琐琐葡萄多糖颗粒制备工艺的研究

目的:研究琐琐葡萄多糖颗粒剂的成型工艺。方法:以吸湿性、成型率、口感为指标,筛选出其处方中加入辅料的品种、配比及最佳成型工艺。结果:最佳制粒工艺条件为原料-乳糖-甘露醇=1∶0.375∶0.125,以65%乙醇为润湿剂,醇的用量为原料与辅料总量的35%,阿斯巴甜的加入量为原料与辅料总量的2.6%。结论:颗粒剂所选辅料合理,成型制备工艺简便可行。

超声法提取琐琐葡萄中总三萜的工艺研究

采用正交实验设计,利用超声法从琐琐葡萄中提取生物活性成分总三萜,比色法测定总三萜的含量。结果正交实验设计的四个因素:甲醇浓度、样品粒度、超声功率和提取时间对总三萜提取率均有影响(P<0.05)。超声法提取琐琐葡萄中总三萜的最佳提取工艺为:样品粉碎后过80目筛,纯甲醇为溶媒,在功率为210W时超声提取10min,总三萜提取率最高。

琐琐葡萄多糖的提取及抗氧化能力研究

目的:研究琐琐葡萄多糖(VVP)提取、分离、纯化的方法,探讨其抗氧化能力。方法:建立热水提取、乙醇沉淀、Sevage法除蛋白及透析、纯化VVP的方法,采用苯酚-硫酸法测定其含量,并比较了不同浓度VVP(200、400、600、800、1000μg/ml)和抗坏血酸(Vc50、100、200、400、600、800、1000μg/ml)的还原能力以及不同浓度VVP和VC(均为40、80、160、320、600、800μg/ml)清除二苯代苦味酰基(DPPH)自由基的能力。结果:VVP的还原能力及清除DPPH自由基的能力随其浓度的增加而增大,在800μg/ml时,DPPH自由基清除率达到90%以上,接近VC的清除率。结论:琐琐葡萄多糖具有较好的抗氧化能力。

葡萄精华软胶囊的制备工艺研究

目的:确立葡萄精华软胶囊的最佳成型工艺。方法:通过单因素筛选,确定葡萄精华软胶囊内容物处方中助悬剂以及抗氧化剂的用量,囊壳处方中色素及遮蔽剂的用量。结果:按内容物配方葡萄籽提取物17.5%,原花青素10%,蜂蜡3%,特丁基对苯二酚(TBHQ)0.01%,葡萄籽油72.5%,加热搅拌混匀,工艺最佳。二氧化钛(TiO2)、苋菜红、葡萄紫分别为0.5%、0.3%、0.1%时,其遮蔽及感观效果最好。结论:本制备工艺简单、稳定、可靠,可适用于工业化生产。

琐琐葡萄总黄酮对小鼠免疫性肝损伤保护作用的研究

目的:应用免疫性肝损伤模型研究琐琐葡萄总黄酮(VTF)对肝脏的保护作用,并对其作用机制进行初步探讨。方法:昆明种雄性小鼠72只,随机分为正常对照组、免疫性肝损伤模型组(卡介苗+脂多糖组)、联苯双酯(DDB)阳性对照组以及VTF低、中、高剂量组共6组,测定并比较各组小鼠肝脏、脾脏系数,采用连续监测法或比测法测定并比较各组小鼠肝组织匀浆中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、超氧化物歧化酶(SOD)活性以及丙二醛(MDA)含量,观察各组肝脏组织病理学变化。结果:VTF各剂量组(50、150、300mg/kg)均可显著降低免疫性肝损伤小鼠的肝脏系数和脾脏系数(P<0.01),并可显著升高小鼠肝组织中ALT、AST和SOD活性,降低MDA含量(P<0.01),且SOD活性随着VTF剂量的增大而升高(P<0.01);病理组织学检查结果显示VTF各剂量组可不同程度的改善肝组织病理损伤,与生化检查结果相一致。结论:VTF对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用。

琐琐葡萄多糖对小鼠免疫性肝损伤的保护作用及机制研究

目的观察琐琐葡萄多糖(VTP)对卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导小鼠免疫性肝损伤的保护作用,并探讨其作用机制。方法昆明种雄性小鼠72只,随机分为正常对照组、模型组、联苯双酯(DDB)阳性对照组以及VTP低、中、高剂量组共6组。除正常对照组外,其余各组均经尾静脉注射BCG致敏,次日起,除正常对照组和模型组给予蒸馏水外,阳性对照组灌胃给予DDB溶液200mg/kgbw,VTP低、中、高剂量组分别灌胃给予VTP溶液50、150、300mg/kgbw,连续12d。D12,除正常对照组外,其余各组均经尾静脉注射LPS,12h后采血,取肝脏、脾脏,分别测定脏器系数、生化指标、免疫指标,并观察肝脏病理组织学变化。结果VTP可显著降低免疫性肝损伤小鼠的肝脏系数和脾脏系数;并可显著升高小鼠肝组织中ALT、AST和SOD活性,降低MDA和NO含量;各组小鼠外周血中CD4+、CD8+细胞亚群比例无显著变化,但VTP可在一定程度上调节INF-γ、IL-2、IL-4和IL-10的分泌,恢复Th1/Th2细胞的平衡;病理组织学检查结果显示VTP可改善肝组织病理损伤,与生化检查结果相一致。结论VTP对小鼠免疫性肝损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与VTP的抗氧化功能及免疫调节功能有关。

