表达明显上调;干扰HuR表达后,IκB-αmRNA稳定性无明显变化,蛋白表达明显下调。结论:(1)HuR可以与IκB-αmRNA 3'UTR特异性结合并参与调节IκB-αmRNA 3'UTR的功能;(2)HuR对IκB-αmRNA稳定性无明显影响,其主要调控IκB-α蛋白表达,使其表达上调。

无花果水提取液对抑制肿瘤细胞增殖作用的初步研究

目的探讨无花果水提取液(fig extract,FE)对宫颈癌细胞细胞(Hella)及肝癌细胞(Hepg2)增殖的影响及其机制。方法采用人外周血的单核细胞系(Thp-1)作为Hella细胞对照组;HepG2细胞对照组为正常肝细胞(7702),细胞分别给予PBS处理和无花果水提液处理;3-(4,5-二甲基噻唑-2)-2,5-二苯基四氮唑溴盐法(MTT)检测不同浓度无花果提取液对细胞增殖的影响,荧光显微镜观察细胞形态改变,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果经无花果水提液处理后,Thp-1细胞细胞活性及形态无明显改变;随着提取液浓度的增加,Hella细胞细胞活性逐渐降低,细胞凋亡的数量逐渐增加,细胞固缩失去正常形态。无花果水提液对人肝癌细胞和正常肝细胞增殖均有抑制作用,随着剂量增加,增殖抑制作用增强,呈剂量效应关系(P=0.006),无花果水提液0.06 g/mL时,人肝癌细胞和正常肝细胞增殖率差异有统计学意义(P=0.021);无花果水提液处理肝癌细胞后,随着无花果水提液浓度增加凋亡细胞显著增加。当剂量<0.08 g/mL时对正常细胞以及肝癌细胞形态无明显影响,当剂量>0.08 g/mL时Hepg2细胞变形固缩,失去正常形态。结论无花果水提取液可能通过影响细胞凋亡而抑制肿瘤细胞增殖。

类胰蛋白酶对血管内皮细胞表达干细胞因子的作用及机制

目的研究类胰蛋白酶对血管内皮细胞(ECV304细胞系)表达干细胞因子的作用及其机制。方法采用RT-PCR方法检测类胰蛋白酶刺激后ECV304细胞炎症介质干细胞因子(stem cell factor,SCF)表达情况,用Western blot方法研究p38和JNK的表达及磷酸化。采用单因素方差分析干细胞因子mRNA的表达以及t检验分析p38和c-Jun N末端激酶(JNK)磷酸化。结果类胰蛋白酶能够上调ECV304细胞的干细胞因子mRNA的表达,类胰蛋白酶也可以诱导细胞内p38的磷酸化,以上作用均可被PAR2单克隆抗体抑制。结论在ECV304细胞中,类胰蛋白酶经蛋白酶激活受体2通过p38的磷酸化,最终上调表达干细胞因子。

PBL与Seminar结合模式在消化专业研究生实践中的教学效果

消化内科作为内科学的一门重要分支,对于研究生培养要求日益增高,不仅需要内科学知识,还需学习消化内镜特有的专业知识。随着消化内镜诊疗技术日新月异的发展,掌握各类临床技能成为消化专业研究生培养不可或缺的部分,临床技能的培训更需要多种培训模式的综合应用。而现阶段我国专业研究生结合住院医师培训尚不规范,多种教学模式综合应用于实践教学中是使培训体系规范以及专业化的有效方式。探索更加完善的消化专业研究生培养模式是目前消化内科导师及学生的重要任务。本文就消化内科研究生培养,提出PBL与Seminar相结合的教学模式,希望能为消化内科专业研究生培养提出新思路、新途径,真正实现教学相长。

医学人体机能学教学改革及教学方法的体会

本文总结了人体机能学教学改革的过程及其在教学中的意义,介绍了在医学人体机能学教学中如何培养学生的逻辑思维和系统思维的方法和能力以及人体机能学教学方法的一些体会,为相关的教育教学工作者和学生提供借鉴。

