梨火疫病菌拮抗菌株组合的亲和力及其防病效果测定

为获得对梨火疫病菌(Erwinia amylovora)抑菌活性高、防病效果好的拮抗菌组合,以实验室前期从香梨酵素液中分离初筛出的E.amylovora拮抗细菌菌株为材料,采用对峙培养法检测菌株之间的亲和性,打孔-抑菌圈法测定复配组合菌株的抑菌活性。对筛选出相容性良好,对E.amylovora抑菌作用强的拮抗细菌组合通过喷施香梨离体花序和盆栽杜梨苗评价其对梨火疫病的防病效果。结果显示:筛选出相容性良好的3个拮抗细菌组合FX1-FJ20、FX74-FN12和FX70-FX43,其复配比例为1∶1的组合菌体发酵液和组合除菌发酵液的抑菌率均达到83%以上,明显高于单一菌株。3个拮抗细菌组合菌体发酵液和组合除菌发酵液对香梨花腐的3~7 d的平均预防型防效分别为56.26%~73.16%和72.02~82.66%;对杜梨苗的7~15 d的预防型防效分别为67.38%~77.73%和71.78%~80.11%,治疗型防效分别为64.53%~75.01%和69.09%~79.03%。组合菌的防效均较单个菌株提高,组合菌除菌发酵液的防效优于组合菌菌体发酵液,预防型防效优于治疗型防效。综合防效试验结果可见,拮抗菌组合FX74-FN12的防效最佳,其菌体发酵液和除菌发酵液对香梨花腐3~7 d的预防型防效分别为73.16%、82.66%,比单菌株的平均防效分别增加12.90%和22.40%;对杜梨苗的7~15 d的平均预防型和治疗型防效分别达到75.00%和79.00%以上,比单菌株的平均防效分别增加15.12%和11.02%,对梨火疫病具有较好的生防潜力。

农用植物酵素液中梨树腐烂病菌拮抗细菌的筛选和防病效果

从农用植物酵素液中筛选对梨黑腐皮壳菌(Valsa pyri)具有抑菌活性的细菌菌株,明确其对梨树腐烂病的防治潜力,以梨黑腐皮壳菌为靶标菌,通过平板对峙培养和牛津杯法从分离自农用植物酵素液的细菌中筛选拮抗菌株,并分析拮抗菌株对病原菌孢子萌发和菌丝生长的影响及防病效果。结果表明,从农用植物酵素液中分离的68株细菌中初筛出15株对梨黑腐皮壳菌具有抑菌作用的细菌,占分离菌株数的22.1%,抑菌率为41.25%~74.14%。经过复筛,4个菌株(gjfn2、gjfn4、PFN41、PGY-FX67)的发酵液和除菌发酵滤液抑菌率分别大于70%和60%,显著高于其他菌株。采用形态特征、生理生化特性及16S rRNA和gyrA基因序列分析,将gjfn2、gjfn4和PGY-FX67鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis),PFN41鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)。4个拮抗菌株发酵液和除菌发酵滤液对梨黑腐皮壳菌分生孢子的萌发有明显的抑制作用,gjfn4、PFN41菌株发酵液及除菌发酵滤液对梨黑腐皮壳菌分生孢子的抑制率36 h均可达到100%,并使梨黑腐皮壳菌菌丝形态畸形、弯曲、末端膨大。离体枝条法防效测定结果表明,4个菌株的发酵液防效均达到79%以上,除菌发酵滤液防效均达到73%以上,其中gjfn4菌株的防效最佳,其发酵液、除菌发酵滤液及除菌发酵滤液50倍稀释液对梨树腐烂病防效分别均达到84.79%、81.57%和67.27%。由此表明,从农用植物酵素液中筛选获得的拮抗细菌菌株具有防治梨树腐烂病的良好潜力。