细粒棘球蚴原头蚴包囊和原头蚴成虫抑制差减杂交文库中差异表达基因的筛选及分析

细粒棘球绦虫原头蚴(PSC)具有双向发育的特点,本文旨在利用SSH和生物信息学方法筛选原头蚴包囊(CW)和成虫(AW)特异性的基因。将PSC-CW和PSC-AW双相发育差减cDNA文库的差减PCR产物克隆入pGEM-T载体并测序,利用CAP3sequence assembly在线软件、Blast2GO软件与GenBank数据库对测序结果进行分析,筛选原头蚴成囊和成虫特异性的基因,并探讨这些基因的功能。结果显示:对PSC-CW和PSC-AW文库进行扩增,分别得到280和200个阳性克隆,菌落PCR鉴定结果表明,这些克隆均插入200~1 000bp片段。测序结果显示从PSC-CW和PSC-AW SSH文库中分别得到16和10个特异性基因。其中PSC-CW SSH文库中得到4个出现频率较高的基因,其余12个基因仅出现1次,其中5个为未知基因,已知基因分别编码细胞色素C氧化酶Ⅰ、热休克蛋白70和铁蛋白等功能蛋白质。PSC-AW SSH文库中得到10个基因,其中2个出现频率较高基因,8个基因仅出现1次,4个为未知基因,6个已知基因分别编码基质蛋白1、延伸因子1α和脂肪酸结合蛋白等功能蛋白质。本研究筛选获得原头蚴成囊和成虫发育时差异表达的基因,对这些基因的功能进行分析表明,PSC-CW SSH文库中多是与营养和能量转运功能的相关基因,而PSC-AW SSH文库中多为发育与分化相关的基因,这些基因的差异表达可能与原头蚴处于不同的生长环境和发育方向有关,同时也为棘球蚴病免疫诊断、药物筛选和疫苗研制提供候选基因。

包虫病诊断技术与预防疫苗的研究进展

目的综述目前包虫病相关研究的进展。方法从包虫病流行现状、细粒棘球绦虫的结构及生活史、包虫病的检测和诊断技术以及包虫病预防疫苗等方面的研究进展进行综述。结果目前,分子生物学和免疫学技术的发展为包虫病诊断新技术的建立提供了机遇,也促使包虫病患者早期诊断技术有了重大突破;包虫病中间宿主预防性疫苗在动物实验中已经能够产生很好的保护效果,但仍需进行大规模的现场试验以推进疫苗早日进入临床。结论彻底消除包虫病的传播还很困难,故在包虫病控制中还应该采取措施抑制终末宿主犬体内细粒棘球绦虫(E.g)成虫虫卵的产生,使用先进的诊断技术,提早发现病原,从而减少地方性包虫病的流行。