维生素D受体基因多态性与新疆维吾尔族人群结核病易感性的相关性研究

目的研究维生素D受体(VDR)基因多态性与新疆维吾尔族人群结核病易感性的相关性。方法采用病例对照研究,选取224例新疆维吾尔族结核患者和225例有分枝杆菌感染史的同民族健康者分别作为病例组和对照组。用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)分析方法分别检测维生素D受体基因的多态性,内切酶分别为FokI和TaqI,并进行基因分型。统计学分析结果采用χ2检验,P值为0.05。结果FokI分析,分为FF、Ff、ff三种基因型,其在病例组和对照组中分别为36%、57%、7%和40%、54%、6%。FF基因型的分布在病例组与对照组中的差异性无统计学意义(χ2=0.872,P>0.05)。TaqI分析,分为TT、Tt、tt三种基因型,其在病例组和对照组中分别为68.8%、29.4%、1.8%和75.6%、22.2%、2.2%。TT基因型在病例组与对照组中的差异性也无统计学意义(χ2=2.588,P>0.05)。结论维生素D受体基因中FokI与TaqI多态性与新疆维吾尔族人群结核病易感性无明显相关性。

新疆哈萨克族原发性高血压患者QT离散度的分析

目的:为了探讨新疆哈萨克族高血压患者QT离散度(QTd)的变化和临床意义。方法:260例哈萨克族分为3组,Ⅰ组为正常对照组,100例。Ⅱ组为单纯高血压患者68例,Ⅲ组为高血压性心脏病组92例,对3组从心电图上测的QT间期、QTd及校正的QT(QTc)、校正的QTd(QTcd)进行分析。结果:单纯高血压组和高血压性心脏病组患者QT、QTd、QTc、QTcd值均高于正常对照组,而且高血压性心脏病QT、QTd、QTc、QTcd值均大于单纯性高血压病组。高血压心脏病组与单纯性高血压组及正常对照组比较,以上各项参数差异均有显著性意义(P<0.001)。结论:高血压患者QTd、QTcd值增大,且QTd、QTcd可作为评价高血压患者预后的参考指标。

新疆哈萨克族原发性高血压基因多态性研究进展

原发性高血压是遗传和环境因素共同作用的多基因复杂性疾病,新疆哈萨克族人群患病率高于同一居住区及不同居住区的其他民族,目前应用单核苷酸多态性(single nueleotide polymorphisms,SNPs)作为新一代遗传标志研究原发性高血压,对于阐明新疆地区哈萨克族人群的遗传易感机制具有重要意义。

硬膜外血液补丁未能预防剖宫产腰-硬联合麻醉后头痛

目的探讨硬膜外血液补丁(EBP)预防剖宫产产妇腰-硬联合麻醉(CSEA)头痛的有效性及安全性。方法 300例剖宫产产妇随机均分为研究组(E组)和对照组(C组),所有产妇采用25G/18G腰-硬联合穿刺针行CSEA。手术结束后E组自硬膜外导管注入自体静脉血7.5ml后拔出,C组患者直接拔除硬膜外导管。记录术后1～5d硬脊膜穿刺后头痛(PDPH)的发生率及其他相关并发症。结果 E组PDPH的发生为4例(2.7%),略低于C组的11例(7.3%),但差异无统计学意义。两组并发症发生率相似,均未发生硬膜外脓肿、蛛网膜炎等并发症。结论 EBP不能有效预防剖宫产CSEA后头痛,无预防性应用必要。

As_2O_3联合重组canstatin蛋白对体外肿瘤血管内皮细胞的影响

目的探讨As2O3联合canstatin蛋白对肿瘤血管内皮细胞(Td-EC)增殖、迁移、血管形成的影响及其凋亡的机制。方法用肝癌HepG2细胞上清诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)成为Td-EC。As2O3联合canstatin干预Td-EC,通过细胞迁移,流式细胞术,观察血管形成。结果 As2O3、canstatin及联合影响Td-EC迁移细胞数分别为32.60±1.51、26.60±1.14、21.00±1.87,显著低于对照组50.60±2.30(P<0.01),并促进凋亡、抑制管腔形成,以联合应用更显著。结论 As2O3联合canstatin在体外可特异地抑制Td-EC增殖、迁移、血管形成及其凋亡。

