心脏瓣膜病房颤患者左右心房纤维化机制比较

目的探讨心脏瓣膜病(瓣膜病)慢性房颤患者左右心房肌间质纤维化的分子生物学机制是否存在差异。方法接受开胸换瓣的手术患者45例,慢性房颤患者27例,窦性心律患者18例,术中分别取左、右心耳组织,采用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定I型胶原、III型胶原、基质金属蛋白酶-1、9(MMP1、MMP9)以及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TMP1)的mRNA表达水平。结果①与窦性心律组相比,慢性房颤组患者左、右心房肌组织中I型胶原、MMP1、MMP9的mRNA表达水平均上调(P<0.05),TMP1的表达水平均下调(P<0.01)。②窦性心律组患者左右心房肌组之间I型胶原、III型胶原、MMP1、MMP9、TMP1的mRNA表达水平差异均无显著性(P>0.05)。③慢性房颤组患者MMP1的mRNA在右心房肌组织中表达水平较左心房上调(P<0.05),MMP9的mRNA在左心房肌组织中表达水平较右心房上调(P<0.01)。④无论左心房还是右心房,MMP1、MMP9的mRNA表达水平均与I型胶原的mRNA表达水平呈正相关,与TMP1的mRNA表达水平呈负相关。结论心房肌组织中MMP1/TMP1以及MMP9/TMP1的mRNA表达水平失衡引起I型胶原转录水平的改变,可能是瓣膜病慢性房颤患者心房肌间质纤维化的分子基础,而左、右心房间质纤维化是被MMP1和MMP9差异化调控的。

慢性心房颤动患者心房肌钙转运调控蛋白基因转录表达的改变

目的探讨心房颤动(AF)时心房肌细胞钙超载的原因及其在AF发生和维持中的作用。方法采集风湿性心脏瓣膜病窦性心律患者12例(对照组)和AF患者14例(AF组)的右心耳组织,采用RT-PCR方法检测心房肌钙转运调控蛋白mRNA表达水平,测量AF患者左右心房内径、二尖瓣口面积和肺动脉收缩压。结果与对照组相比,AF组患者L-型电压依赖钙通道a1c亚基(LVDCCa1c)、肌浆网Ca2+-ATP酶和兰尼碱受体(RYR2)的mRNA表达水平显著下调(P均<0.01),三磷酸肌醇受体(IP3R1)的mRNA表达水平上调(P<0.05),而磷酸受纳蛋白和肌集钙蛋白的mRNA表达水平无明显改变(P均>0.05)。AF组患者肌浆网Ca2+-ATP酶的mRNA表达水平与左心房内径呈负相关(r=-0.573,P=0.032),与二尖瓣口面积呈正相关(r=0.625,P=0.017);LVDCCa1c的mRNA表达水平与二尖瓣口面积呈正相关(r=0.719,P=0.004)。结论细胞内钙超载机制可能参与了AF的发生和维持,心房肌钙转运调控蛋白mRNA表达异常可能是钙超载的分子生物学机制,钙转运调控蛋白mRNA表达异常与左心房解剖学改变之间存在内在联系。

风湿性心脏病慢性心房颤动患者钙转运调控蛋白和钙激活中性蛋白酶基因转录的表达改变

目的测定心房肌钙转运调控蛋白和钙激活中性蛋白酶(calpain1)的mRNA表达,探讨风湿性心脏瓣膜病(风心病)心房颤动(房颤)患者心房肌电重构和结构重构以及心功能下降的分子生物学机制及其在房颤发生、维持中的作用。方法采集风心病窦性心律组患者12例和房颤组患者16例的右心耳组织,应用半定量逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)方法,测定心房肌钙转运调控蛋白和calpain1的mRNA表达水平。结果与窦性心律组相比,房颤组L-型电压依赖钙通道a1c亚基(LVDCCa1c)、肌浆网Ca2+-ATP酶、兰尼碱受体(RYR2)的mRNA表达水平明显下调(均为P<0.01),三磷酸肌醇受体(IP3R1)的mRNA表达水平上调(P<0.05),房颤组心房肌calpain1的mRNA表达水平上调(P<0.05),且与LVDCCa1c的mRNA表达呈负相关(r=-0.583,P<0.05)。结论房颤患者心房肌钙转运调控蛋白和calpain1转录水平调控失衡可能是心房肌电重构和结构重构以及心功能下降的分子生物学机制之一,与房颤的发生和维持有关。

