Bax对过氧化氢作用后的血管内皮细胞MDA生成及内皮素释放影响研究

目的研究Bcl-2相关X蛋白(Bax)对过氧化氢(H_2O_2)作用后的血管内皮细胞丙二醛(MDA)生成及内皮素(ET)释放的影响。方法血管内皮细胞分为对照组、si-NC组、si-Bax组、H_2O_2组、si-NC组+H_2O_2组、si-Bax+H_2O_2组共6组,对照组:不做任何处理,常规培养;si-NC组:血管内皮细胞中转染siRNA Control,常规培养;si-Bax组:血管内皮细胞中转染siRNA Bax,常规培养;H_2O_2组:血管内皮细胞不做转染,用100μmol/L的H_2O_2处理;si-NC+H_2O_2组:血管内皮细胞中转染siRNA Control后24 h,用100μmol/L的H_2O_2处理;si-Bax+H_2O_2组:血管内皮细胞中转染siRNA Bax后24 h,用100μmol/L的H_2O_2处理。qRT-PCR和Western blot测定细胞中Bax mRNA和蛋白的表达水平。在血管内皮细胞中转染Bax小干扰RNA和小干扰RNA阴性对照,用H_2O_2处理后,硫代巴比妥酸法检测各组培养液中MDA含量,Griess法测定各组培养液中一氧化氮(NO)含量,二硝基苯肼法测定各组培养液中乳酸脱氢酶(LDH)含量,放射免疫法测定各组培养液中ET含量,流式细胞术测定各组细胞凋亡情况。结果 H_2O_2组细胞中Bax mRNA和蛋白水平高于对照组。si-Bax组细胞中Bax mRNA和蛋白水平低于对照组。si-NC组细胞中Bax mRNA和蛋白水平与对照组相比差异无统计学意义(P>0.05)。H_2O_2组细胞培养液中MDA、LDH、ET水平均升高,NO水平下降,细胞凋亡率升高,与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05)。si-Bax+H_2O_2组细胞培养液上清中的MDA、LDH、ET水平有所降低,NO水平升高,细胞凋亡率有所降低,与H_2O_2组相比,差异具有统计学意义(P<0.05)。si-NC+H_2O_2组细胞清中的MDA、LDH、ET、NO水平及细胞凋亡率与H_2O_2组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 H_2O_2诱导血管内皮细胞氧化损伤,而下调Bax表达可以减少血管内皮细胞释放MDA、ET、LDH,促进细胞中NO合成,减少细胞凋亡,Bax可以减弱H_2O_2诱导的血管内皮细胞损伤。