缝隙连接与高血压的研究进展

缝隙连接（gap junction,GJ）,又称间隙连接、通讯连接,是由连接相邻两个细胞之间的连接通道排列而成的一种特殊膜结构。细胞间的通讯方式可分为间接与直接方式。相邻细胞间通过缝隙连接所介导的细胞间的通讯为直接通讯,

QT离散度的临床研究进展

QT离散度（QTd）是指标准12导联心电图中最大QT间期与最小QT间期之差。1990年Day和Campbell^[1]等首先提出QT离散度的概念。认为QTd反映了心室复极的不一致性和心电的不稳定性。随后的大量实验及临床研究报告了QTd的生理学意义及临床应用价值，并将其作为反映心室复极的不均一性的一种无创伤性指标，广泛应用于心脏的各种病理状态及抗心律失常药物的评价，受到越来越多的关注和重视。

雌激素抑制淋巴细胞IL-1β和IL-6释放并下调Cx40及Cx43水平

目的 探讨雌激素(E)对淋巴细胞上连接蛋白40(Cx40)和Cx43表达及白细胞介素1β(IL-1β)和IL-6释放的影响。方法 选取Wistar京都(WKY)大鼠6只,采集腹主动脉外周血,分离淋巴细胞进行培养,分为空白组(Ctrl)、刀豆蛋白A(ConA)组和刀豆蛋白A+雌激素(ConA+E)组。应用ELISA检测培养基上清液中IL-1β、IL-6的水平;应用免疫荧光技术检测淋巴细胞上Cx40和Cx43的表达和分布情况;应用流式细胞术检测淋巴细胞上Cx40和Cx43表达水平变化;应用Western blot检测淋巴细胞上Cx40和Cx43的蛋白表达。结果 ConA组IL-1β和IL-6表达较Ctrl组升高(P<0.01),ConA+E组较ConA组降低(P<0.01,P<0.05);免疫荧光结果显示Cx40主要表达在细胞质及细胞核,而Cx43主要表达在细胞膜,ConA组淋巴细胞上Cx40和Cx43蛋白表达较Ctrl组升高(P<0.01),ConA+E组较ConA组降低(P<0.01);ConA组淋巴细胞上Cx40和Cx43表达水平较Ctrl组升高(P<0.01,P<0.05),ConA+E组较ConA组降低(P<0.05);ConA组淋巴细胞上Cx40和Cx43蛋白表达较Ctrl组明显升高(P<0.01),ConA+E组较ConA组明显降低(P<0.01)。结论 E抑制炎症因子IL-1β和IL-6的释放,同时下调淋巴细胞上Cx40和Cx43的表达,提示Cx40和Cx43可能参与E的抑炎作用。

Cx43和Cx45在自发性高血压和正常血压大鼠主动脉的表达差异

目的探讨连接蛋白(Cx)在自发性高血压大鼠(SHR)和正常血压大鼠主动脉表达的异同。方法应用定量RT-PCR、Werstern blot和透射电镜技术比较SHR和正常血压大鼠主动脉上Cx43和Cx45的mRNA和蛋白表达水平以及平滑肌细胞间缝隙连接的形态学改变。结果 1RT-PCR结果显示SHR主动脉Cx45 mRNA的表达降低(P<0.05),Cx43 mRNA的表达降低更为显著(P<0.01);2RT-PCR结果显示SHR主动脉Cx43和Cx45蛋白的表达显著降低(P<0.01),Cx43磷酸化水平没有变化;3电镜显示主动脉平滑肌细胞间缝隙连接的数量显著减少。结论高血压可能通过降低主动脉平滑肌细胞上Cx43和Cx45的表达造成细胞间缝隙连接的通讯功能降低,导致血管功能紊乱,进一步加重高血压造成的伤害。

canstatin抗肿瘤作用研究现状

肿瘤的生长及转移均依赖于血管新生。抗血管生成治疗已成为肿瘤的治疗热点,目前以内源性血管生成抑制因子研究为主。血管能抑素（canstatin）是新近发现的一种来源于IV型胶原蛋白的内源性抗血管新生抑制因子,具有较强的抗血管新生作用而受到重视,现综述其抗肿瘤研究现状。