转化生长因子β1基因标签单核苷酸多态性与新疆汉族原发性高血压相关性研究

目的 研究转化生长因子β1TGF-β1基因标签单核苷酸多态（tSNP）及血浆水平与新疆汉族原发性高血压（EH）的关系,阐明连锁不平衡（LD）模式以及单体型分布特征.方法 采用整群抽取随机抽样的方式,以新疆沙湾县732例汉族人（EH组365例,对照组367例）为研究对象,进行流行病学调查和临床检查,并采集血样.用双抗体夹心法（ELISA试剂盒）测量TGF-β1浆浓度.SNaPshot方法进行基因分型.结果 （1）TGF-β1因rs11466345位点等位基因A、G在EH组和对照组中分布频率分别为69.7%、30.3%、74.4%、25.6%,EH组G等位基因频率高于对照组（χ^2=3.949,P=0.047）,G等位基因患病风险为A等位基因1.261倍（95%CI 1.003～1.585,P=0.047）,其他tSNP基因型及等位基因频率在EH组和对照组分布差异元统计学意义（P〉0.05）.（2）除m11466345位点外,其他tSNP位点间存在强LD,其构成的单体型频率在EH及对照组中分布差异无统计学意义（P〉0.05）.（3）TGF-β1因tSNP在EH组与对照组各基因型和等位基因之间TGF-β1浆水平差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 TGF-β1因rs 11466345G等位基因可能是新疆汉族EH的遗传易感基因,其他tSNP可能与该民族EH不相关,除rs11466345位点外,其余tSNP位点间存在强LD,其构成的单体型与EH无关;在新疆汉族人群中TGF-β1因tSNP与TGF-β1浆水平不相关.

慢性房颤患者左右心房胶原和基质金属蛋白酶表达差异

本文旨在研究慢性房颤患者左右心房胶原、基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)、基质金属蛋白酶抑制剂(tissue inhibitors of metalloproteinases,TIMPs)的mRNA水平是否存在差异。选择接受开胸换心脏瓣膜的手术病人共45例,其中慢性房颤患者27例,窦性心律患者18例;术中分别取左、右心耳组织,采用半定量RT-PCR法测定I型胶原、III型胶原、基质金属蛋白酶-1,9(MMP1、MMP9)以及基质金属蛋白酶抑制剂-1(TMP1)的mRNA表达水平。结果显示:(1)与窦性心律组相比,慢性房颤组患者左、右心房肌组织中I型胶原、MMP1、MMP9的mRNA表达水平均上调(P<0.05),TMP1的表达水平均下调(P<0.01);(2)窦性心律组患者左、右心房肌组之间I型胶原、III型胶原、MMP1、MMP9、TMP1的mRNA表达水平的差异均无统计学显著意义(P>0.05);(3)慢性房颤组患者MMP1的mRNA在右心房肌组织中表达水平较左心房高(P<0.05),MMP9的mRNA在左心房肌组织中表达水平较右心房高(P<0.01);(4)无论左心房还是右心房,MMP1、MMP9的mRNA表达水平均与I型胶原的mRNA表达水平呈正相关,与TMP1的mRNA表达水平呈负相关。以上结果表明,心房肌组织中MMP1/TMP1以及MMP9/TMP1的mRNA表达水平失衡引起I型胶原转录水平的改变,可能是慢性房颤患者心房肌间质纤维化的分子基础,在慢性房颤的过程中,MMPs的mRNA在左、右心房的表达是有差异的。

