新疆家蚕抗菌肽诱导人胃癌细胞AGS凋亡的研究

目的探讨新疆家蚕抗菌肽（cecropinXJ）是否通过诱导人胃癌细胞AGS凋亡产生抗肿瘤的作用。方法选择0．01～1000mg·L^-1浓度范围内的cecropinXJ与人胃癌细胞AGS和人正常胃上皮细胞GES-1共培养24h，采用MTT法检测cecropinXJ对AGS细胞和GES-1细胞增殖的影响；透射电镜观察细胞超微结构变化；Hoechst染色观察细胞凋亡情况；流式细胞术检测细胞内活性氧和线粒体膜电位的变化；实时荧光定量PCR（qRT-PCR）和Westernblot检测Bax、Bcl-2、caspase-3以及细胞色素CmRNA和蛋白水平的表达变化。结果CecropinXJ在体外能明显抑制胃癌AGS细胞的增殖（P〈0．05），并具有浓度依赖性，IC90值为61．19mg·L^-1，但对GES-1细胞无明显的抑制增殖作用。经cecropinXJ处理24h后，AGS细胞核固缩，呈现典型细胞凋亡特征，同时细胞内活性氧增加，线粒体膜电位下降。qRT-PCR和Westernblot结果表明，cecropinXJ能够引起Bcl-2表达下调，Bax表达上调，促进细胞色素C的释放并活化caspase-3。CecropinXJ促进caspase-3活性呈剂量依赖，经caspase-3和caspase-9特异性抑制剂处理后可降低cecropinXJ介导的AGS细胞死亡率。结论CecropinXJ可通过下调Bcl-2表达，上调Bax表达和活化caspase-3诱导AGS细胞凋亡，是其抗肿瘤机制之一。

新牧一号杂花苜蓿MvNHX1基因的表达分析和提高烟草耐盐性的研究

提取新牧一号杂花苜蓿的总RNA,用特异引物RT-PCR扩增后的cDNA片段连接入pMD19-T载体,转化大肠杆菌DH5α,对阳性克隆进行序列分析,新牧一号苜蓿NHX1(MvNHX1)全长1 626 bp,Genbank登录号为:EU375310。半定量RT-PCR和实时荧光定量PCR分析表明,在盐胁迫下MvNHX1基因的表达均上调。构建重组植物表达载体pBI121-MvNHX1后,通过农杆菌介导的叶盘法转化烟草,转基因烟草在盐胁迫下发芽率和生物量均高于非转基因烟草,表明MvNHX1能够提高转基因烟草的耐盐性。

乌拉尔甘草水提物通过Toll样受体4信号通路激活RAW264.7 细胞

目的 探索乌拉尔甘草水提物（Glycyrrhiza uralensis Fisch.water extract,GUWE）激活RAW264.7细胞的作用及其可能的机制.方法 用不同多糖浓度GUWE（10、50、100、500 μg/ml）处理RAW264.7细胞,MTT法检测GUWE对细胞活性的影响.流式细胞术检测RAW264.7细胞吞噬活性和表面分子的表达.ELISA法检测细胞因子的水平.Western blot检测Toll样受体4（TLR4）信号通路关键分子的活化水平.结果 500 μg/ml GUWE显著降低了RAW264.7细胞的活性,而50 μg/ml、100 μg/ml GUWE增加了细胞的活性.GUWE显著增强了RAW264.7细胞抗原吞噬能力和细胞因子、表面共刺激分子的表达,并呈剂量依赖性.进一步研究表明,GUWE通过TLR4受体激活RAW264.7细胞,提高了TLR4下游MAPK家族中p38、JNK、ERK的磷酸化水平以及NF-kB p65的磷酸化水平.结论 GUWE通过TLR4信号通路激活了RAW264.7细胞.