新疆哈萨克族转化生长因子β1基因多态性及其血浆水平与原发性高血压的关系

目的 研究新疆哈萨克族原发性高血压（essential hypertension,EH）患者转化生长因子β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）＋869T/C、＋915G/C基因多态性及血浆水平与EH的关系.方法 采用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性和基因测序对新疆哈萨克族365名EH患者及435名正常对照组进行基因分型,用双抗体夹心法测量TGF-β1血浆浓度.结果 ＋915G/C位点基因型GG、GC及等位基因G、C频率依次为97.9%、2.1%、98.77%、1.23%,EH组与对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;＋869T/C位点基因型TT、TC、CC及等位基因T、C在对照组中频率依次为25.97%、46.67%、27.36%、49.3%、50.7%,CC基因型及C等位基因频率在EH组中高于对照组（41.60%vs.27.36%、62.2%vs.50.7%）,差异有统计学意义（P＜0.05）,C等位基因携带者EH患病风险高于T等位基因携带者（OR=1.6O,P=0.00）.＋869T/C与＋915G/C存在连锁不平衡,其形成的单倍型C-G在EH组中频率高于对照组（61.6%vs.49.8%,P＜0.05）.＋869T/C及＋915G/C基因型、等位基因在EH组和对照组中TGF-β1血浆水平差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 新疆哈萨克族TGFβ1＋915G/C基因变异频率很低,且不存在纯合变异,＋869位点C等位基因可能是哈萨克族EH的遗传易感基因,＋869T/C与＋915G/C多态性位点存在连锁不平衡,两者构成的单倍型C-G是EH危险性因素.

NRAMP1基因3’UTR多态性与新疆维吾尔族人群结核病易感性的相关性研究

目的研究人类自然抵抗相关巨噬细胞蛋白1（NRAMP1）基因3’UTR多态性与新疆维吾尔族人群结核病易感性的相关性。方法选取新疆维吾尔族人群活动性结核病患者224例，正常对照225例，用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性（PCR-RFLP）的方法对NRAMP1基因3’UTR进行基因分型，根据基因型对样本分组，经统计学处理，研究NRAMP1基因3’UTR多态性与结核病易感性的相关性。结果在新疆维吾尔族人群活动性结核病患者中3’UTR TGTG／TGTG基因型159例（71．1％），TGTG／TGTG缺失基因型56例（24．9％），TGTG缺失／TGTG缺失基因型9例（4．0％）；正常对照TGTG／TGTG基因型则为185例（82．2％），TGTG／TGTG缺失基因型36例（16．0％），TGTG缺失／TGTG缺失基因型4例（1．8％）。正常对照组TGTG／TGTG基因型频率明显高于结核患者（χ^2=7．94，P〈0．01）。研究发现TGTG的等位基因频率为0．87，TGTG缺失的等位基因频率为0．13。结论在新疆维吾尔族人群中NRAMP1基因3’UTR多态性与结核病易感性有明显相关性。

18β-甘草次酸对KCl和苯肾上腺素诱导的大鼠离体肾脏叶间动脉收缩的抑制作用

本文旨在观察18β-甘草次酸(18β-glycyrrhetintic acid,18β-GA)对KCl和苯肾上腺素(phenylephrine,PE)诱导的离体大鼠肾脏叶间动脉(renal interlobar artery,RIA)收缩的影响。急性分离大鼠RIA,应用压力肌动图技术,观察18β-GA预处理后大鼠RIA对内皮非依赖血管收缩剂KCl和PE的反应情况。用微动脉段标本的全细胞膜片钳技术,观察100μmol/L 18β-GA对血管段上平滑肌细胞的膜电容(Cinput)、膜电导(Ginput)和膜电阻(Rinput)的影响。结果显示,KCl(30～100 mmol/L)和PE(0.1～30μmol/L)均可以引起大鼠RIA浓度依赖的收缩;100μmol/L的18β-GA预处理后,KCl和PE对大鼠RIA的缩血管作用明显降低(P<0.01)。给予100μmol/L 18β-GA后,RIA血管段上平滑肌细胞的Rinput、Ginput和Cinput与单个平滑肌细胞数值十分接近。以上结果提示,18β-GA可抑制KCl和PE对大鼠RIA的收缩作用,其机制可能涉及18β-GA对缝隙连接的抑制。

