回族及维吾尔族圆头精子症患者的基因诊断、精子超微结构观察和辅助生殖结局分析

目的探讨2例少数民族(P1回族、P2维吾尔族)圆头精子症患者的临床表型、精子特点、遗传学病因以及辅助生殖结局。方法分析2例少数民族圆头精子症患者的临床资料和各种精液检查参数,观察精子超微结构,并利用全外显子检测技术和qPCR检测分析患者的遗传学病因,采用卵胞质内单精子注射联合卵母细胞激活技术(ICSI+AOA)进行辅助生殖治疗,并观察其助孕结局。结果2例患者均存在DPY19L2基因109681 bp纯合缺失,其中P2患者的DPY19L2基因缺失来源于近亲结婚的父母。P1患者精子活力低下,精子DNA碎片率高,精子形态为100%圆头精子,电镜下发现精子顶体缺失,同时存在质膜、线粒体和微管等超微结构缺陷;P2患者精子活力及精子DNA碎片率均正常,精子形态为100%圆头精子,电镜下观察发现精子主要缺陷为头部小而圆伴随顶体缺失,质膜、线粒体和微管等细胞器结构损伤与超微结构缺陷少见。2例患者夫妇均接受ICSI+AOA助孕,ICSI受精率P1患者夫妇为62.5%,P2患者夫妇为75%,均成功获得临床妊娠。结论DPY19L2基因异常在不同民族背景的圆头精子症患者中都是主要的致病遗传学原因。圆头精子可同时存在质膜、线粒体和微管等细胞器结构损伤与超微结构缺陷。ICSI+AOA是圆头精子症患者的有效辅助生殖治疗。

浅谈临床实验诊断学的教学设计与实践

临床实验诊断学是医学教育中的重要学科,对培养医学生的实践能力、临床思维模式和问题解决能力具有重要意义。然而,在当前的教学实践中存在一些问题,如教学内容与实践脱节、教学方法单一、实验条件与临床环境差异大以及考核方式不当。为了优化临床实验诊断学教学,可以采取一些对策,如融合问题导向学习法、构建临床模拟实验室、加强教学互动与反馈以及完善过程性评估体系。通过这些对策的实施,可以有效提升医学生的实践能力和问题解决能力,培养出更具临床思维模式的医学人才。

新疆地区新生儿遗传代谢病筛查早产儿与足月儿氨基酸参考区间的探讨

目的本研究旨在探索新疆地区新生儿遗传代谢病筛查早产儿与足月儿氨基酸含量的参考范围,以便为新生儿遗传代谢病筛查中氨基酸结果的解读提供科学依据。方法利用串联质谱非衍生化技术,对2022年5月至2023年12月新疆地区的6008例新生儿样本中氨基酸含量进行了测定。根据胎龄分为早产儿组和足月儿组,氨基酸参考区间采用百分位数法(P_(0.5)~P_(99.5))表示,两组间比较采用秩和检验。结果早产儿与足月儿11种氨基酸均呈非正态分布。除亮氨酸(LEU)和蛋氨酸(MET)早产儿与足月儿差异无统计学意义外,丙氨酸(ALA)、缬氨酸(VAL)、甘氨酸(GLY)、鸟氨酸(ORN)、精氨酸(ARG)、苯丙氨酸(PHE)、脯氨酸(PRO)、酪氨酸(TYR)、瓜氨酸(CIT)等指标差异均有统计学意义。结论新疆地区早产儿与足月儿氨基酸参考区间的建立可为新生儿遗传代谢病实验室筛查提供参考依据,减少误判风险,使疾病诊断趋于精准。

