PD-L1与记忆性T细胞在肝囊型包虫病患者CD4^+T淋巴细胞中的表达及意义

目的检测程序性死亡受体配体-1(PD-L1)及记忆性T细胞在肝囊型包虫病患者CD4+T淋巴细胞中的表达,探讨其在细粒棘球蚴感染免疫逃避中的作用。方法具有包虫活性的肝包虫病患者42例,健康对照20例,取血,分离PBMC,流式细胞术检测PD-L1(CD274+)、CD45RO+及CD4+CD45RO+CD274+细胞比例,并分析PD-L1与CD45RO的相关性。结果肝囊型包虫病患者PBMC中PD-L1、CD45RO+及CD4+CD45RO+CD274+细胞比例均显著高于健康对照组(P<0.05);肝囊型包虫病患者的PD-L1与CD45RO呈显著正相关(P<0.05),健康对照组二者无显著相关关系(P>0.05)。结论在肝囊型包虫病患者的免疫反应中,PD-L1可能通过记忆性T淋巴细胞发挥促进包虫免疫逃避的作用。

细粒棘球蚴14-3-3与MKK2酵母双杂交载体的构建及自激活鉴定

目的构建细粒棘球幼(Eg)14-3-3与MKK2酵母双杂交系统,并对诱饵质粒进行自激活活性及毒性检测。方法从Eg cDNA中扩增Eg14-3-3基因和EgMKK2编码序列,将其克隆入酵母双杂交载体pGADT7和pGBKT7中,经PCR、限制性酶切鉴定及序列测定正确后,PEG/LiAc法转化酵母菌株,检测融合蛋白对酵母菌生长的影响和自激活活性。结果扩增Eg14-3-3和EgMKK2基因编码区全长分别为749bp和1 572bp。构建的pGBKT7-Eg14-3-3及pGADT7-EgMKK2重组质粒转化到酵母细胞Y2HGold中,检测表达蛋白对Y2HGold无毒性及自激活作用。结论 Eg14-3-3基因和EgMKK2编码序列表达的蛋白对酵母菌Y2HGold无毒性和自激活作用,为进一步运用酵母双杂交技术筛选与之相互作用的蛋白奠定了基础。