心脏瓣膜病心房颤动患者心房肌超极化激活环化核苷酸门控通道基因表达的研究

目的研究心脏瓣膜病心房颤动（房颤）患者心房肌超极化激活环化核苷酸门控通道（HCN）各亚型及其调控因子环腺苷酸（cAMP）的基因转录，探讨房颤患者心房肌超极化激活电流（If）改变的分子机制。方法心外科心脏瓣膜病需开胸换瓣的病人45例，分为两组，其中房颤者27例，窦性心律者18例，术中取左心房组织，采用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT—PCR）测定HCN1、HCN2、HCN4、cAMP的mRNA的含量。结果同窦性心律组相比，房颤组患者心房肌HCN2、14CN4的mRNA表达水平上调（P〈0．05），HCN1、cAMP的mRNA表达水平在房颤组患者中亦有增高，但差异无统计学意义（P〉0．05）。HCN2的mRNA表达与左心房内径呈正相关（r=0．441，P=0．002）。结论心房肌HCN2、HCN4的mRNA表达水平上调可能是心脏瓣膜病房颤患者心房肌If电流改变的重要分子基础，通过If的改变进一步参与心房的电重构。

慢性心房颤动心房肌间质纤维化的分子机制研究

目的研究心脏瓣膜病慢性心房颤动（房颤）患者心房肌问质纤维化的分子生物学机制。方法心脏瓣膜病接受瓣膜置换手术患者45例，慢性房颤27例，窦性心律18例，手术中取右心耳组织，采用半定量逆转录一聚合酶链反应测定Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原、基质金属蛋白酶（MMPs）中胶原酶（MMP1、MMP8、MMP13）以及基质金属蛋白酶抑制剂（TIMPs）中TMP1、TMP2、TMP3、TMP4的mRNA表达水平。结果（1）与窦性心律组比较，慢性房颤组Ⅰ型胶原、MMP13、MMPl的mRNA表达上调（P〈0．05），TMP1、TMP2、TMP3的mRNA表达下调（P〈0．05）。（2）MMP1的mRNA表达与I型胶原的mRNA表达、左心房内径呈正相关，与TMP1的mRNA表达呈负相关。MMP13的mRNA表达与I型胶原的mRNA表达、左心房内径呈正相关，与TMP3的mRNA表达呈负相关。结论慢性房颤患者心房肌组织中MMP1／TMPI以及MMP13／TMP3的基因转录表达水平失衡引起Ⅰ型胶原转录水平的改变，可能是慢性房颤患者心房肌间质纤维化的分子基础。

心房肌钙激活中性蛋白酶基因转录表达改变与心房颤动的关系

目的研究风湿性心脏瓣膜病（风心病）心房颤动（房颤）患者心房肌细胞钙激活中性蛋白酶（calpain1、calpain2）、钙激活中性蛋白酶（calpastatin）及L-型电压依赖钙通道alc亚基（LVDCCalc）的基因转录，探讨房颤患者心房肌电重构和结构重构以及心功能下降的分子生物学机制及其在房颤发生维持中的作用。方法采集风心病窦性心律组患者12例和房颤组患者16例的右心耳组织，应用半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）方法，测定心房肌calpain1、calpain2、calpastatin及LVDCCalc的mRNA表达水平。应用电镜观察房颤组与窦性心律组心房肌细胞超微结构。结果与窦性心律组相比，房颤组心房肌calpain1的mRNA表达水平上调（P〈0．05），LVDCCalc的mRNA表达水平显著下调（P〈0．01），且与calpainl的mRNA表达呈负相关（r=-0．583，P=0．019），而calpain2和calpastatin的mRNA表达水平差异无统计学意义（P〉0．05）；电镜结果显示房颤组心房肌细胞超微结构发生明显变化。结论房颤患者心房肌细胞calpain1和LVDCCalc的转录水平调控失衡，提示calpain1激活影响心肌细胞结构和通道蛋白水平，与房颤心房电重构和结构重构有关。