小干扰RNA沉默细胞外钙敏感受体抑制人脐静脉内皮细胞钙内流和NO生成

为了探讨细胞外钙敏感受体(extracellular Ca^(2+)-sensing receptor, CaR)在人脐静脉内皮细胞(human umbilical veinendothelial cells, HUVEC)介导钙内流和NO生成中的作用,本实验针对GenBank中人CaR的cDNA序列设计合成小干扰RNA(small interference RNA, siRNA),并将其转染入HUVEC中,采用激光共聚焦显微镜观察细胞转染效果,Western blot检测CaR蛋白表达及转染后的干扰效率,Fura-2/AM负载检测细胞内Ca^(2+)浓度(intracellular Ca^(2+)concentration, [Ca^(2+)]i)变化,NO荧光探针DAF-FM DA负载检测细胞内NO的生成及内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase, eNOS)活性。结果显示,实验成功将CaR siRNA转入HUVEC,Western blot 检测结果显示转染48 h后,CaR蛋白表达降低(P < 0.05);与未转染对照组和阴性对照组相比,在精胺 + Ca^(2+)刺激下,CaR siRNA转染组的[Ca^(2+)]i、eNOS活性和NO含量均显著降低(P < 0.05)。上述结果表明,CaR在精胺介导的HUVEC Ca^(2+)内流和NO生成中发挥重要作用。

术后认知功能障碍的评判方法与评判标准

背景术后认知功能障碍（postoperative cognitive dysfunction，POCD）作为麻醉手术后中枢神经系统的并发症越来越受到重视，由于没有POCD的统一研究方法、严密的定义和诊断标准，POCD的研究结果大相径庭。目的本文回顾了近年来国内外POCD研究中常用评判指标与评判标准，为统一POCD的诊断参数、正确识别POCD提供参考。内容神经心理学方法是目前POCD临床研究中最常使用的方法。但是，神经心理测验最终能否反映认知功能的真实变化还依赖于研究中所选用的神经心理测验的敏感性、重测信度、有无设立对照组、重测的间隔时间以及评判标准等等。趋向尽管国内外已有大量POCD研究报道，但对于最终的防治工作来说，统一POCD的诊断标准具有不可或缺的重要作用。

结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16．3基因打靶载体的构建与鉴定

结核分枝杆菌感染人体后主要寄生在宿主巨噬细胞内，结核分枝杆菌小分子热休克蛋白（smallheatshockproteins，sHSPs）Hsp16．3是其在宿主巨噬细胞内生存繁殖所必需的蛋白质，已有研究表明Hsp16．3与结核分枝杆菌的潜伏感染关系密切，本研究利用基因敲除技术构建了结核分枝杆菌国际标准强毒株H37Rv菌株Hsp16．3基因打靶载体，

