肾型鸡传染性支气管炎病毒新疆株的生物学特性研究

通过致病力试验和免疫原性检测对肾型鸡传染性支气管炎病毒新疆株(IBVXJ-2株)进行生物学特性的研究。致病力检测结果证实,IBVXJ-2株可以致SPF鸡胚卷缩、僵化,EID50达10-8.3/0.1 mL;鸡胚肾细胞在接毒后96 h出现皱缩、脱落等明显的细胞病变;对20日龄非免疫鸡攻毒后第2天,试验鸡出现甩鼻、伸颈张口呼吸等症状。将IBVXJ-2株抗原经乳化后接种1月龄非免疫鸡,在接种后22 d和44 d用ELISA和HI检测到了IBV特异性抗体。

流产布鲁氏菌疫苗A19-ΔVirB12突变株生物学特性研究

目的为了开发布鲁氏菌病新型标记疫苗,对流产布鲁氏菌A19-ΔVirB12突变株生物学特性研究。方法以亲本A19菌株为参照,对A19-ΔVirB12突变株的菌落形态、生物学特性、毒力、遗传稳定性、免疫原性进行实验比较。结果 A19-ΔVirB12突变株形态及生化特性同亲本株A19基本一致,其毒力弱于A19。A19-ΔVirB12突变株遗传稳定性良好且与A19具有相似的免疫原性。结论流产布鲁氏菌A19-ΔVirB12株毒力较低、遗传性状稳定、并具有良好的免疫保护效力,可作为新型动物布鲁氏菌病标记疫苗研制的候选株。

棉粕源生物发酵饲料对黄羽肉鸡表观消化率、血液生化指标、免疫指标的影响

试验选用96只45日龄健康黄羽肉鸡,按照每组体重相近、公母各半的原则分为4组,每组4个重复,每个重复6只鸡,研究棉粕源生物发酵饲料对黄羽肉鸡表观消化率、血液生化指标、免疫指标的影响。Ⅰ组为空白对照组,在基础日粮中加入6%基础发酵底物;试验Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组分别添加6%的热带假丝酵母ZD-3发酵饲料、酿酒酵母发酵饲料、热带假丝酵母和酿酒酵母复合发酵饲料。结果表明:发酵饲料的添加可显著提高干物质、粗蛋白的表观消化率(P<0.05),对粗脂肪的表观消化率影响不大,Ⅱ组钙消化率显著高于Ⅰ组(P<0.05),Ⅲ、Ⅳ组粗灰分、磷的表观消化率显著低于Ⅰ组(P<0.05);与空白对照组相比,试验组血浆白蛋白、钙含量显著增加(P<0.05),总蛋白含量Ⅱ组增加,Ⅲ、Ⅳ组降低,甘油三酯、磷含量降低,血浆总胆固醇含量除Ⅳ组提高外,其余各试验组有所降低;试验组血浆IgG、IgA、IgM含量均有所提高。

新疆北部地区奶牛子宫内膜炎主要病原菌的分离鉴定及其血细胞成分分析

对临床确诊为奶牛子宫内膜炎的75头荷斯坦奶牛进行子宫炎性分泌物采样,用常规方法进行细菌分离培养及鉴定,并对19头患子宫内膜炎奶牛和8头健康奶牛进行血细胞成分分析。结果共分离鉴定出细菌189株,其中金黄色葡萄球菌56株(29.62%),大肠埃希氏菌52株(27.51%),铜绿假单胞菌25株(13.23%),蜡样芽孢杆菌22株(11.64%),无乳链球菌17株(8.99%),停乳链球菌10株(5.30%),沙门氏菌3株(1.59%),中间葡萄球菌2株(1.06%),表皮葡萄球菌、普通变形杆菌各1株(0.53%)。血细胞成分分析结果表明,子宫内膜炎奶牛组与健康奶牛组相比,淋巴细胞(LYM)、粒细胞(GRAN)、平均血红蛋白含量(MCH)、血小板分布宽度(PDW)、血小板压积(PCT)等差异极显著(P<0.01),其余指标差异不显著(P>0.05)。