琐琐葡萄多糖中糖醛酸含量的测定

目的:测定琐琐葡萄多糖中半乳糖醛酸的含量。方法:采用间羟基联苯法对琐琐葡萄多糖中的半乳糖醛酸进行含量测定,并研究了四硼酸钠/硫酸溶液用量,加酸后沸水浴时间、间羟基联苯溶液用量及中性糖对测定结果的影响。结果:该测定方法不受中性糖的影响,并测得琐琐葡萄多糖中半乳糖醛酸的平均百分含量为38.17%,RSD为1.65%。结论:间羟基联苯法简便、快速、准确,适用于对琐琐葡萄多糖中的半乳糖醛酸含量进行测定。

琐琐葡萄多糖对小鼠免疫功能的影响

目的:探讨琐琐葡萄多糖(VTP)对小鼠免疫功能的影响。方法:经热水提取、乙醇沉淀提取得到VTP,采用苯酚-硫酸法测定多糖含量,应用环磷酰胺制备免疫低下小鼠模型,通过测定给药后小鼠脾脏及胸腺指数、抗体分泌细胞功能、血清溶血素水平和脾淋巴细胞转化功能,研究VTP对免疫低下小鼠免疫功能的影响。结果:提取得到VTP粗品并测得其中多糖含量为20.68%,RSD为1.93%;与模型组相比,VTP可增加免疫低下模型小鼠脾脏的质量,有效促进小鼠脾淋巴细胞的转化功能,明显改善小鼠抗体分泌细胞的功能,并可使红细胞半数溶血值显著增高。结论:VTP对免疫低下模型小鼠的体液免疫功能和细胞免疫功能具有一定的保护作用。

琐琐葡萄三萜类成分在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用

目的:观察琐琐葡萄三萜类成分总三萜(VTT)和齐墩果酸(OA)在体外对大鼠免疫性肝损伤的保护作用,为阐明维药琐琐葡萄抗病毒作用的物质基础及其可能的作用机制提供理论依据,也为充分利用新疆葡萄的资源优势开发出安全、价廉、有效的抗病毒民族新药奠定基础。方法:Sprague-Dawley(SD)雄性大鼠6只,随机分为正常组与模型组,模型组采用卡介苗(BCG)整体致敏,脂多糖(LPS)离体攻击法建立大鼠原代肝细胞免疫损伤模型,模型组肝细胞分别加入DMEM培养液配制的200μg/ml二甲基亚砜溶液(DMSO),5、10、20μg/ml联苯双酯(DDB)溶液,5、20、80μg/mlVTT溶液或OA溶液,测定并比较不同培养时间(3、6、12、24h)各组肝细胞培养上清液中谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的活性和一氧化氮(NO)的含量。结果:正常大鼠肝细胞上清ALT、AST和NO基本未见改变,BCG+LPS损伤后大鼠肝细胞上清ALT、AST和NO在6、12和24h较正常大鼠明显升高(P<0.01),而VTT和OA(5、20、80μg/ml)均可程度不同地使升高的ALT、AST和NO明显下降(P<0.01)。琐琐葡萄三萜类成分VTT和OA的以上作用与阳性对照药物DDB相似。结论:琐琐葡萄三萜类成分VTT和OA在体外对大鼠免疫性肝损伤具有明显的保护作用。

葡萄籽提取物对免疫性肝损伤的保护作用

目的观察葡萄籽提取物(GSE)对免疫性肝损伤的保护作用。方法分别制备卡介苗(BCG)联合脂多糖(LPS)诱导的大鼠原代肝细胞免疫损伤模型和小鼠免疫性肝损伤模型,测定细胞培养上清和血清中的天冬氨酸转氨酶(AST)、丙氨酸转氨酶(ALT)活力及一氧化氮(NO)水平,肝组织超氧化物歧化酶(SOD)活力和丙二醛(MDA)含量,并进行肝脏病理组织学检查。结果在体外实验中,正常对照组大鼠肝细胞培养上清AST,ALT活力和NO水平24 h内未见明显变化,BCG+LPS损伤组大鼠肝细胞培养上清AST,ALT活力和NO水平在6、12和24 h较正常大鼠明显升高,加入LPS的同时分别加入GSE 5,20和80 mg/L均可不同程度地使升高的AST,ALT活力和NO水平下降。GSE上述作用与阳性对照药肝立欣(Grz)相似。体内实验表明,GSE 50,250和500 mg/kg(ig)均可明显降低免疫性肝损伤模型小鼠血清AST,ALT活力和肝组织MDA含量,升高肝组织SOD活力,并不同程度的减轻小鼠肝脏损伤。结论GSE对免疫性肝损伤具有明显的保护作用。