加强检验专业教学改革提高学生临床思维能力的研究

分析检验专业教学改革中采取提升临床思维能力的教学模式及教学效果。方法:选择我校2022年级检验专业学生作为观察对象,选择1班作为对照组(32人)、2班作为观察组(34人),分别采取常规带教模式、临床思维教学模式,观察不同带教模式对学生临床思维能力的影响及学生成绩情况及对教学模式的满意度。结果:观察组患者的思维能力、考核成绩各项评分及满意度均高于对照组,p<0.05。结论:在检验专业教学改革中,采取临床思维教学模式可改变传统教学模式的不足,培养学生临床思维能力,对检验专业教学改革具有积极的意义。

多囊卵巢综合征免疫学研究进展

多囊卵巢综合征(polycystic ovarian syndrome,PCOS)是育龄妇女中高发的内分泌紊乱和代谢异常的疾病,主要特征有排卵功能异常、高雄激素血症等,临床上主要表现为卵巢多囊样、月经紊乱、体毛多、肥胖、不孕、头发稀疏等。相关数据显示,如今该病在国外育龄妇女发病率高达20%,我国报道患病率在5%-10%之间,患者分布年龄段广泛[1]。

羊水穿刺产前诊断指征与羊水胎儿染色体核型关系研究

目的研究羊穿产前诊断指征与羊水胎儿染色体异常关系。方法选取我院2011年8月-2017年12月2499例有产前诊断指征的孕妇,并行羊膜腔穿刺检查羊水细胞染色体核型,分析不同产前诊断指征羊水胎儿异常染色体核型检出率和异常染色体核型构成情况。结果 (1)高龄孕妇组、产前血清学筛查高风险组、产前血清学筛查临界风险组、不良妊娠组、染色体异常组、超声异常组、产前无创DNA高风险组、其他原因组、同时具备多个指征组羊水胎儿异常染色体核型(不包括多态性变异)检出率分别是2.65%、4.44%、3.80%、1.67%、35.71%、7.49%、77.78%、10.91%、21.36%。(2)不同产前诊断指征组羊水胎儿异常染色体核型构成也有所不同,产前无创DNA高风险组羊水胎儿染色体异常均为数目异常,染色体异常组10例羊水胎儿染色体异常(不包括多态性变异)9例为结构异常,1例为21三体伴结构异常,其他产前诊断指征组羊水胎儿染色体异常(不包括多态性变异)既有数目异常也有结构异常。结论对具有产前诊断指征的孕妇应进行胎儿染色体核型诊断,发现染色体异常胎儿,对预防出生缺陷有重要意义。

89例卵巢储备正常不孕症患者首次早卵泡期长方案助孕失败改行拮抗剂方案疗效观察

目的 探讨卵巢储备正常不孕症患者首次早卵泡期长方案助孕失败再次助孕时改用拮抗剂方案助孕效果。方法 回顾性分析2020年3月至2021年9月在新疆医科大学第一附属医院行助孕治疗的卵巢储备正常且首次早卵泡期长方案助孕失败后改行拮抗剂方案助孕患者89例178新鲜周期临床资料,按照促排卵方案分为早卵泡期长方案组(A组)和拮抗剂方案组(B组),采用自身前后对照研究比较两种方案促排卵情况及临床结局。结果 促排卵情况方面:A组患者平均促性腺激素(Gn)天数及平均Gn总量均高于B组,组间差异有统计学意义(P<0.05),人绒毛膜促性腺激素(HCG)日≥14 mm卵泡数及HCG日内膜厚度A组略高于B组,差异无统计学意义,HCG日雌二醇(E2)水平及HCG日促黄体生成素(LH)水平A组明显低于B组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。实验室及临床结局方面:两组的获卵数基本一致,但两次分裂中期的成熟二级卵母细胞(MII卵)数、双原核(2PN)数、第3天(D3)可用胚胎数、D3优质胚胎数、可用囊胚形成率及临床妊娠率A组均明显低于B组,周期取消率B组低于A组,组间差异有统计学意义(P<0.05)。结论 对于前次早卵泡期长方案促排助孕失败卵巢储备正常患者改行拮抗剂方案可以减少Gn天数并降低Gn总量,同时可获得较好的实验室及临床结局,是理想的卵巢刺激替代方案。

