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多伞阿魏简单重复序列区间-聚合酶链反应体系的建立和优化
被引量:
4
1
作者
盛萍
苗莉娟
+2 位作者
安露莎
姚蓝
詹羽娇
《中国药房》
CAS
CSCD
2014年第15期1345-1349,共5页
目的:建立并优化多伞阿魏简单重复序列区间(ISSR)-聚合酶链反应(PCR)体系。方法:通过单因素试验确定影响多伞阿魏ISSR-PCR扩增结果的Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、DNA模板最佳水平范围。对Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板...
目的:建立并优化多伞阿魏简单重复序列区间(ISSR)-聚合酶链反应(PCR)体系。方法:通过单因素试验确定影响多伞阿魏ISSR-PCR扩增结果的Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、DNA模板最佳水平范围。对Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA进行5因素4水平的正交试验,优选最佳ISSR-PCR体系条件。ISSR-PCR扩增结果用SPSS 18.0统计软件分析。结果:不同水平的因素对PCR均有明显影响,其中Mg2+、dNTPs、引物影响最大。多伞阿魏ISSR-PCR最佳反应体系为:在50μl的反应体系中含有10×Taq Buffer 5μl、Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs 0.4 mmol/L、引物0.4μmol/L、Taq DNA聚合酶1.75 u/50μl、DNA模板0.25 ng/μl。在此基础上,从100条引物中筛选出15条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。结论:建立的多伞阿魏ISSR-PCR体系具有较高的稳定性和重现性,可为进一步利用ISSR技术进行多伞阿魏遗传多样性分析、不同种源鉴定及亲缘关系分析提供基础。
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关键词
多伞阿魏
简单重复序列区间一聚合酶链反应体系
单因素试验
正交试验
原文传递
题名
多伞阿魏简单重复序列区间-聚合酶链反应体系的建立和优化
被引量:
4
1
作者
盛萍
苗莉娟
安露莎
姚蓝
詹羽娇
机构
新疆名医名方与特色方剂学重最实验室
新疆
医科大学中医学院
出处
《中国药房》
CAS
CSCD
2014年第15期1345-1349,共5页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81060364)
文摘
目的:建立并优化多伞阿魏简单重复序列区间(ISSR)-聚合酶链反应(PCR)体系。方法:通过单因素试验确定影响多伞阿魏ISSR-PCR扩增结果的Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、DNA模板最佳水平范围。对Mg2+、dNTPs、引物、Taq DNA聚合酶、模板DNA进行5因素4水平的正交试验,优选最佳ISSR-PCR体系条件。ISSR-PCR扩增结果用SPSS 18.0统计软件分析。结果:不同水平的因素对PCR均有明显影响,其中Mg2+、dNTPs、引物影响最大。多伞阿魏ISSR-PCR最佳反应体系为:在50μl的反应体系中含有10×Taq Buffer 5μl、Mg2+2.0 mmol/L、dNTPs 0.4 mmol/L、引物0.4μmol/L、Taq DNA聚合酶1.75 u/50μl、DNA模板0.25 ng/μl。在此基础上,从100条引物中筛选出15条扩增稳定、多态性丰富的ISSR引物。结论:建立的多伞阿魏ISSR-PCR体系具有较高的稳定性和重现性,可为进一步利用ISSR技术进行多伞阿魏遗传多样性分析、不同种源鉴定及亲缘关系分析提供基础。
关键词
多伞阿魏
简单重复序列区间一聚合酶链反应体系
单因素试验
正交试验
Keywords
Ferulaferulaenides
ISSR-PCR system
Single factor test
Orthogonal experiment
分类号
R28 [医药卫生—中药学]
R932 [医药卫生—生药学]
原文传递
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
多伞阿魏简单重复序列区间-聚合酶链反应体系的建立和优化
盛萍
苗莉娟
安露莎
姚蓝
詹羽娇
《中国药房》
CAS
CSCD
2014
4
原文传递
已选择
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参考文献
引证文献
统计分析
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