PRRSV新疆株N基因的克隆及原核表达

根据GenBank上已发表的毒株,设计了一对引物扩增PRRSV新疆株N基因片段;将N基因克隆到pMD18-T,在亚克隆到pGEX-6p-1原核表达载体上,构建重组质粒pGEX-6p-N;在37℃条件下,经终浓度为1 mmol/L的IPTG诱导表达4 h后,获得了可溶性融合蛋白;经SDS-PAGE电泳检测和Western blotting分析,该融合蛋白分子量约为39 kDa,与预期结果一致,并能与PRRSV阳性血清发生特异性反应,且非特异性背景很低。

奶牛同期排卵定时输精技术的研究进展

同期排卵定时输精技术目前已经在奶牛生产中应用,本文分析了该技术的原理及国内外的研究进展,根据我国奶牛业的养殖现状,提出了今后的研究方向。

新疆不同品种供体牛超排效果比较分析

对安格斯牛、海福特牛和荷斯坦牛共计1088头的超数排卵原始数据进行了统计分析,结果表明：FSH来源对超排效果影响不显著,FSH剂量、超排季节、个体差异与公牛精液品质对牛超数排卵有一定影响;安格斯牛以10-10.25mg的超排效果最好,荷斯坦牛以9.5mg的超排效果最好;在季节对超排的影响方面,安格斯牛在秋季的效果最好,荷斯坦牛、海福特牛在春季、夏季、秋季和冬季的超排效果差异不显著（P〉0.05）,但荷斯坦牛在冬季的效果较好,可用胚数为7.13±7.94;海福特牛在秋季的效果较好,可用胚数为4.57±4.42。

转基因动物技术的研究进展

本文通过转基因动物技术的研究状况、目的、方法、用途及存在问题对该技术进行综述。

猪圆环病毒Ⅱ型新疆分离株全基因组及ORF2基因的克隆与测序

根据GenBank中已发表的猪Ⅱ型圆环病毒(PCV2)全基因组序列,设计合成了2对特异性引物。将PCV2新疆分离株(PCV2-XJ)用PK15细胞培养数代,从细胞培养物中提取病毒总DNA,并取其作为模板,PCR扩增出病毒全基因和结构基因(ORF2)。将PCR回收产物克隆到pMD18-T载体,成功构建了重组质粒pMD18-TPCV2和pMD18-T-ORF2,并对筛选出的阳性质粒进行测序。应用序列分析软件对测序结果分析可知,克隆得到的PCV2-XJ基因组全长1 768 bp。通过序列分析结果显示,PCV2-XJ与国内外PCV1、PCV2参考毒株的核苷酸同源性分别为99.5%～99.7%和68.7%;与HuB08(FJ041151)参考株核苷酸同源性最高(99.7%)。PCV2-XJ株ORF2基因与参考株核苷酸和氨基酸同源性分别高达99.3%和98.8%。

红茂草生物碱对黏虫卵的杀灭作用

为评价野生药用植物红茂草的生物碱提取物对黏虫卵的杀灭效果,取适量黏虫卵分别与含50、100、200、400、800 mg/L红茂草生物碱提取物的丙酮溶液短暂接触,观察并比较经不同浓度红茂草生物碱处理的黏虫卵孵化率及初孵幼虫存活率,并设对照处理组(CK)。结果显示,除50 mg/L处理组外,其余各处理组的卵孵化率均显著低于对照组(P<0.05);在设定的处理浓度范围内,所有处理组的初孵幼虫存活率均显著低于对照组(P<0.05),表明红茂草生物碱对黏虫卵具有显著的杀灭作用。