高通量测序技术在介入性产前诊断中的应用

目的通过高通量测序技术(NGS)检测孕妇羊水细胞与染色体核型分析结果行对比,探讨NGS在羊水细胞产前诊断中的实际应用。方法选择2014年9月-2018年1月在新疆医科大学第一附属医院就诊的符合条件的孕妇共77例作为研究对象,年龄22~42(31±5)岁,孕龄18~27+4w。抽取孕妇羊水,提取羊水细胞DNA,制备测序文库,应用测序仪检测,所得的DNA序列与人类DNA参考数据库比对并作统计分析,并与同一样本染色体核型分析结果行对照分析。结果 77例羊水样本NGS技术检测结果例染色体数目异常,7例染色体片段缺失/重复;羊水核型结果:1例染色体结构异常,1例9号染色体臂间倒位,1例13号染色体与15号染色体罗伯逊异位。结论利用NGS检测羊水中胎儿DNA染色体数目异常,其敏感性高于染色体核型分析技术。染色体核型分析技术与高通量测序技术相结合,将在产前诊断工作中具有较好的临床实际应用价值。

单核苷酸多态性微阵列检测技术在介入性产前诊断中的应用

目的比较单核苷酸多态性微阵列(single nucleotide polymorphism array,SNP array)技术及羊水染色体核型分析技术在高危孕妇产前诊断中的意义。方法选择2017年1月-2018年1月在新疆医科大学第一附属医院就诊的a.高龄妊娠(年龄≥35岁)b.孕中期唐氏筛查高风险c.无创产前DNA提示结果异常d.B超提示胎儿异常e.曾有不良孕产史,符合以上条件一条或数条的孕妇共40例作为研究对象,年龄22~42(31±5)岁,孕龄18~27+4w。抽取孕妇羊水,提取羊水细胞DNA,芯片杂交,数据分析,检索国际公认的数据库信息进行结果的判读,并与同一样本染色体核型分析进行对照分析。结果 40例羊水样本处理后经SNP技术检测判定2例染色体数目异常,7例染色体片段缺失/重复;羊水细胞培养检出2例染色体数目异常,1例染色体结构异常,1例染色体结构正常多态性。结论两种分析技术对异常核型的检出率有明显的差异,染色体核型分析结合SNP array技术能有效提高遗传病的产前诊断检出率。

N-α-乙酰基转移酶10蛋白在宫颈癌中的表达及与患者临床特征的关系

目的探讨N-α-乙酰基转移酶10蛋白(NAA10p)在宫颈癌中的表达及与患者临床特征的关系。方法选取38例宫颈癌患者的宫颈癌组织及癌旁正常组织,采用免疫组织化学法检测NAA10p的表达情况,并对NAA10p表达与宫颈癌患者临床特征的关系进行分析。结果NAA10p在宫颈癌组织中的阳性表达率为73.68%,明显高于癌旁正常组织的23.68%,差异有统计学意义(P﹤0.01);分化程度为中高分化、国际妇产科联盟(FIGO)分期为Ⅰb~Ⅱa期和有淋巴结转移的宫颈癌患者宫颈癌组织中NAA10p阳性表达率均高于分化程度为低分化、FIGO分期为Ⅰa期和无淋巴结转移的患者,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。结论NAA10p在宫颈癌组织中的阳性表达率高于癌旁正常组织,分化程度为中高分化、FIGO分期Ⅰb~Ⅱa期和有淋巴结转移的宫颈癌患者的宫颈癌组织中阳性表达率较高,可作为判断宫颈癌发生发展及淋巴结转移的参考指标。