异氟烷后处理减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时TGF-β3/Smad3信号通路与神经元凋亡的关系

目的评价异氟烷后处理减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤时转化生长因子β3(TGF-β3)/果蝇MAD类似基因3(Smad3)信号通路与神经元凋亡的关系。方法清洁级健康雄性SD大鼠60只,6~8周龄,体重210~230 g,采用随机数字表法分为5组(n=12):假手术组(S组)、脑缺血再灌注组(I/R组)、脑缺血再灌注+异氟烷后处理组(I/R+ISO组)、脑缺血再灌注+吡非尼酮组(I/R+P组)和脑缺血再灌注+异氟烷后处理+吡非尼酮组(I/R+ISO+P组)。采用阻塞大脑中动脉1.5 h、再灌注24 h的方法制备大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型。I/R+P组及I/R+ISO+P组于缺血前30 min时侧脑室注射TGF-β3抑制剂吡非尼酮5μg/kg;I/R+ISO组及I/R+ISO+P组于再灌注即刻吸入1.5%异氟烷1 h。再灌注24 h时,行神经功能缺损评分,然后处死大鼠,取脑组织,采用尼氏染色法测定神经元损伤率,采用TUNEL法测定神经元凋亡率,采用免疫荧光法测定TGF-β3表达,采用Western blot法检测TGF-β3、磷酸化Smad3(p-Smad3)、caspase-3、Bax和Bcl-2的表达水平。结果与S组比较,I/R组神经功能缺损评分、神经元损伤率和神经元凋亡率升高,脑组织TGF-β3、caspase-3和Bax表达上调,p-Smad3和Bcl-2表达下调(P<0.05);与I/R组比较,I/R+ISO组神经功能缺损评分、神经元损伤率和神经元凋亡率降低,脑组织TGF-β3、p-Smad3和Bcl-2表达上调,caspase-3和Bax表达下调,I/R+P组神经功能缺损评分、神经元损伤率和神经元凋亡率升高,脑组织TGF-β3和p-Smad3表达下调,caspase-3表达上调(P<0.05);与I/R+ISO组比较,I/R+ISO+P组神经功能缺损评分、神经元损伤率和神经元凋亡率升高,脑组织TGF-β3、p-Smad3和Bcl-2表达下调,caspase-3和Bax表达上调(P<0.05)。结论异氟烷后处理可通过激活TGF-β3/Smad3信号通路,抑制神经元凋亡,减轻大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤。

心脏瓣膜病心房颤动患者左心房HCN通道及5-HT4一R表达的研究

目的研究心脏瓣膜病心房颤动（房颤）患者左心房肌超极化激活环化核苷酸门控通道（HCN）各亚型及其调节受体5一羟色胺4受体（5-HT4一R）基因表达及蛋白表达。方法86例心脏瓣膜置换术后患者，窦性心律38例，房颤48例，术中取左心耳组织，用实时定量聚合酶链反应（pcR）和蛋白免疫印记法（westernblot）的方法测定HCN通道各亚型及5-HT4．R基因表达和蛋白表达。结果同窦性心律组相比，房颤组患者心房肌HCN2、HCN4的mRNA表达及蛋白表达水平上调，5-HT4-RmRNA表达及蛋白表达水平下调，HCNl的mRNA表达及蛋白表达在房颤组患者中亦有增高，但差异无统计学意义。HCN2的mRNA表达及蛋白表达与左心房内径呈正相关。5-HT4-RmRNA表达水平下调与左心房内径呈负相关。结论左心房肌HCN2、HCN4的mRNA表达及蛋白表达上调及5-HT4．RmRNA表达及蛋白表达水平下调可能是瓣膜病房颤患者左心房肌电重构的分子基础之一。