硫酸吲哚酚通过芳香烃受体介导p53的表达

目的探讨硫酸吲哚酚(indophenol sulfate,IS)通过芳香烃受体(aromatic hydrocarbon receptor,AHR)介导p53的表达水平变化及其作用机制。方法体外培养人主动脉血管平滑肌细胞,分别以250、500、1000μmol/L IS干预细胞48h,Western blot法分别检测p53的蛋白表达,观察不同浓度的IS对p53变化的影响。以500μmol/L IS干预细胞12、24、48h,Western blot法分别检测p53的蛋白表达,观察IS干预不同时间对p53变化的影响。细胞分为对照组、IS组(500μmol/L IS处理24h/48h)、有机阴离子转运体(organic anion transporter,OAT)抑制剂丙磺舒组(150μmol/L丙磺舒处理24h)、IS+丙磺舒组(150μmol/L丙磺舒干预24h后加入500μmol/L IS干预24h/48h)、芳香烃受体(AHR)抑制剂CH223191组(10μmol/L CH223191处理24h)、IS+CH223191组(10μmol/L CH223191干预24h后加入500μmol/L IS干预24h/48h),实时荧光定量PCR、Western blot法分别检测p53的mRNA和蛋白表达,观察IS通过AHR介导p53的表达水平变化。结果IS以时间依赖和浓度依赖的方式诱导p53的表达,与对照组比较,IS处理过的人主动脉血管平滑肌细胞上p53的蛋白的表达增加(P<0.05)。与IS组比较,IS+CH-223191和IS+丙磺舒干预后的细胞上p53的表达均降低(P<0.05)。结论IS可促进人主动脉血管平滑肌细胞上p53的表达,AHR抑制剂CH223191可拮抗IS对于p53表达的影响。