新疆地区汉、维吾尔族男性无精子患者与Y染色体微缺失关系的研究

目的探讨检测男性不育症患者Y染色体微缺失的临床意义。方法引用多重聚合酶链反应(PCR)对门诊392例男性不育患者行Y染色体AZFa、AZFb、AZFc、AZFd和SRY20个序列标签位点(STS)设计特异引物进行微缺失检测,同时进行精液常规检查。结果 392例男性不育患者中AZF基因微缺失患者共检出24例,总缺失率为6.12%,其中汉族无精子症组缺失率为6.19%,维吾尔族(以下简称维族)无精子症组缺失率为18.92%,汉、维族不育症患者Y染色体AZF微缺失率比较差异无统计学意义(P>0.05);汉、维族无精子症患者Y染色体AZF微缺失率比较差异有统计学意义(χ2=5.333,P=0.021),汉族与维族的Y染色体多位点联合缺失发生率比较差异有统计学意义(χ2=4.168,P=0.041)。结论汉、维族不育症男性患者中Y染色体AZF微缺失发生率存在种族差异,PCR检测AZF基因是诊断Y染色体AZF微缺失的较好的方法。

2016～2018年新疆地区新生儿遗传代谢疾病筛查情况分析

目的分析2016年至2018年新疆医科大学第一附属医院新筛中心新生儿疾病筛查数据,为目前新疆地区以及全国新生儿遗传代谢疾病的筛查情况提供参考依据。方法统计2016年至2018年我中心新生儿疾病筛查人数、确诊人数等,并对筛查覆盖率、疾病检出率等进行统计分析,以了解新疆地区新生儿疾病的筛查情况及发病率。结果 2016年至2018年共110 749例新生儿,筛查100 006例,筛查覆盖率90.30%,其中共检出高苯丙氨酸血症17例(其中苯丙酮尿症12例、轻度高苯丙氨酸血症5例),先天性甲状腺功能减低症62例,高TSH血症28例;男女四种疾病检出率比较无显著性差异。结论 2016年至2018年新生儿遗传代谢病筛查覆盖率稳步提高。由于地区差异,新疆地区新生儿遗传代谢病发病率高于全国平均水平。因此应该重视筛查工作的质量,发展筛查新技术,逐步使更多可预防的疾病纳入新生儿疾病筛查项目,对于提高人口素质有重要意义。