LPXTG基序蛋白lmo0160基因缺失对单增李斯特菌生物膜形成的影响

为了研究致绵羊脑炎单增李斯特菌新疆分离株LM90SB2的LPXTG基序蛋白lmo0160基因对生物膜形成能力的影响,本研究利用基因重叠延伸PCR(SOE-PCR)及同源重组技术,使用穿梭质粒p KSV7载体,构建lmo0160基因缺失株LM90SB2-lmo0160。通过测定OD_(600)绘制生长曲线,利用结晶紫染色测定OD_(570)定量检测生物膜形成能力,在显微镜下观察生物膜的形态。结果显示:与LM90SB2菌株相比,LM90SB2-Δlmo0160在37℃培养条件下生长速度显著降低(P<0.01)。LM90SB2和LM90SB2-Δlmo0160在不同时间点均形成网格结构的生物膜,但生物膜的致密度和OD_(570)有不同。显微镜下LM90SB2-Δlmo0160形成松散,稀薄的生物膜,LM90SB2生物膜致密,浓厚。不同时间点LM90SB2-Δlmo0160 OD_(570)值均小于LM90SB2,8和12 h差异不显著(P>0.05);24 h差异显著,(P24 h<0.05);48 h差异极显著(P48 h<0.001)。本研究表明,Δlmo0160基因对LM90SB2生长增殖和生物膜形成具有一定的影响作用,这为进一步阐明LM毒力因子的致病机制提供理论依据。

脂肪细胞膜免疫技术的研究进展

本文综述了脂肪细胞膜免疫的种类及其降低动物胴体脂肪的作用机理和效果,阐述了目前存在的问题,并展望了脂肪细胞膜免疫技术的应用前景。

新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖对口蹄疫疫苗免疫小鼠的佐剂效应

探讨新疆野生荒漠肉苁蓉粗多糖(wild Cistanche deserticola Y.C.Ma crude polysaccharides,WCDCP)对口蹄疫(foot-and-mouth disease,FMD)疫苗免疫小鼠的佐剂效应及安全性。用不同剂量的WCDCP分别配伍FMDV灭活抗原及FMD疫苗,皮下注射ICR小鼠,免疫两次。ELISA法检测血清中IgG、IgG1及IgG2a抗体水平;流式细胞术检测淋巴结中CD4+CD44+和CD8+CD44+T细胞表达情况。结果表明,中、高2个剂量的WCDCP均能显著增强FMDV灭活抗原特异性IgG的抗体水平(P<0.01);中剂量的WCDCP显著增强了FMD疫苗特异性IgG及其IgG1、IgG2a抗体水平(P<0.05),而且具有长效性;WCDCP中剂量可以显著提高淋巴结中CD4+CD44+和CD8+CD44+T细胞的表达水平(P<0.05);WCDCP对小鼠的生长没有影响。总之,WCDCP可以长期增强FMD疫苗特异性抗体水平,显著增强T细胞免疫反应,对小鼠的生长无副作用。因此,WCDCP可以作为FMD疫苗的一种安全候选佐剂。

5株禽新城疫病毒新疆分离株F基因序列测定与遗传进化分析

从新疆乌鲁木齐市郊区养禽场发病禽群中分离到4株鸡源新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)和1株鸽源NDV。经血凝HA试验鉴定,NDV分离株均具有血凝性,5个毒株的血凝特性均可被NDV阳性血清所抑制,而不能被禽流感病毒(H5亚型与H9亚型)阳性血清抑制。本试验通过RT-PCR扩增了5株NDV全长F基因并进行了序列测定。序列分析表明,5株NDV的核苷酸序列分别为1662、1589、1676、1589和1662bp,均含有1个开放阅读框,分別编码553、528、553、520和553个氨基酸;根据基因裂解位点的氨基酸序列分析表明,鸡源XJ/10/08株属于强毒株,XJ/3/07株、XJ/7/07株、XJ/9/08株和XJ/11/08株属于弱毒株;同源性分析表明,5个NDV新疆分离株与LaSota疫苗株的核苷酸同源性在83.7%～99.8%之间,与TaiWan95株核苷酸同源性在84.7%～93.3%之间;遗传发育进化树分析表明,分离到的4个弱毒株与La-Sota、Clone30、B1、BEA-45在同一亚群,属基因Ⅱ型,强毒分离株与TaiWan95、广东株(GD-1-98)、江苏株(JS-5-1)在同一进化分支内,属基因Ⅶ型。