小鼠无再灌失血性休克过程脑的阳离子、LDH、CPK、MDA、GSH-Px、SOD和形态等的变化及与外周器官的比较

未平衡动脉血压的失血性休克,脑细胞内Na^+、K^+显著升高(P<0.002,P<0.01),Ca^(2+)无变化。LDH的升高只见于心脏(P<0.05),而CPK在脑、心、肝和肺均明显升高(P<0.05,P<0.005,P<0.05,P<0.05)。MDA升高见于脑、心(P<0.01,P<0.02),而肝、肺无变化,GSH-Px在脑、肺升高(P<0.05,P<0.02).肝GSH-Px无变化,心GSH-Px反而降低(P<0.05)。SOD升高只见于脑(P<0.001)。镜检脑组织有细胞水肿,偶见细胞坏死。不再灌亦有自由基的生成,在失血性休克过程脑和外周器官相比更易受损。

兔心肌缺血与再灌注过程一氧化氮合酶水平变化的意义

目的探讨心肌缺血再灌注过程心肌组织一氧化氮合酶的作用。方法采用分别结扎兔冠状动脉左回旋支10，20，30，40min并再灌60min制备4组缺血再灌注动物模型，另设假手术组，分别于再灌注60min时测定血清天门冬氨酸氨基转移酶（AST）、乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）、肌酸激酶同工酶（CK—MB）及心肌组织一氧化氮合酶（NOS）、丙二醛（MDA）。结果①缺血40min组AST，LDH，CK及CK—MB水平均明显高于假手术组（P〈0．05）；②缺血40min组NOS，MDA水平较假手术组明显增高（P〈0．05）。结论缺血40min组心肌酶，NOS，MDA均明显增高，在心肌缺血再灌注损伤中，NOS可能起着心肌细胞毒性作用。

医学留学生全英文教学探讨

根据对我校留学生全英语教学的经验,在保证完成教学任务的前提下,对如何提高留学生的病理生理学教学质量等问题进行探讨.

食管癌淋巴结转移的危险因素

目的:探讨食管癌淋巴结转移的潜在危险因素.方法:回顾性分析2008-12/2011-12经手术治疗的217例食管癌患者的临床病理资料,对影响食管癌淋巴结转移的潜在危险因素进行单因素及多因素分析.结果:217例食管癌中淋巴结转移124例,转移率为57.1%.单因素分析结果显示,食管癌淋巴结转移与病理分级、病变长度、浸润深度、有无脉管癌栓、有无神经癌栓有关,分化不良、病变长度>5cm、浸润至外膜、伴有脉管癌栓及神经癌栓的患者,更易发生淋巴结转移.淋巴结转移与性别、年龄、发病部位、病理类型无关.Logistic多因素回归分析显示,浸润至外膜(OR=4.710)、有脉管癌栓(OR=44.954)、有神经癌栓(OR=7.264)是淋巴结转移的独立性危险因素.结论:肿瘤越长(体积越大),浸润深度越深,分化程度越低(病理分级越高),易发生淋巴结转移,有脉管癌栓及有神经癌栓者易发生淋巴结转移.

油酸致RDS过程继发性肝损害机制探讨

目的 :探讨油酸肺损伤所致 RDS过程进行性氧分压下降与肝组织脂质过氧化、中分子物质和一氧化氮、内皮素以及肝功能动态变化之间的关系。方法 :随机取日本大耳白兔 36只 ,分为对照组和油酸 30 min、6 0 m in、90 m in、12 0 min组。检测 MABP、血气以及血浆和肝组织 GSH - Px、MDA、MMS、NO、ET和肝功能的动态变化 ,同时进行肝组织电镜观察。结果 :实验组 Pa O2 和 MABP随时间延长呈进行性下降。反映肝功能的血浆 AL T、AST、AL P含量在实验组分别从 6 0 m in、12 0 m in和 30 m in后逐渐增加。血浆 AL P和 AL T含量与 Pa O2 变化之间呈负相关关系 ;与肝组织 MDA含量变化之间呈正相关关系 ;与肝组织 MMS含量变化之间也呈正相关关系。实验组血浆和肝组织 GSH- Px含量随时间延长逐渐降低 ,而 MDA含量却随时间延长逐渐增加。肝组织 GSH - Px和 MDA含量变化与 Pa O2 下降之间分别呈正相关和负相关关系。肝组织 GSH- Px与 MDA含量变化之间呈负相关关系 ;肝组织NOS含量在油酸注入后 30 min时代偿性增加 ,而从 6 0 min后又逐渐降低。实验组血浆和肝组织 MMS含量随时间延长逐渐增高。肝组织 MMS含量与 Pa O2 变化之间呈负相关关系。结论 :油酸所致单纯肺损伤过程中可伴发肝功能和肝结构的损伤 ,此损伤变化与