来曲唑造模与脱氢表雄酮造模对多囊卵巢综合征模型小鼠炎症状态的影响比较

目的探讨来曲唑(LET)造模与脱氢表雄酮(DHEA)造模对多囊卵巢综合征(PCOS)小鼠炎症状态的影响。方法将24只无特定病原级4~6周龄雌性C57BL/6小鼠随机分为DHEA对照组、DHEA干预组、LET对照组和LET干预组,每组6只。于每日上午固定时间,分别给予DHEA对照组小鼠皮下注射0.1 mL芝麻油,DHEA干预组小鼠皮下注射0.1 mL DHEA-芝麻油溶液,LET对照组小鼠灌胃0.2 mL生理盐水,LET干预组小鼠灌胃0.2 mL LET-生理盐水溶液;每次给药后对小鼠进行安抚,连续给药21 d。在造模的第2、4、6、8、10、12、14、16、18、20天测量各组小鼠的体质量。造模第11天到第20天,每天上午进行小鼠阴道液涂片,显微镜下计数涂片上有核上皮细胞、角化细胞、白细胞的数量,判断并记录小鼠所处动情时期。造模第22天进行腹腔注射麻醉,摘取眼球取血0.5 mL,采用酶联免疫吸附试验法检测各组小鼠血清雌二醇(E_(2))、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-17A(IL-17A)、白细胞介素-10(IL-10)水平。取血后颈椎脱臼处死小鼠,取双侧卵巢制备卵巢组织切片,苏木精-伊红染色法观察各组小鼠卵巢组织中成熟卵泡、囊性卵泡数量。结果造模的第2、4、6、8、10、12、14、16、18、20天,4组小鼠体质量比较差异无统计学意义(P>0.05)。DHEA对照组与LET对照组小鼠均存在规律性动情周期,而DHEA干预组与LET干预组小鼠则失去规律动情周期。给药21 d后,4组小鼠血清E_(2)、FSH、T、TNF-α、IL-17A、IL-10水平比较差异有统计学意义(F=22.370、8.754、893.601、58.966、218.815、23.596,P<0.01)。DHEA干预组小鼠血清E_(2)、FSH水平显著低于DHEA对照组,T水平显著高于DHEA对照组(P<0.01)。LET干预组小鼠E_(2)、FSH水平显著低于LET对照组,T水平显著高于LET对照组(P<0.01)。DHEA干预组与LET干预组小鼠血清E_(2)、FSH水平比较差异无统计学意义(P>0.05);DHEA干预组小鼠血清T水平显著高于LET干预组(P<0.01)。DHEA干预组小鼠血清TNF-α、IL-17A水平显著高于DHEA对照组,IL-10水平显著低于DHEA对照组(P<0.01)。LET干预组小鼠血清TNF-α、IL-17A水平显著高于LET对照组,IL-10水平显著低于LET对照组(P<0.01)。DHEA干预组小鼠血清TNF-α、IL-17A水平显著高于LET干预组,IL-10水平显著低于LET干预组(P<0.01)。给药21 d后,DHEA对照组和LET对照组小鼠卵巢体积正常,显示正常的原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡;DHEA干预组小鼠卵巢体积明显减小,无正常形态的原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡,囊性卵泡数明显增多;LET干预组小鼠卵巢体积正常,原始卵泡、初级卵泡、次级卵泡数量明显少于LET对照组,且囊性卵泡数明显增多。4组小鼠卵巢组织中成熟卵泡数、囊性卵泡数比较差异均有统计学意义(F=74.6430、17.937,P<0.01)。DHEA干预组小鼠卵巢组织中成熟卵泡数显著少于DHEA对照组(P<0.01),LET干预组小鼠卵巢组织中成熟卵泡数显著少于LET对照组(P<0.01)。DHEA干预组与LET干预组小鼠卵巢组织中成熟卵泡数比较差异无统计学意义(P>0.05)。DHEA干预组小鼠卵巢组织中囊性卵泡数显著多于DHEA对照组(P<0.01),LET干预组小鼠卵巢组织中囊性卵泡数显著多于LET对照组(P<0.01)。DHEA干预组小鼠卵巢组织中囊性卵泡数显著多于LET干预组(P<0.01)。结论DHEA及LET造模均可获得PCOS模型小鼠,但DHEA造模小鼠卵巢组织学改变更显著,炎症状态更显著,高雄激素血症和卵巢组织学特征改变也更为明显。

1161例遗传咨询者外周血染色体核型分析

目的通过对1161例遗传咨询者进行外周血染色体核型分析,探讨染色体异常与临床表现之间的关系,为临床咨询及处理提供参考依据。方法对新疆医科大学第一附属医院2018年10月至2018年12月1161例遗传咨询者采用外周血淋巴细胞培养,经G显带后进行染色体核型分析。结果1161例遗传咨询者共检出染色体异常54例,异常核型检出率为4.65%,其中常染色体异常43例,异常率为79.62%,性染色体异常11例,异常率为20.37%。染色体多态性90例,构成比为7.75%。结论染色体核型异常是不良孕产史、不孕不育、智力低下及发育异常的重要原因之一,临床上应重视对上述疾病的染色体核型检查,对寻找病因、指导优生、临床咨询具有重要意义。