BHK-21细胞库的建立及其生物学特性鉴定

从美国典型培养物保藏中心(ATCC)和中国兽医药品监察所(中监所)引进2株BHK-21细胞系,传代扩增培养后液氮冻存,建立相应的细胞库;复苏细胞后对活力、形态、生长曲线、微生物污染、染色体核型及荧光蛋白质粒转染表达等特性进行研究。结果显示,2个来源的BHK-21细胞系均呈成纤维型,生长状态良好;生长曲线呈S型;细菌、真菌、支原体及外源病毒检查均为阴性;染色体为21对,二倍体均占主体;外源质粒在该2株细胞系中能进行复制和表达。这可为开展BHK-21细胞系及口蹄疫疫苗的研究与开发提供基础理论依据和细胞资源。

猪繁殖与呼吸综合征病毒新疆株的分离鉴定

从新疆阿克苏地区某规模化猪场发病仔猪体内分离到1株病毒,该病毒能在Marc-145细胞上增殖并产生特征性的细胞病变,而在Vero与BHK-21细胞上不出现细胞病变。病毒能被猪繁殖与呼吸综合征病毒阳性血清特异性地中和,用RT-PCR反应能扩增出369 bp的特异性片段。将病毒接种30日龄血清阴性仔猪,可检测到血清中出现病毒特异性抗体,将分离株命名为XJPRRSV1/03株。

应用B超技术和激素测定诊断奶牛卵巢囊肿和排卵延迟的研究

本文结合奶牛生产实践,通过运用B超和激素诊断对常见的两种卵巢疾病(卵巢囊肿和排卵延迟)进行综合诊断,总结出卵巢囊肿和排卵延迟常见的B超影像图及激素数据规律,为今后两种疾病的相关研究提供理论参考依据。

影响新疆部分猪场母猪繁殖性能因素的调查与分析

通过现场调查和查阅生产资料对新疆克拉玛依绿成农业开发有限责任公司种猪场、天康畜牧生物技术股份有限责任公司米泉种猪场影响母猪繁殖性能的因素进行了调查及分析。主要进行了胎次对产仔情况的调查:胎次与产仔总数、健仔数、弱胎、畸形、死胎进行了差异显著性比较;胎次与产仔间隔差异显著性比较;月份与产仔数的差异显著性比较;结果表明,胎次、产仔间隔、月份对母猪繁殖性能有影响,其中胎次影响较大,并且随着胎次的上升而改变。

应用B超技术和激素测定对奶牛卵泡囊肿和黄体囊肿的综合诊断研究

本文结合奶牛生产实践中的疾病案例,通过运用B超和激素测定对常见的两种卵巢疾病(卵泡囊肿和黄体囊肿)进行综合诊断和针对性治疗,总结出卵泡囊肿和黄体囊肿常见的B超影像图,为今后两种疾病的综合诊断尤其是B超成像规律提供理论参考依据。

裂解血球全血与健康动物血清在牛多杀性巴士杆菌病灭活疫苗生产中使用效果对比试验

兽用生物制品制造及检验规程中规定:牛多杀性巴氏杆菌病灭活疫苗在通气培养过程中,需添加0.1%裂解血球全血。本试验通过在合成培养基中添加裂解血球全血与健康动物血清培养对比,发现在牛多杀性巴士杆菌病灭活疫苗生产中添加一定量健康动物血清,其生长菌数、效力检验、安全检验均与添加0.1%裂解血球全血生产检验指标相一致,且有降低污染率、降低生产成本的效果,值得生产中推广使用。