TRPC1与Orai1的相互作用参与人脐静脉内皮细胞钙敏感受体介导的钙内流及一氧化氮生成

本研究旨在探讨Ca^(2+)感受蛋白经典瞬时感受器电位蛋白1(canonical transient receptor potential channel 1,TRPC1)与钙释放激活钙通道调节分子1(calcium release-activated calcium modulator 1,Orai1)的相互作用在人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)钙敏感受体(Ca-sensing receptor,Ca R)介导的Ca^(2+)内流和一氧化氮(NO)生成中的作用。取2~3代HUVECs,单独或联合用Ca R激动剂精胺[Spermine,激活钙库活化的钙通道(store-operated calcium channels,SOC)和受体活化的钙通道(receptor-operated calcium channels,ROC)]、ROC模拟剂12-O-十四烷酰佛波醇-13-乙酸酯(TPA)+Ca R负性变构调节剂Calhex231(阻断SOC,激活ROC)、PKC抑制剂Ro31-8220(激活SOC,阻断ROC)以及经典型PKCs和PKCμ抑制剂Go6967(激活SOC,阻断ROC)处理。用免疫荧光技术检测HUVECs中TRPC1和Orai1的蛋白表达、共定位;用免疫共沉淀法检测TRPC1和Orai1之间的相互作用模式;随后用TRPC1和Orai1干扰质粒联合转染HUVECs,采用荧光探针同时检测HUVECs中[Ca^(2+)]i和NO生成的变化。结果显示,HUVECs中TRPC1和Orai1蛋白表达共定位于胞膜。与Spermine+Ca^(2+)组相比,Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组HUVECs中定位于胞浆中的TRPC1、Orai1蛋白表达均显著降低,二者的结合也减少。免疫共沉淀结果显示,Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组TRPC1/Orai1和Orai1/TRPC1相对比值百分数均明显低于对照组以及Spermine+Ca^(2+)组(均P<0.05),表明Orai1和TRPC1相互作用均减弱。联合转染质粒敲低TRPC1和Orai1显著降低Spermine+Ca^(2+)组、Calhex231+TPA+Spermine+Ca^(2+)组、Ro31-8220+Spermine+Ca^(2+)组和Go6976+Spermine+Ca^(2+)组的HUVECs中[Ca^(2+)]i和NO生成。以上结果提示,TRPC1与Orai1以二元复合物的形式激活SOC和ROC,介导Ca^(2+)内流及NO生成。

结核杆菌PhoPR双组分系统与广泛流行的耐药结核杆菌耐药性的相关性研究

目的：通过比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平差异，探讨研究结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌耐药性是否具有相关性。方法以新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌临床分离株为研究对象，分别提取结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、单纯耐异烟肼的结核杆菌临床分离株（ INH-MTB）、单纯耐利福平的结核杆菌临床分离株（ RFP-MTB）、单纯耐链霉素的结核杆菌临床分离株（ SM-MTB）、单纯耐乙胺丁醇的结核杆菌临床分离株（ EB-MTB）、耐多药结核杆菌临床分离株（ MDR）总RNA，并进行纯度鉴定，运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR的方法，分别检测各组结核杆菌菌株的PhoP基因和PhoR基因的表达，比较分析不同耐药的结核杆菌临床分离株PhoP基因和PhoR基因的表达水平的差异。结果与结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株相比，PhoP基因在RFP-MTB中的表达上调1．48倍，在MDR中的表达上调2．74倍，差异有统计学意义（P＜0．05）；与MDR相比，PhoP基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和EB-MTB中的表达下调0．70、0．50、0．25和0．21倍，差异有统计学意义（P＜0．05）。与结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株相比，PhoR基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB和EB-MTB中的表达分别上调6．33、4．56、2．34和1．85倍，在MDR中的表达上调9．06倍，差异有统计学意义（ P＜0．05）；与 MDR相比，PhoR基因在INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB 和EB-MTB 中的表达下调0．36、0．54、0．35和0．19倍，差异有统计学意义（P＜0．05）。结论在结核分枝杆菌临床分离药物敏感菌株、INH-MTB、RFP-MTB、SM-MTB、EB-MTB和MDR中，结核杆菌PhoP和PhoR基因的表达有差异，结核杆菌PhoPR双组分系统与新疆地区广泛流行的耐药结核杆菌的耐药性具有相关性。

STIM和Orai在钙库操纵的钙内流途径及心脑血管疾病中的作用

钙库操纵的钙内流(SOCE)是调节钙离子(Ca2+)内流进入细胞最普遍的一种途径,它的通道称为钙库操纵的钙内流通道(SOC)。SOC存在于大多数非兴奋细胞和部分兴奋细胞上,近年来确定,STIM和Orai是组成SOC的两种主要蛋白质。本文就近年来对SOCE途径的机制,STIM和Orai不同亚型的结构、功能及在心脑血管疾病中的作用作一综述。