FMR1基因CGG重复数在复发性流产人群中的分布及卵巢功能相关性研究

目的探索新疆乌鲁木齐复发性流产患者脆性X智力低下基因1基因(CGG)n重复次数的分布状态,以及与卵巢功能的相关性。方法收集2017年6月至2019年1月就诊于新疆乌鲁木齐市新疆医科大学第一附属医院妇科,生殖医学中心的复发性流产患者,均在28w前有连续2次或2次以上的妊娠终止。抽血提取基因组DNA、应用AmplideXTMFMR1PCR专利技术进行PCR扩增以及毛细管电泳技术对血液标本进行FMR1基因(CGG)n重复基因进行检测,并对数据进行统计分析。结果对新疆乌鲁木齐48名复发性流产患者进行了FMR1(CGG)n的检测,在所有检测样本中,共检测到13种等位基因,CGG重复序列范围为20-54,98%的样本两个等位FMR1基因的(CGG)n为野生型,2%为突变杂合型。其中29(33.3%)和30(25.1%)最常见,其次为32,31。在整个检测队列中,我们发现了1例灰色区域,CGG拷贝数为54,未发现前突变样本和全突变样本。FMRl(CGG)n重复序列和基因型别与抗苗勒氏激素进行组间比较,差异王(P>0.05)。结论FMRl(CGG)n重复序列和基因型别与卵巢功能无相关性。新疆乌鲁木齐复发性流产患者FMR1(CGG)n重复序列与基因型别分布,与既往国内研究相似,但变异范围存在升高趋势,且呈高度集中分布。FMR1基因灰色区域等位基因的发病率明显高于亚洲及国内发病率,预测FMR1基因的(CGG)n可能与复发性流产有关,但仍需大样本数据的进一步证实。

根据孕周调整先天性肾上腺皮质增生症筛查切值的初步研究

目的探讨孕周与性别对新生儿足跟血17-羟孕酮浓度的影响,建立切合新疆地区实际情况的筛查切值。方法选择2019年8月至2020年12月于我中心进行先天性肾上腺皮质增生症筛查的新生儿足跟血17-羟孕酮浓度数据进行回顾性分析。将新生儿按照性别、孕周进行分组并比较各组间17-羟孕酮浓度的差异,采用百分位数法优化设定筛查切值。结果2019年8月至2020年12月共9552例新生儿参加先天性肾上腺皮质增生症筛查,其中男性4969人,女性4583人;早产儿901人,足月儿8651人。分析显示男性新生儿的17-羟孕酮浓度高于女性新生儿,差异具有极显著性(P<0.01);早产儿的17-羟孕酮的浓度高于足月儿,差异具有极显著性(P<0.01)。最终根据孕周分组分别设定筛查切值,早产儿切值设定为30nmol/L,足月儿切值设定为12nmol/L。采用新的切值后,筛查阳性率从2.59%下降至0.96%,差异具有显著性(P<0.05)。结论与足月儿相比,早产儿17-羟孕酮浓度高,易导致筛查假阳性,应根据孕周分别设定切值可提高检验效能。

极低/超低体质量新生儿促甲状腺素水平及随采血日龄变化趋势的研究

目的 探索极低/超低体质量新生儿出生后促甲状腺素浓度水平及变化趋势。方法 回顾性分析2017—2018年新疆地区81520名新生儿筛查数据,剔除不完整数据与CH确诊患儿数据,其余新生儿按照出生体质量分为极低/超低体质量组、低体质量组、正常体质量组、超重组,再将各组按采血日龄分为3~7天采血组与超7天采血组,分析各组TSH浓度差异。结果 符合纳入标准的新生儿共计81405人。分析结果显示极低/超低体质量组中3~7天采血组TSH浓度低于超7天采血组,而正常体质量组与超重组中3~7天采血组TSH浓度高于超7天采血组,差异均具有极显著性(P<0.01);3~7天采血组中极低/超低体质量组TSH浓度低于低体质量组、正常体质量组与超重组,超7天采血组中极低/超低体质量组与低体质量组TSH浓度高于正常体质量组与超重组,差异均具有显著性(P<0.05)。结论 极低/超低体质量新生儿出生早期TSH浓度低于正常体质量/超重新生儿,但在出生7天后可能存在延迟升高,其切值的设定应扩大数据量进一步分析研究。