探析PBL联合CBL双向教学模式在药物制剂教学中的应用效果

探析问题导向教学法(PBL)联合案例教学法(CBL)双向教学模式在药物制剂教学中的应用效果。 方法:选取学院 2017 级药学专业共计 96 名学生,将其 1:1 随机分为对照组与研究组。 研究组使用 PBL CBL 教学模式进行教学,对照组使用传统教学模式进行教学。 以考核与调查问卷形式对教学效果进行统计分析,比较教学满意度、考核成绩、教学趣味性和学生思维能力。 结果:1)相较于对照组,研究组学生的教学满意度更高(95.83% vs54.17% ),有统计学差异(P<0.05)。 2)研究组学生主观题、客观题和考核总成绩为(45.63±5.69)分、(39.05±3.40)分、(84.15±4.07)分,高于对照组的(37.80±4.11)分、(25.67±2.78)分、(63.45±7.12),有统计学差异(P<0.05)。 3)相较于对照组,研究组学生的教学趣味性评分和 CTDI- CV 评分均更高,有统计学差异(P<0.05)。 结论:在药物制剂教学中融入 PBL 联合 CBL 双向教学模式,能更大程度上激发学生的学习兴趣,有助于培养分析问题、解决问题的思维能力,并改善课堂教学效果和考核成绩,值得推广使用。

KLF4在肾透明细胞癌侵袭和迁移中的作用及其与SKA1的靶向调控关系探讨

目的探讨肾透明细胞癌(ccRCC)组织中锌指转录调节因子4(KLF4)的表达变化,及其调控纺锤体和动粒相关复合体亚基1(SKA1)促进ccRCC细胞侵袭、迁移的作用。方法从癌症和肿瘤基因图谱(TCGA)数据库下载440例ccRCC原位癌组织和80例伴有远处转移的ccRCC组织的转录组测序数据,分析KLF4在原位癌组织和伴有远处转移癌组织中的表达差异。取人肾癌细胞786-O、ACHN,分为KLF4过表达组、空载体组、共表达KLF4/SKA1组,采用慢病毒载体技术,分别转染pCMV-KLF4、pCMV、pCMV-KLF4和pCMV-SKA1质粒;采用Transwell小室实验观察各组细胞侵袭和迁移能力,Western blotting法检测细胞上皮间质转化相关蛋白E-cadherin、N-cadherin、Vimentin表达。取786-0、ACHN细胞,分为KLF4干扰组及干扰对照组、KLF4过表达组及空载体组,KLF4干扰组和干扰对照组分别转染siKLF4和siNC,KLF4过表达组和空载体组分别转染pCMV-KLF4、pCMV质粒;采用实时荧光定量PCR法检测细胞SKA1 mRNA表达,Western blotting法检测细胞SKA1蛋白表达;利用Jaspar和ConTra V3在线工具分析预测KLF4在SKA1启动子区的结合位点,并采用双荧光素酶报告实验进行验证。结果KLF4在伴有远处转移的ccRCC组织中的表达低于ccRCC原位癌组织(P<0.01)。在786-O和ACHN细胞中,与空载体组相比,过表达KLF4组细胞侵袭和迁移能力降低(P均<0.01);与过表达KLF4组比较,共表达KLF4/SKA1组细胞侵袭和迁移能力增加(P均<0.01)。与空载体组相比,过表达KLF4组E-cadherin蛋白表达水平升高、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平降低;与过表达KLF4组比较,共表达KLF4/SKA1组E-cadherin蛋白表达水平降低、N-cadherin和Vimentin蛋白表达水平升高(P均<0.05)。与siNC组相比,siKLF4组SKA1 mRNA及蛋白表达水平均升高;与pCMV空载体组相比,pKLF4过表达组SKA1 mRNA及蛋白表达水平均下降(P均<0.01)。SKA1转录起始位点上游850~900 bp启动子序列中存在KLF4的结合位点。双荧光素酶报告实验结果显示,与pSKA1-MUT+pKLF4/pCMV、pSKA1-WT+pCMV组比较,pSKA1-WT+pKLF4组荧光素酶活性降低(P均<0.01)。结论KLF4表达下调与ccRCC恶性进展相关,KLF4可通过结合SKA1启动子区特定序列负向调控SKA1表达,从而抑制ccRCC细胞的侵袭和迁移。

紫草素对Cx32蛋白组成的细胞缝隙连接功能的影响

目的探究紫草素对宫颈癌Hela细胞缝隙连接通讯功能(gap junctional intercellular communication,GJIC)和缝隙连接蛋白32(Cx32蛋白)表达水平的影响。方法将细胞分成两组培养,加多西环素为诱导组,不加多西环素为非诱导组,采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)法检测不同浓度紫草素对Hela细胞毒性的影响;采用细胞接种荧光示踪法(parachute assay)观察不同浓度紫草素对缝隙连接(gap junction,GJ)功能的影响;采用蛋白免疫印迹法(western-blot)研究紫草素在影响GJ功能浓度范围内对Cx32蛋白表达的影响。结果紫草素在0~4μmol/L浓度时对非诱导组Hela细胞无毒性作用;紫草素在0~3μmol/L浓度时对诱导组Hela细胞无毒性作用;诱导组细胞在紫草素1~3μmol/L浓度时荧光传递量会随浓度增加;紫草素(1~3μmol/L)能浓度依赖性增强GJ功能及Cx32蛋白表达量。结论紫草素能够增强Cx32组成的细胞GJ功能,这种增强作用可能与其增加Cx32蛋白表达水平有关。

肺腺癌中AK2表达与EGFR突变及预后的相关性分析

目的探讨腺苷酸激酶2(adenylate kinase2,AK2)在肺腺癌中的表达情况及其与表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)基因突变的相关性并分析其预后预测价值。方法选取2013年2月至2016年9月经病理学确诊的肺腺癌患者145例,利用免疫组织化学法检测AK2在肺腺癌组织中的表达,分析其与EGFR突变及临床病理特征之间的相关性;采用Kaplan-Meier法进行生存分析;以Cox比例风险回归模型进一步分析患者无疾病生存期(diseasefree survival,DFS)的影响因素。结果AK2在肺腺癌组织中的表达水平高于对应癌旁组织(P<0.001)。AK2高表达组(强染色)和弱表达组(中等、弱染色及阴性)的EGFR突变率分别为70.0%和49.4%,差异具有统计学意义(χ^2=6.117,P=0.013)。伴有EGFR突变的患者中,AK2表达与肿瘤最大径、TNM分期、淋巴结转移、胸膜侵犯、突变类型显著相关(P<0.05),而与其他临床特征无相关性。生存分析表明,在EGFR突变患者中,AK2高表达组和弱表达组的中位DFS分别为15.0和21.0个月,差异有统计学意义(χ^2=5.126,P=0.024);而EGFR未突变患者AK2高表达与弱表达患者的中位DFS差异无统计学意义(χ^2=2.467,P=0.117)。单因素分析显示,AK2水平、EGFR突变、肿瘤最大径、TNM分期、淋巴结转移和胸膜侵犯均为影响肺腺癌患者DFS的因素;进一步进行多因素Cox比例风险回归模型分析表明,AK2高表达(HR=1.555,95%CI:1.021~2.369,P=0.040)和淋巴结转移(HR=1.953,95%CI:1.181~3.230,P=0.009)为肺腺癌患者DFS的独立影响因素。结论肺腺癌组织AK2表达水平与EGFR突变率呈正向关联,癌组织高表达AK2预示较差的预后。

背景荧光猝灭-免疫层析定量检测尿纤维连接蛋白及膀胱癌辅助诊断的应用

目的:采用基于背景荧光猝灭-免疫层析技术研制的尿纤维连接蛋白(Fn)定量检测卡,建立一种快速、简单、无创的定量检测膀胱癌肿瘤标记物的方法。方法:使用Fn定量检测卡,分别检测尿液样本膀胱癌组50例、健康人组100例、其他部位肿瘤组50例和良性泌尿系统疾病组14例,利用统计分析确定出膀胱癌患者cutoff值、灵敏度、特异度,对检测结果进行LSD-t多重比较显著性分析。结果:在Fn检测结果统计分析中,膀胱癌患者组与其他各组Fn值比较差异均有统计学意义(P<0.05),而其他各组之间两两比较差异均无统计学意义(P>0.05),ROC-Fn曲线中得出cut-off为324.05ng/ml,灵敏度为70.0%,特异度为99.9%。结论:Fn检测卡能定量检测尿液中Fn含量,有较高的专属性,检测速度快,有望成为膀胱癌辅助诊疗的新方法。